Разбор слов по составу

Разбор слова по составу

Тип лингвистического анализа, в результате которого определяется структура слова, а также его состав, называется морфемным анализом.

Виды морфем

В русском языке используются следующие морфемы:

— Корень. В нем заключается значение самого слова. Слова, у которых есть общий корень, считаются однокоренными. Иногда слово может иметь два и даже три корня.
— Суффикс. Обычно идет после корня и служит инструментом для образования других слов. К примеру, «гриб» и «грибник». В слове может быть несколько суффиксов, а может не быть совсем.
— Приставка. Находится перед корнем. Может отсутствовать.
— Окончание. Та часть слова, которая изменяется при склонении или спряжении.
— Основа. Часть слова, к которой относятся все морфемы, кроме окончания.

Важность морфемного разбора

В русском языке разбор слова по составу очень важен, ведь нередко для правильного написания слова необходимо точно знать, частью какой морфемы является проверяемая буква.

Многие правила русского языка построены на этой зависимости.

Пример

В качестве примера можно взять два слова: «чёрный» и «червячок». Почему в первом случае на месте ударной гласной мы пишем «ё», а не «о», как в слове «червячок»? Нужно вспомнить правило написания букв «ё», «е», «о» после шипящих, стоящих в корне слова. Если возможно поменять форму слова либо подобрать родственное ему так, чтобы «ё» чередовалась с «е», тогда следует ставить букву «ё» (чёрный — чернеть). Если чередование отсутствует, тогда ставится буква «о» (например, чокаться, шорты).

В случае же со словом «червячок» «-ок-» — это суффикс. Правило заключается в том, что в суффиксах, если стоящая после шипящих букв гласная находится под ударением, всегда пишется «о» (зрачок, снежок), в безударном случае — «е» (платочек, кармашек).

Как разобрать слово по составу

Для помощи начинающим существуют морфемно-орфографические словари. Можно выделить книги таких авторов, как Тихонов А.Н., Ожегов С.И., Рацибурская Л.В.

В любом слове непременно должны присутствовать корень и основа. Остальных морфем может и не быть. Иногда слово целиком может состоять из корня (или основы): «гриб», «чай» и т.д.

Этапы морфемного анализа

Чтобы морфемный разбор слов было легче осуществить, следует придерживаться определенного алгоритма:

— Сначала нужно определить часть речи, задав вопрос к слову. Для прилагательного это будет вопрос «какой?», для существительного — «что?» или «кто?».
— Затем нужно выделить окончание. Чтобы его найти, слово нужно просклонять по падежам, если часть речи это позволяет. Например, наречие изменить никак нельзя, поэтому у него не будет окончания.
— Далее нужно выделить основу у слова. Все, кроме окончания, — основа.

— Потом следует определить корень, подобрав родственные однокоренные слова.
— Определяется приставка, а потом суффиксы (при их наличии).

Особенности разбора

Иногда подход к морфемному разбору в программах университета и школы может отличаться. Во всех случаях различия аргументированы и имеют право на существование. Поэтому стоит ориентироваться на морфемный словарь, рекомендованный в конкретном учебном заведении.

What is Google Sans Text?

Browse Eckher Glossary and expand your business and technology vocabulary.

What does npm exec do? What is the difference between «npm exec» and «npx»?

What are the building blocks of OWL ontologies?

Learn more about «RDF star», «SPARQL star», «Turtle star», «JSON-LD star», «Linked Data star», and «Semantic Web star».

The Hadamard gate is one of the simplest quantum gates which acts on a single qubit.

Learn more about the bra–ket notation.

Progressive Cactus is an evolution of the Cactus multiple genome alignment protocol that uses the progressive alignment strategy.

The Human Genome Project is an ambitious project which is still underway.

What are SVMs (support vector machines)?

Find out more in Eckher’s article about TensorFlow.js and linear regression.

On the importance of centralised metadata registries at companies like Uber.

Facebook’s Nemo is a new custom-built platform for internal data discovery. Learn more about Facebook’s Nemo.

What is Data Commons (datacommons.org)? Read Eckher’s introduction to Data Commons (datacommons.org) to learn more about the open knowledge graph built from thousands of public datasets.

Learn more about how Bayer uses semantic web technologies for corporate asset management and why it enables the FAIR data in the corporate environment.

An introduction to WikiPathways by Eckher is an overview of the collaboratively edited structured biological pathway database that discusses the history of the project, applications of the open dataset, and ways to access the data programmatically.

Eckher’s article about question answering explains how question answering helps extract information from unstructured data and why it will become a go-to NLP technology for the enterprise.

Read more about how document understanding AI works, what its industry use cases are, and which cloud providers offer this technology as a service.

Lexemes are Wikidata’s new type of entity used for storing lexicographical information. The article explains the structure of Wikidata lexemes and ways to access the data, and discusses the applications of the linked lexicographical dataset.

The guide to exploring linked COVID-19 datasets describes the existing RDF data sources and ways to query them using SPARQL. Such linked data sources are easy to interrogate and augment with external data, enabling more comprehensive analysis of the pandemic both in New Zealand and internationally.

The introduction to the Gene Ontology graph published by Eckher outlines the structure of the GO RDF model and shows how the GO graph can be queried using SPARQL.

The overview of the Nobel Prize dataset published by Eckher demonstrates the power of Linked Data and demonstrates how linked datasets can be queried using SPARQL. Use SPARQL federation to combine the Nobel Prize dataset with DBPedia.

Learn why federated queries are an incredibly useful feature of SPARQL.

What are the best online Arabic dictionaries?

How to pronounce numbers in Arabic?

List of months in Maori.

Days of the week in Maori.

The list of country names in Tongan.

The list of IPA symbols.

What are the named entities?

What is computational linguistics?

Learn how to use the built-in React hooks.

Learn how to use language codes in HTML.

Learn about SSML.

Browse the list of useful UX resources from Google.

Where to find the emoji SVG sources?.

What is Wikidata?

What’s the correct markup for multilingual websites?

How to use custom JSX/HTML attributes in TypeScript?

Learn more about event-driven architecture.

Where to find the list of all emojis?

How to embed YouTube into Markdown?

What is the Google Knowledge Graph?

Learn SPARQL.

Explore the list of coronavirus (COVID-19) resources for bioinformaticians and data science researchers.

Sequence logos visualize protein and nucleic acid motifs and patterns identified through multiple sequence alignment. They are commonly used widely to represent transcription factor binding sites and other conserved DNA and RNA sequences. Protein sequence logos are also useful for illustrating various biological properties of proteins. Create a sequence logo with Sequence Logo. Paste your multiple sequence alignment and the sequence logo is generated automatically. Use the sequence logo maker to easily create vector sequence logo graphs. Please refer to the Sequence Logo manual for the sequence logo parameters and configuration. Sequence Logo supports multiple color schemes and download formats.

Sequence Logo is a web-based sequence logo generator. Sequence Logo generates sequence logo diagrams for proteins and nucleic acids. Sequence logos represent patterns found within multiple sequence alignments. They consist of stacks of letters, each representing a position in the sequence alignment. Sequence Logo analyzes the sequence data inside the user’s web browser and does not store or transmit the alignment data via servers.

Te Reo Maps is an online interactive Maori mapping service. All labels in Te Reo Maps are in Maori, making it the first interactive Maori map. Te Reo Maps is the world map, with all countries and territories translated into Maori. Please refer to the list of countries in Maori for the Maori translations of country names. The list includes all UN members and sovereign territories.

Phonetically is a web-based text-to-IPA transformer. Phonetically uses machine learning to predict the pronunciation of English words and transcribes them using IPA.

Punycode.org is a tool for converting Unicode-based internationalized domain names to ASCII-based Punycode encodings. Use punycode.org to quickly convert Unicode to Punycode and vice versa. Internationalized domains names are a new web standard that allows using non-ASCII characters in web domain names.

My Sequences is an online platform for storing and analyzing personal sequence data. My Sequences allows you to upload your genome sequences and discover insights and patterns in your own DNA.

Словообразовательный словарь «Морфема» дает представление о морфемной структуре слов русского языка и слов современной лексики. Для словообразовательного анализа представлены наиболее употребительные слова современного русского языка, их производные и словоформы. Словарь предназначен школьникам, студентам и преподавателям. Статья разбора слова «сладкоежка» по составу показывает, что это слово имеет два корня, соединительную гласную, суффикс и окончание. На странице также приведены слова, содержащие те же морфемы. Словарь «Морфема» включает в себя не только те слова, состав которых анализируется в процессе изучения предмета, но и множество других слов современного русского языка. Словарь адресован всем, кто хочет лучше понять структуру русского языка.

Разбор слова «кормушка» по составу.

Разбор слова «светить» по составу.

Разбор слова «сбоку» по составу.

Разбор слова «шиповник» по составу.

Разбор слова «народ» по составу.

Разбор слова «впервые» по составу.

Разбор слова «свежесть» по составу.

Разбор слова «издалека» по составу.

Разбор слова «лесной» по составу.

How to pronounce «Schmigadoon!» in English?

How to pronounce «DaniLeigh» in English?

How to pronounce «Miesha Tate» in English?

How to pronounce «Camila Cabello» in English?

How to pronounce «Tradjenta» in English?

How to pronounce «Agricola» in English?

How to pronounce «Sanofi» in English?

How to pronounce «Jeff Bezos» in English?

How to pronounce «Coronaviridae» in English?

How to pronounce «Tua Tagovailoa» in English?

How to pronounce «Craig Federighi» in English?

How to pronounce «Stefanos Tsitsipas» in English?

How to pronounce «SZA» in English?

How to pronounce «Cassie Kozyrkov» in English?

Теркин на том свете — Твардовский. Полный текст стихотворения — Теркин на том свете

Тридцати неполных лет —
Любо ли не любо —
Прибыл Теркин
На тот свет,
А на этом убыл.

Убыл-прибыл в поздний час
Ночи новогодней.
Осмотрелся в первый раз
Теркин в преисподней…

Так пойдет — строка в строку
Вразворот картина.
Но читатель начеку:
— Что за чертовщина!

— В век космических ракет,
Мировых открытий —
Странный, знаете, сюжет
— Да, не говорите!..

— Ни в какие ворота.
— Тут не без расчета…
— Подоплека не проста.
— То-то и оно-то…

x x x

И держись: наставник строг
Проницает с первых строк…

Ах, мой друг, читатель-дока,
Окажи такую честь:
Накажи меня жестоко,
Но изволь сперва прочесть.

Не спеши с догадкой плоской,
Точно критик-грамотей,
Всюду слышать отголоски
Недозволенных идей.

И с его лихой ухваткой
Подводить издалека —
От ущерба и упадка
Прямо к мельнице врага.

И вздувать такие страсти
Из запаса бабьих снов,
Что грозят Советской власти
Потрясением основ.

Не ищи везде подвоха,
Не пугай из-за куста.
Отвыкай. Не та эпоха —
Хочешь, нет ли, а не та!

И доверься мне по старой
Доброй дружбе грозных лет:
Я зазря тебе не стану
Байки баять про тот свет.

Суть не в том, что рай ли с адом,
Черт ли, дьявол — все равно:
Пушки к бою едут задом, —
Это сказано давно…

Вот и все, чем автор вкратце
Упреждает свой рассказ,
Необычный, может статься,
Странный, может быть, подчас.
Но — вперед. Перо запело.
Что к чему — покажет дело.

x x x

Повторим: в расцвете лет,
В самой доброй силе
Ненароком на тот свет
Прибыл наш Василий.

Поглядит — светло, тепло,
Ходы-переходы —
Вроде станции метро,
Чуть пониже своды.

Перекрытье — не чета
Двум иль трем накатам.
Вот где бомба ни черта
Не проймет — куда там!

(Бомба! Глядя в потолок
И о ней смекая,
Теркин знать еще не мог,
Что — смотря какая.

Что от нынешней — случись
По научной смете —
Так, пожалуй, не спастись
Даже на том свете.)

И еще — что явь, что сон —
Теркин не уверен,
Видит, валенками он
Наследил у двери.
А порядок, чистота —
Не приткнуть окурок.
Оробел солдат спроста
И вздохнул:
— Культура…

Вот такие бы везде
Зимние квартиры.
Поглядим — какие где
Тут ориентиры.

Стрелка «Вход». А «Выход»? Нет.
Ясно и понятно:
Значит, пламенный привет, —
Путь закрыт обратный.

Значит, так тому и быть,
Хоть и без привычки.
Вот бы только нам попить
Где-нибудь водички.

От неведомой жары
В горле зачерствело.
Да потерпим до поры,
Не в новинку дело.

Видит Теркин, как туда,
К станции конечной,
Прибывают поезда
Изо мглы предвечной.
И выходит к поездам,
Важный и спокойный,
Того света комендант —
Генерал-покойник.
Не один — по сторонам
Начеку охрана.
Для чего — судить не нам,
Хоть оно и странно:
Раз уж списан ты сюда,
Кто б ты ни был чином,
Впредь до Страшного суда
Трусить нет причины.

По уставу, сделав шаг,
Теркин доложился:
Мол, такой-то, так и так,
На тот свет явился.

Генерал, угрюм на вид,
Голосом усталым:
— А с которым, — говорит, —
Прибыл ты составом?

Теркин — в струнку, как стоял,
Тем же самым родом:
— Я, товарищ генерал,
Лично, пешим ходом.
— Как так пешим?
— Виноват.
(Строги коменданты!)
— Говори, отстал, солдат,
От своей команды?

Так ли, нет ли — все равно
Спорить не годится.
— Ясно! Будет учтено.
И не повторится.

— Да уж тут что нет, то нет,
Это, брат, бесспорно,
Потому как на тот свет
Не придешь повторно.

Усмехнулся генерал:
— Ладно. Оформляйся.
Есть порядок — чтоб ты знал —
Тоже, брат, хозяйство.
Всех прими да всех устрой —
По заслугам место.
Кто же трус, а кто герой —
Не всегда известно.

Дисциплина быть должна
Четкая до точки:
Не такая, брат, война,
Чтоб поодиночке…
Проходи давай вперед —
Прямо по платформе.

— Есть идти! —
И поворот
Теркин дал по форме.

И едва за стрелкой он
Повернул направо —
Меж приземистых колонн —
Первая застава.

Тотчас все на карандаш:
Имя, номер, дату.
— Аттестат в каптерку сдашь,
Говорят солдату.

Удивлен весьма солдат:
— Ведь само собою —
Не положен аттестат
Нам на поле боя.
Раз уж я отдал концы —
Не моя забота.

— Все мы, братец, мертвецы,
А порядок — вот он.
Для того ведем дела
Строго — номер в номер, —
Чтобы ясность тут была,
Правильно ли помер.
Ведь случалось иногда —
Рана несмертельна,
А его зашлют сюда,
С ним возись отдельно.
Помещай его сперва
В залу ожиданья…
(Теркин мельком те слова
Принял во вниманье.)

— Ты понятно, новичок,
Вот тебе и дико.
А без формы на учет
Встань у нас поди-ка.

Но смекнул уже солдат:
Нет беды великой.
То ли, се ли, а назад
Вороти поди-ка.

Осмелел, воды спросил:
Нет ли из-под крана?
На него, глаза скосив,
Посмотрели странно.

Да вдобавок говорят,
Усмехаясь криво:
— Ты еще спросил бы, брат,
На том свете пива…

И довольны все кругом
Шуткой той злорадной.
Повернул солдат кру-гом:
— Будьте вы неладны…
Позади Учетный стол,
Дальше — влево стрелки.
Повернул налево — стоп,
Смотрит:
Стол проверки.
И над тем уже Столом —
Своды много ниже,
Свету меньше, а кругом —
Полки, сейфы, ниши;
Да шкафы, да вертлюги
Сзади, как в аптеке;
Книг толстенных корешки,
Папки, картотеки.
И решеткой обнесен
Этот Стол кромешный
И кромешный телефон
(Внутренний, конечно).

И доносится в тиши
Точно вздох загробный:
— Авто-био опиши
Кратко и подробно…

Поначалу на рожон
Теркин лезть намерен:
Мол, в печати отражен,
Стало быть, проверен.

— Знаем: «Книга про бойца».
— Ну так в чем же дело?
— «Без начала, без конца» —
Не годится в «Дело».
— Но поскольку я мертвец…
— Это толку мало.
— …То не ясен ли конец?
— Освети начало.

Уклоняется солдат:
— Вот еще обуза.
Там же в рифму все подряд,
Автор — член союза…

— Это — мало ли чего,
Той ли меркой мерим.
Погоди, и самого
Автора проверим…

Видит Теркин, что уж тут
И беда, пожалуй:
Не напишешь, так пришьют
От себя начало.

Нет уж, лучше, если сам.
И у спецконторки,
Примостившись, написал
Авто-био Теркин.

x x x

По графам: вопрос — ответ.
Начал с предков — кто был дед.
«Дед мой сеял рожь, пшеницу,
Обрабатывал надел.
Он не ездил за границу,
Связей также не имел.
Пить — пивал. Порой без шапки
Приходил, в сенях шумел.
Но, помимо как от бабки,
Он взысканий не имел.
Не представлен был к награде,
Не был дед передовой.
И отмечу правды ради —
Не работал над собой.
Уклонялся.
И постольку
Близ восьмидесяти лет
Он не рос уже нисколько,
Укорачивался дед…»

x x x

Так и далее — родных
Отразил и близких,
Всех, что числились в живых
И посмертных списках.

Стол проверки бросил взгляд
На его работу:
— Расписался? То-то, брат.
Следующий — кто там?

Впрочем, стой, — перелистал,
Нет ли где помарок.
— Фотокарточки представь
В должных экземплярах…
Докажи тому Столу:
Что ж, как не запасся,
Как за всю войну в тылу
Не был ты ни часа.
— До поры была со мной
Карточка из дома —
Уступить пришлось одной,
Скажем так, знакомой…
Но суров закон Стола,
Голос тот усопший:
— Это личные дела,
А порядок общий.

И такого никогда
Не знавал при жизни —
Слышит:
— Палец дай сюда,
Обмакни да тисни.

Передернуло всего,
Но махнул рукою.
— Палец? Нате вам его.
Что еще другое?..

Вышел Теркин на простор
Из-за той решетки.
Шаг, другой — и вот он, Стол
Медсанобработки.
Подошел — не миновать
Предрешенной встречи.
И, конечно же, опять
Не был обеспечен.

Не подумал, сгоряча
Протянувши ноги,
Что без подписи врача
В вечность нет дороги;

Что и там они, врачи,
Всюду наготове
Относительно мочи
И солдатской крови.

Ахнул Теркин:
— Что за черт,
Что за постановка:
Ну как будто на курорт
Мне нужна путевка!
Сколько всяческой возни
В их научном мире.

Вдруг велят:
— А ну, дыхни,
Рот разинь пошире.
Принимал?
— Наоборот. —
И со вздохом горьким:
— Непонятный вы народ, —
Усмехнулся Теркин.

— Кабы мне глоток-другой
При моем раненье,
Я бы, может, ни ногой
В ваше заведенье…

x x x

Но солдат — везде солдат:
То ли, се ли — виноват.
Виноват, что в этой фляге
Не нашлось ни капли влаги, —
Старшина был скуповат,
Не уважил — виноват.

Виноват, что холод жуткий
Жег тебя вторые сутки,
Что вблизи упал снаряд,
Разорвался — виноват.
Виноват, что на том свете
За живых мертвец в ответе.

Но молчи, поскольку — тлен,
И терпи волынку.
Пропустили сквозь рентген
Всю его начинку.

Не забыли ничего
И науки ради
Исписали на него
Толстых три тетради.

Молоточком — тук да тук,
Хоть оно и больно,
Обстучали все вокруг —
Чем-то недовольны.

Рассуждают — не таков
Запах. Вот забота:
Пахнет парень табаком
И солдатским потом.

Мол, покойник со свежа
Входит в норму еле,
Словно там еще душа
Притаилась в теле.

Но и полных данных нет,
Снимок, что ль, нечеткий.
— Приготовься на предмет
Общей обработки.

— Баня? С радостью туда,
Баня — это значит
Перво-наперво — вода.
— Нет воды горячей.
— Ясно! Тот и этот свет
В данном пункте сходны.
И холодной тоже нет?
— Нету. Душ безводный.

— Вот уж это никуда! —
Возмутился Теркин.
— Здесь лишь мертвая вода.
— Ну, давайте мертвой.

— Это — если б сверху к нам,
Поясняет некто, —
Ты явился по частям,
То есть некомплектно.
Мы бы той тебя водой
Малость покропили,
Все детали меж собой
В точности скрепили.
И готов — хоть на парад —
Ты во всей натуре…
Приступай давай, солдат,
К общей процедуре.

Снявши голову, кудрей
Не жалеть, известно.
— Ах, валяйте, да скорей,
Мне бы хоть до места…

Раз уж так пошли дела,
Не по доброй воле,
Теркин ищет хоть угла
В мрачной той юдоли.

С недосыпу на земле,
Хоть как есть, в одеже,
Отоспаться бы в тепле —
Ведь покой положен.

Вечный, сказано, покой —
Те слова не шутки.
Ну, а нам бы хоть какой,
Нам бы хоть на сутки.

Впереди уходят вдаль,
В вечность коридоры —
Того света магистраль, —
Кверху семафоры.

И видны за полверсты,
Чтоб тебе не сбиться,
Указателей персты,
Надписи, таблицы…

Строгий свет от фонарей,
Сухость в атмосфере.
А дверей — не счесть дверей,
И какие двери!

Все плотны, заглушены
Способом особым,
Выступают из стены
Вертикальным гробом.

И какую ни открой —
Ударяет сильный,
Вместе пыльный и сырой,
Запах замогильный.

И у тех, что там сидят,
С виду как бы люди,
Означает важный взгляд:
«Нету. И не будет».

Теркин мыслит: как же быть,
Где искать начало?
«Не мешай руководить!» —
Надпись подсказала.

Что тут делать? Наконец
Набрался отваги —
Шасть к прилавку, где мертвец
Подшивал бумаги.

Мол, приписан к вам в запас
Вечный — и поскольку
Нахожусь теперь у вас,
Мне бы, значит, койку…

Взглядом сонным и чужим
Тот солдата смерил,
Пальцем — за ухо — большим
Указал на двери
В глубине.
Солдат — туда,
Потянул за ручку.
Слышит сзади:
— Ах, беда
С этою текучкой…

Там за дверью первый стол, —
Без задержки следуй —
Тем же, за ухо, перстом
Переслал к соседу.

И вели за шагом шаг
Эти знаки всуе,
Без отрыва от бумаг
Дальше указуя.

Но в конце концов ответ
Был членораздельный:
— Коек нет. Постели нет.
Есть приклад постельный.
— Что приклад? На кой он ляд?
Как же в этом разе?
— Вам же ясно говорят:
Коек нет на базе.
Вам же русским языком…
Простыни в просушке.
Может выдать целиком
Стружки
Для подушки.

Соответственны слова
Древней волоките:
Мол, не сразу и Москва,
Что же вы хотите?

Распишитесь тут и там,
Пропуск ваш отмечен.
Остальное — по частям.
— Тьфу ты! — плюнуть нечем.

Смех и грех: навек почить,
Так и то на деле
Было б легче получить
Площадь в жилотделе.

Да притом, когда б живой
Слышал речь такую,
Я ему с его «Москвой»
Показал другую.

Я б его за те слова
Спосылал на базу.
Сразу ль, нет ли та «Москва»,
Он бы понял сразу!

Я б ему еще вкатил
По гвардейской норме,
Что такое фронт и тыл —
Разъяснил бы в корне…

И уже хотел уйти,
Вспомнил, что, пожалуй,
Не мешало б занести
Вывод в книгу жалоб.

Но отчетлив был ответ
На вопрос крамольный:
— На том свете жалоб нет,
Все у нас довольны.

Книги незачем держать, —
Ясность ледяная.
— Так, допустим. А печать —
Ну хотя б стенная?

— Как же, есть.
Пройти пустяк —
За угол направо.
Без печати — как же так,
Только это зря вы…

Ладно.
Смотрит — за углом —
Орган того света.
Над редакторским столом —
Надпись: «Гробгазета».

За столом — не сам, так зам, —
Нам не все равно ли, —
— Я вас слушаю, — сказал,
Морщась, как от боли.

Полон доблестных забот,
Перебил солдата:
— Не пойдет. Разрез не тот.
В мелком плане взято.

Авторучкой повертел.
— Да и места нету.
Впрочем, разве что в Отдел
Писем без ответа…

И в бессонный поиск свой
Вникнул снова с головой.

Весь в поту, статейки правит,
Водит носом взад-вперед:
То убавит, то прибавит,
То свое словечко вставит,
То чужое зачеркнет.
То его отметит птичкой,
Сам себе и Глав и Лит,
То возьмет его в кавычки,
То опять же оголит.

Знать, в живых сидел в газете,
Дорожил большим постом.
Как привык на этом свете,
Так и мучится на том.

Вот притих, уставясь тупо,
Рот разинут, взгляд потух.
Вдруг навел на строчки лупу,
Избоченясь, как петух.

И последнюю проверку
Применяя, тот же лист
Он читает снизу кверху,
А не только сверху вниз.
Верен памятной науке,
В скорбной думе морщит лоб.

Попадись такому в руки
Эта сказка — тут и гроб!
Он отечески согретым
Увещаньем изведет.
Прах от праха того света,
Скажет: что еще за тот?

Что за происк иль попытка
Воскресить вчерашний день,
Неизжиток
Пережитка
Или тень на наш плетень?
Впрочем, скажет, и не диво,
Что избрал ты зыбкий путь.
Потому — от коллектива
Оторвался — вот в чем суть.

Задурил, кичась талантом, —
Да всему же есть предел, —
Новым, видите ли, Дантом
Объявиться захотел.

Как же было не в догадку —
Просто вызвать на бюро
Да призвать тебя к порядку,
Чтобы выправил перо.

Чтобы попусту бумагу
На авось не тратил впредь:
Не писал бы этак с маху —
Дал бы планчик просмотреть.

И без лишних притязаний
Приступал тогда к труду,
Да последних указаний
Дух всегда имел в виду.

Дух тот брал бы за основу
И не ведал бы прорух…

Тут, конечно, автор снова
Возразил бы:
— Дух-то дух.
Мол, и я не против духа,
В духе смолоду учен.
И по части духа —
Слуха,
Да и нюха —
Не лишен.

Но притом вопрос не праздный
Возникает сам собою:
Ведь и дух бывает разный —
То ли мертвый, то ль живой.
За свои слова в ответе
Я недаром на посту:
Мертвый дух на этом свете
Различаю за версту.
И не той ли метой мечен
Мертвых слов твоих набор.
Что ж с тобой вести мне речи —
Есть с живыми разговор!

Проходите без опаски
За порог открытой сказки
Вслед за Теркиным моим —
Что там дальше — поглядим.

Помещенья вроде ГУМа —
Ходишь, бродишь, как дурной.
Только нет людского шума —
Всюду вечный выходной.

Сбился с ног, в костях ломота,
Где-нибудь пристать охота.

x x x

Галереи — красота,
Помещений бездна,
Кабинетов до черта,
А солдат без места.

Знать не знает, где привал
Маеты бессонной,
Как тот воин, что отстал
От своей колонны.

Догони — и с плеч гора,
Море по колено.
Да не те все номера,
Знаки и эмблемы.

Неизвестных столько лиц,
Все свои, все дома.
А солдату — попадись
Хоть бы кто знакомый.

Всем по службе недосуг,
Смотрят, не вникая…
И не ждал, не думал — вдруг
Встреча. Да какая!

В двух шагах перед тобой
Друг-товарищ фронтовой.

Тот, кого уже и встретить
Ты не мог бы в жизни сей.
Но и там — и на том свете —
Тоже худо без друзей…

Повстречал солдат солдата,
Друга памятных дорог,
С кем от Бреста брел когда-то,
Пробираясь на восток.

С кем расстался он, как с другом
Расстается друг-солдат,
Второпях — за недосугом
Совершить над ним обряд.

Не посетуй, что причалишь
К месту сам, а мне — вперед.
Не прогневайся, товарищ.
И не гневается тот.

Только, может, в миг прощальный,
Про себя, живой солдат
Тот безропотно-печальный
И уже нездешний, дальний,
Протяженный в вечность взгляд
Навсегда в душе отметит,
Хоть уже дороги врозь…

— Друг-товарищ, на том свете —
Вот где встретиться пришлось…

Вот он — в блеклой гимнастерке
Без погон —
Из тех времен.
«Значит, все, — подумал Теркин, —
Я — где он.
И все — не сон».

— Так-то брат… —
Слова излишни.
Поздоровались. Стоят.
Видит Теркин: друг давнишний
Встрече как бы и не рад.

По какой такой причине —
На том свете ли обвык
Или, может, старше в чине
Он теперь, чем был в живых?

— Так-то, Теркин…
— Так, примерно:
Не понять — где фронт, где тыл.
В окруженье — в сорок первом —
Хоть какой, но выход был.

Был хоть запад и восток,
Хоть в пути паек подножный,
Хоть воды, воды глоток!

Отоспись в чащобе за день,
Ночью двигайся. А тут?
Дай хоть где-нибудь присядем —
Ноги в валенках поют…

Повернули с тротуара
В глубь задворков за углом,
Где гробы порожней тарой
Были свалены на слом.

Размещайся хоть на дневку,
А не то что на привал.
— Доложи-ка обстановку,
Как сказал бы генерал.

Где тут линия позиций, —
Жаль, что карты нет со мной,
Ну, хотя б-в каких границах
Расположен мир иной?..

— Генерал ты больно скорый,
Уточнился бы сперва:
Мир иной — смотря который, —
Как-никак их тоже два.

И от ног своих разутых,
От портянок отвлечен,
Теркин — тихо:
— Нет, без шуток?..—
Тот едва пожал плечом.

— Ты-то мог не знать — заглазно.
Есть тот свет, где мы с тобой,
И конечно, буржуазный
Тоже есть, само собой.

Всяк свои имеет стены
При совместном потолке.
Два тех света, две системы,
И граница на замке.

Тут и там свои уставы
И, как водится оно, —
Все иное — быт и нравы…
— Да не все ли здесь равно?

— Нет, брат, — все тому подобно,
Как и в жизни — тут и там.
— Но позволь: в тиши загробной
Тоже — труд, и капитал,
И борьба, и все такое?..

— Нет, зачем. Какой же труд,
Если вечного покоя
Обстановка там и тут.

— Значит, как бы в обороне
Загорают — тут и там?
— Да. И, ясно, прежней роли
Не играет капитал.

Никакой ему лазейки,
Вечность вечностью течет.
Денег нету ни копейки,
Капиталу только счет.

Ну, а в части распорядка —
Наш подъем — для них отбой,
И поверка, и зарядка
В разный срок, само собой.

Вот и все тебе известно,
Что у нас и что у них.

— Очень, очень интересно…-
Теркин в горести поник.

— Кто в иную пору прибыл,
Тот как хочешь, а по мне —
Был бы только этот выбор, —
Я б остался на войне.

На войне о чем хлопочешь?
Ждешь скорей ее конца.
Что там слава или почесть
Без победы для бойца.

Лучше нет — ее, победу,
Для живых в бою добыть.
И давай за ней по следу,
Как в жару к воде — попить.

Не о смертном думай часе —
В нем ли главный интерес:
Смерть —
Она всегда в запасе,
Жизнь — она всегда в обрез.

— Так ли, друг?
— Молчи, вояка,
Время жизни истекло.
— Нет, скажи: и так, и всяко,
Только нам не повезло.

Не по мне лежать здесь лежнем,
Да уж выписан билет.
Ладно, шут с ним, с зарубежным,
Говори про наш тот свет.

— Что ж, вопрос весьма обширен.
Вот что главное усвой:
Наш тот свет в загробном мире —
Лучший и передовой.

И поскольку уготован
Всем нам этак или так,
Он научно обоснован —
Не на трех стоит китах.

Где тут пекло, дым иль копоть
И тому подобный бред?
— Все же, знаешь, сильно топят, —
Вставил Теркин, — мочи нет.

— Да не топят, зря не сетуй,
Так сдается иногда.
Кто по-зимнему одетый
Транспортирован сюда.

Здесь ни холодно, ни жарко —
Ни полена дров, учти.
Точно так же — райских парков
Даже званья не найти.

С басней старой все несходно —
Где тут кущи и сады?
— А нельзя ль простой, природной
Где-нибудь глотнуть воды?

— Забываешь, Теркин, где ты,
Попадаешь в ложный след:
Потому воды и нету,
Что, понятно, спросу нет.

Недалек тот свет соседний,
Там, у них, на старый лад —
Все пустые эти бредни:
Свежесть струй и адский чад.

И запомни, повторяю:
Наш тот свет в натуре дан:
Тут ни ада нет, ни рая,
Тут — наука, там — дурман…

Там у них устои шатки,
Здесь фундамент нерушим,
Есть, конечно, недостатки, —
Но зато тебе — режим.

Там, во-первых, дисциплина
Против нашенской слаба.
И, пожалуйста, картина:
Тут — колонна, там — толпа.

Наш тот свет организован
С полной четкостью во всем:
Распланирован по зонам,
По отделам разнесен.
Упорядочен отменно —
Из конца пройди в конец.
Посмотри:
Отдел военный,
Он, понятно, образец.

Врать привычки не имею,
Ну, а ежели соврал,
Так на местности виднее, —
Поднимайся, генерал…

И в своем строю лежачем
Им предстал сплошной грядой
Тот Отдел, что обозначен
Был армейскою звездой.

Лица воинов спокойны,
Точно видят в вечном сне,
Что, какие были войны,
Все вместились в их войне.

Отгремел их край передний,
Мнится им в безгласной мгле,
Что была она последней,
Эта битва на земле;

Что иные поколенья
Всех пребудущих годов
Не пойдут на пополненье
Скорбной славы их рядов…

— Четкость линий и дистанций,
Интервалов чистота…
А возьми Отдел гражданский —
Нет уж, выправка не та.
Разнобой не скрыть известный —
Тот иль этот пост и вес:
Кто с каким сюда оркестром
Был направлен или без…
Кто с профкомовской путевкой,
Кто при свечке и кресте.
Строевая подготовка
Не на той уж высоте…

Теркин будто бы рассеян, —
Он еще и до войны
Дань свою отдал музеям
Под командой старшины.

Там соха иль самопрялка,
Шлемы, кости, древний кнут, —
Выходного было жалко,
Но иное дело тут.

Тут уж верно — случай редкий
Все увидеть самому.
Жаль, что данные разведки
Не доложишь никому.

Так, дивясь иль брови хмуря,
Любознательный солдат
Созерцал во всей натуре
Тот порядок и уклад.

Ни покоя, мыслит Теркин,
Ни веселья не дано.
Разобрались на четверки
И гоняют в домино.

Вот где самая отрада —
Уж за стол как сел, так сел,
Разговаривать не надо,
Думать незачем совсем.

Разгоняют скукой скуку —
Но таков уже тот свет:
Как ни бьют — не слышно стуку,
Как ни курят — дыму нет.

Ах, друзья мои и братья,
Кто в живых до сей поры,
Дорогих часов не тратьте
Для загробной той игры.

Ради жизни скоротечной
Отложите тот «забой»:
Для него нам отпуск вечный
Обеспечен сам собой…

Миновал костяшки эти,
Рядом — тоже не добро:
Заседает на том свете
Преисподнее бюро.

Здесь уж те сошлись, должно быть,
Кто не в силах побороть
Заседаний вкус особый,
Им в живых изъевший плоть.

Им ни отдыха, ни хлеба, —
Как усядутся рядком,
Ни к чему земля и небо —
Дайте стены с потолком.

Им что вёдро, что ненастье,
Отмеряй за часом час,
Целиком под стать их страсти
Вечный времени запас.

Вот с величьем натуральным
Над бумагами склонясь,
Видно, делом персональным
Занялися — то-то сласть.

Тут ни шутки, ни улыбки —
Мнимой скорби общий тон.
Признает мертвец ошибки
И, конечно, врет при том.

Врет не просто скуки ради,
Ходит краем, зная край.
Как послушаешь — к награде
Прямо с ходу представляй.

Но позволь, позволь, голубчик,
Так уж дело повелось,
Дай копнуть тебя поглубже,
Просветить тебя насквозь.

Не мозги, так грыжу вправить,
Чтобы взмокнул от жары,
И в конце на вид поставить
По условиям игры…

Стой-постой! Видать персону.
Необычный индивид
Сам себе по телефону
На два голоса звонит.

Перед мнимой секретаршей
Тем усердней мечет лесть,
Что его начальник старший —
Это лично он и есть.

И упившись этим тоном,
Вдруг он, голос изменив,
Сам с собою — подчиненным —
Наставительно учтив.

Полон власти несравнимой,
Обращенной вниз, к нулю,
И от той игры любимой
Мякнет он, как во хмелю…

Отвернувшись от болвана
С гордой истовостью лиц,
Обсудить проект романа
Члены некие сошлись.

Этим членам все известно,
Что в романе быть должно
И чему какое место
Наперед отведено.

Изложив свои наметки,
Утверждают по томам.
Нет — чтоб сразу выпить водки,
Закусить — и по домам.

Дальше — в жесткой обороне
Очертил запретный круг
Кандидат потусторонних
Или доктор прахнаук.

В предуказанном порядке
Книжки в дело введены,
В них закладками цитатки
Для него застолблены.

Вперемежку их из книжек
На живую нитку нижет,
И с нее свисают вниз
Мертвых тысячи страниц…

За картиною картина,
Хлопцы дальше держат путь.
Что-то вслух бубнит мужчина,
Стоя в ящике по грудь.

В некий текст глаза упрятал,
Не поднимет от листа.
Надпись: «Пламенный оратор» —
И мочалка изо рта.

Не любил и в жизни бренной
Мой герой таких речей.
Будь ты штатский иль военный,
Дай тому, кто побойчей.

Нет, такого нет порядка,
Речь он держит лично сам.
А случись, пройдет не гладко,
Так не он ее писал.
Все же там, в краю забвенья,
Свой особый есть резон:
Эти длительные чтенья
Укрепляют вечный сон…

Вечный сон. Закон природы.
Видя это все вокруг,
Своего экскурсовода
Теркин спрашивает вдруг:

— А какая здесь работа,
Чем он занят, наш тот свет?
То ли, се ли — должен кто-то
Делать что-то?
— То-то — нет.

В том-то вся и закавыка
И особый наш уклад,
Что от мала до велика
Все у нас руководят.

— Как же так — без производства,
Возражает новичок, —
Чтобы только руководство?
— Нет, не только. И учет.

В том-то, брат, и суть вопроса,
Что темна для простаков:
Тут ни пашни, ни покоса,
Ни заводов, ни станков.
Нам бы это все мешало —
Уголь, сталь, зерно, стада…

— Ах, вот так! Тогда, пожалуй,
Ничего. А то беда.
Это вроде как машина
Скорой помощи идет:
Сама режет, сама давит,
Сама помощь подает.

— Ты, однако, шутки эти
Про себя, солдат, оставь.
— Шутки!
Сутки на том свете —
Даже к месту не пристал.

Никому бы не мешая,
Без бомбежки да в тепле
Мне поспать нужда большая
С недосыпу на земле.

— Вот чудак, ужели трудно
Уяснить простой закон:
Так ли, сяк ли — беспробудный
Ты уже вкушаешь сон.
Что тебе привычки тела?
Что там койка и постель?..

— Но зачем тогда отделы,
И начальства корпус целый,
И другая канитель?

Тот взглянул на друга хмуро,
Головой повел:
— Нельзя.
— Почему?
— Номенклатура, —
И примолкнули друзья.

Теркин сбился, огорошен
Точно словом нехорошим.

x x x

Все же дальше тянет нить,
Развивая тему:
— Ну, хотя бы сократить
Данную Систему?
Поубавить бы чуток,
Без беды при этом…

— Ничего нельзя, дружок.
Пробовали. Где там!

Кадры наши, не забудь,
Хоть они лишь тени,
Кадры заняты отнюдь
Не в одной Системе.

Тут к вопросу подойти —
Шутка не простая:
Кто в Системе, кто в Сети —
Тоже Сеть густая.

Да помимо той Сети,
В целом необъятной,
Сколько в Органах — сочти!
— В Органах — понятно.
— Да по всяческим Столам
Список бесконечный,
В Комитете по делам
Перестройки Вечной…

Ну-ка, вдумайся, солдат,
Да прикинь, попробуй:
Чтоб убавить этот штат —
Нужен штат особый.

Невозможно упредить,
Где начет, где вычет.
Словом, чтобы сократить,
Нужно увеличить…

Теркин под локоть дружка
Тронул осторожно:
— А какая все тоска,
Просто невозможно.
Ни заботы, ни труда,
А тоска — нет мочи.
Ночь-то — да. А день куда?
— Тут ни дня, ни ночи.

Позабудь, само собой,
О зиме и лете.
— Так, похоже, мы с тобой
На другой планете?

— Нет, брат. Видишь ли, тот свет
Данный мир забвенный,
Расположен вне планет
И самой Вселенной.

Дислокации иной —
Ясно?
— Как не ясно:
То ли дело под луной
Даже полк запасный.
Там — хоть норма голодна
И гоняют лихо,
Но покамест есть война —
Виды есть на выход.

— Пообвыкнешь, новичок,
Будет все терпимо:
Как-никак — оклад, паек
И табак без дыма…

Теркин слышит, не поймет —
Вроде, значит, кормят?
— А паек загробный тот
По какой же норме?

— По особой. Поясню
Постановку эту:
Обозначено в меню,
А в натуре нету.

— Ах, вот так… — Глядит солдат,
Не в догадку словно.
— Ну, еще точней, оклад
И паек условный.

На тебя и на меня
Числятся в расходе.
— Вроде, значит, трудодня?
— В некотором роде…

Все по форме: распишись —
И порядок полный.
— Ну, брат, это же — не жизнь!
— Вон о чем ты вспомнил.
Жизнь! И слушать-то чудно:
Ведь в загробном мире
Жизни быть и не должно, —
Дважды два — четыре…

x x x

И на Теркина солдат
Как-то сбоку бросил взгляд.
Так-то близко, далеко ли
Новый видится квартал.
Кто же там во власть покоя
Перед вечностью предстал?

— Любопытствуешь?
— Еще бы.
Постигаю мир иной.
— Там отдел у нас Особый,
Так что — лучше стороной…

— Посмотреть бы тоже ценно.
— Да нельзя, поскольку он
Ни гражданским, ни военным
Здесь властям не подчинен.

— Что ж. Особый есть Особый.
И вздохнув, примолкли оба.

x x x

…Там — рядами по годам
Шли в строю незримом
Колыма и Магадан,
Воркута с Нарымом.

За черту из-за черты,
С разницею малой,
Область вечной мерзлоты
В вечность их списала.

Из-за проволоки той
Белой-поседелой —
С их особою статьей,
Приобщенной к делу…

Кто, за что, по воле чьей —
Разберись, наука.
Ни оркестров, ни речей,
Вот уж где — ни звука…

Память, как ты ни горька,
Будь зарубкой на века!

x x x

— Кто же все-таки за гробом
Управляет тем Особым?

— Тот, кто в этот комбинат
Нас послал с тобою.
С чьим ты именем, солдат,
Пал на поле боя.
Сам не помнишь? Так печать
Донесет до внуков,
Что ты должен был кричать,
Встав с гранатой. Ну-ка?

— Без печати нам с тобой
Знато-перезнато,
Что в бою — на то он бой —
Лишних слов не надо.

Что вступают там в права
И бывают кстати
Больше прочих те слова,
Что не для печати…

Так идут друзья рядком.
Вволю места думам
И под этим потолком,
Сводчатым, угрюмым.

Теркин вовсе помрачнел.
— Невдомек мне словно,
Что Особый ваш Отдел
За самим Верховным.

— Все за ним, само собой,
Выше нету власти.
— Да, но сам-то он живой?
— И живой. Отчасти.

Для живых родной отец,
И закон, и знамя,
Он и с нами, как мертвец, —
С ними он и с нами.

Устроитель всех судеб,
Тою же порою
Он в Кремле при жизни склеп
Сам себе устроил.

Невдомек еще тебе,
Что живыми правит,
Но давно уж сам себе
Памятники ставит…

Теркин шапкой вытер лоб —
Сильно топят все же, —
Но от слов таких озноб
Пробежал по коже.

И смекает голова,
Как ей быть в ответе,
Что слыхала те слова,
Хоть и на том свете.

Да и мы о том, былом,
Речь замнем покамест,
Чтоб не быть иным числом,
Задним, — смельчаками…

Слишком памятны черты
Власти той безмерной…

— Теркин, знаешь ли, что ты
Награжден посмертно?
Ты — сюда с передовой,
Орден следом за тобой.

К нам приписанный навеки,
Ты не знал наверняка,
Как о мертвом человеке
Здесь забота велика.

Доложился — и порядок,
Получай, задержки нет.

— Лучше все-таки награда
Без доставки на тот свет.

Лучше быть бы ей в запасе
Для иных желанных дней:
Я бы даже был согласен
И в Москву скатать за ней.

Так и быть уже. Да что там!
Сколько есть того пути
По снегам, пескам, болотам
С полной выкладкой пройти.

То ли дело мимоходом
Повстречаться с той Москвой,
Погулять с живым народом,
Да притом, что сам живой.

Ждать хоть год, хоть десять кряду,
Я б живой не счел за труд.
И пускай мне там награду
Вдвое меньшую дадут…

Или вовсе скажут: рано,
Не видать еще заслуг.
Я оспаривать не стану.
Я — такой. Ты знаешь, друг.

Я до почестей не жадный,
Хоть и чести не лишен…
— Ну, расчувствовался. Ладно.
Без тебя вопрос решен.
Как ни что, а все же лестно
Нацепить ее на грудь.

— Но сперва бы мне до места
Притулиться где-нибудь.

— Ах, какое нетерпенье,
Да пойми — велик заезд:
Там, на фронте, наступленье,
Здесь нехватка спальных мест.

Ты, однако, не печалься,
Я порядок наведу,
У загробного начальства
Я тут все же на виду.

Словом, где-нибудь приткнемся.
Что смеешься?
— Ничего.
На том свете без знакомства
Тоже, значит, не того?

Отмахнулся друг бывалый:
Мол, с бедой ведем борьбу.
— А еще тебе, пожалуй,
Поглядеть бы не мешало
В нашу стереотрубу.

— Это что же ты за диво
На утеху мне сыскал?
— Только — для загробактива,
По особым пропускам…

Нет, совсем не край передний,
Не в дыму разрывов бой, —
Целиком тот свет соседний
За стеклом перед тобой.

В четкой форме отраженья
На вопрос прямой ответ —
До какого разложенья
Докатился их тот свет.

Вот уж точно, как в музее —
Что к чему и что почем.
И такие, брат, мамзели,
То есть — просто нагишом…

Теркин слышит хладнокровно,
Даже глазом не повел.
— Да. Но тоже весь условный
Этот самый женский пол?..

И опять тревожным взглядом
Тот взглянул, шагая рядом.

x x x

— Что условный — это да,
Кто же спорит с этим,
Но позволь и мне тогда
Кое-что заметить.

Я подумал уж не раз,
Да смолчал, покаюсь:
Не условный ли меж нас
Ты мертвец покамест?

Посмотрю — ни дать ни взять,
Все тебе охота,
Как в живых, то пить, то спать,
То еще чего-то…
— Покурить! — И за кисет
Ухватился Теркин:
Не занес ли на тот свет
Чуточку махорки?

По карманным уголкам
Да из-за подкладки —
С хлебной крошкой пополам —
Выгреб все остатки.

Затянулся, как живой,
Той наземной, фронтовой,
Той надежной, неизменной,
Той одной в страде военной,
В час грозы и тишины —
Вроде старой злой жены,
Что иных тебе дороже —
Пусть красивей, пусть моложе
(Да от них и самый вред,
Как от легких сигарет).

Угощаются взаимно
Разным куревом дружки.
Оба — дымный
И бездымный
Проверяют табаки.

Теркин — строгий дегустатор,
Полной мерой раз и два
Потянул, вернул остаток
И рукой махнул:
— Трава.
На-ко нашего затяжку.
Друг закашлялся:
— Отвык.
Видно, вправду мертвым тяжко,
Что годится для живых…

— Нет, а я оттуда выбыл,
Но и здесь, в загробном сне, —
То, чего не съел, не выпил, —
Не дает покоя мне.

Не добрал, такая жалость,
Там стаканчик, там другой.
А закуски той осталось —
Ах ты, сколько — да какой!

За рекой Угрой в землянке —
Только сел, а тут «в ружье!» —
Не доел консервов банки,
Так и помню про нее.

У хозяйки белорусской
Не доел кулеш свиной.
Правда, прочие нагрузки,
Может быть, тому виной.

А вернее — сам повинен:
Нет — чтоб время не терять —
И того не споловинил,
Что до крошки мог прибрать.

Поддержать в пути здоровье,
Как тот путь бывал ни крут,
Зная доброе присловье:
На том свете не дадут…

Тут, встревожен не на шутку,
Друг прервал его:
— Минутку!..

x x x

Докатился некий гул,
Задрожали стены.
На том свете свет мигнул,
Залились сирены.

Прокатился долгий вой
Над глухим покоем…

Дали вскорости отбой.
— Что у вас такое?

— Так и быть — скажу тебе,
Но держи в секрете:
Это значит, что ЧП
Нынче на том свете.

По тревоге розыск свой
Подняла Проверка:
Есть опасность, что живой
Просочился сверху.

Чтобы дело упредить,
Срочное заданье:
Ну… изъять и поместить
В зале ожиданья.

Запереть двойным замком,
Подержать негласно,
Полноценным мертвяком
Чтобы вышел.
— Ясно.

— И по-дружески, любя,
Теркин, будь уверен —
Я дурного для тебя
Делать не намерен.

Но о том, что хочешь жить,
Дружба, знаешь, дружбой,
Я обязан доложить…
— Ясно….
— …куда нужно.

Чуть ли что — меня под суд.
С места же сегодня…
— Так. Боишься, что пошлют
Дальше преисподней?

— Все ты шутки шутишь, брат,
По своей ухватке.
Фронта нет, да есть штрафбат,
Органы в порядке.

Словом, горе мне с тобой, —
Ну какого черта
Бродишь тут, как чумовой,
Беспокоишь мертвых.

Нет — чтоб вечности служить
С нами в тесной смычке, —
Всем в живых охота жить.
— Дело, брат, в привычке.

— От привычек отвыкай,
Опыт расширяя,
У живых там, скажешь, — рай?
— Далеко до рая.— То-то!
— То-то, да не то ж.
— До чего упрямый.
Может, все-таки дойдешь
В зале в этой самой?

— Не хочу.
— Хотеть — забудь.
Да и толку мало:
Все равно обратный путь
Повторять сначала.

— До поры зато в строю —
Хоть на марше, хоть в бою.

Срок придет, и мне травою
Где-то в мире прорасти.
Но живому — про живое,
Друг бывалый, ты прости.

Если он не даром прожит,
Тыловой ли, фронтовой —
День мой вечности дороже,
Бесконечности любой.

А еще сознаться можно,
Потому спешу домой,
Чтоб задачей неотложной
Загорелся автор мой.

Пусть со слов моих подробно
Отразит он мир загробный,
Все по правде. А приврет —
Для наглядности подсобной —
Не беда. Наоборот.

С доброй выдумкою рядом
Правда в целости жива.
Пушки к бою едут задом, —
Это верные слова…

Так что, брат, с меня довольно
До пребудущих времен.
— Посмотрю — умен ты больно!
— А скажи, что не умен?

Прибедняться нет причины:
Власть Советская сама
С малых лет уму учила —
Где тут будешь без ума?

На ходу снимала пробу,
Как усвоил курс наук.
Не любила ждать особо,
Если понял что не вдруг.

Заложила впредь задатки
Дело видеть без очков,
В умных нынче нет нехватки,
Поищи-ка дураков.

— Что искать — у нас избыток
Дураков — хоть пруд пруди,
Да каких еще набитых —
Что в Системе, что в Сети…

— А куда же их, примерно,
При излишестве таком?
— С дураками планомерно
Мы работу здесь ведем.

Изучаем досконально
Их природу, нравы, быт,
Этим делом специальный
Главк у нас руководит.

Дуракам перетасовку
Учиняет на постах.
Посылает на низовку,
Выявляет на местах.

Тех туда, а тех туда-то —
Четкий график наперед.
— Ну, и как же результаты?
— Да ведь разный есть народ.

От иных запросишь чуру —
И в отставку не хотят.
Тех, как водится, в цензуру —
На повышенный оклад.

А уж с этой работенки
Дальше некуда спешить…
Все же — как решаешь, Теркин?
— Да как есть: решаю жить.

— Только лишняя тревога.
Видел, что за поезда
Неизменною дорогой
Направляются сюда?

Все сюда, а ты обратно,
Да смекни — на чем и как?
— Поезда сюда, понятно,
Но отсюда — порожняк?

— Ни билетов, ни посадки
Нет отсюда «на-гора».
— Тормозные есть площадки,
Есть подножки, буфера…

Или память отказала,
Позабыл в загробном сне,
Как в атаку нам, бывало,
Доводилось на броне?

— Трудно, Теркин, на границе,
Много легче путь сюда…
— Без труда, как говорится,
Даже рыбку из пруда…

А к живым из края мертвых —
На площадке тормозной —
Это что — езда с комфортом, —
Жаль, не можешь ты со мной
Бросить эту всю халтуру
И домой — в родную часть.

— Да, но там в номенклатуру
Мог бы я и не попасть.
Занимая в преисподней
На сегодня видный пост,
Там-то что я на сегодня?
Стаж и опыт — псу под хвост?..
Вместе без году неделя,
Врозь на вечные века…

И внезапно из тоннеля —
Вдруг — состав порожняка.

Вмиг от грохота и гула
Онемело все вокруг…
Ах, как поручни рвануло
Из живых солдатских рук;
Как хватало мертвой хваткой
Изо всех загробных сил!
Но с подножки на площадку
Теркин все-таки вступил.

Долей малой перевесил
Груз, тянувший за шинель.
И куда как бодр и весел,
Пролетает сквозь тоннель.

Комендант иного мира
За охраной суетной
Не заметил пассажира
На площадке тормозной.

Да ему и толку мало:
Порожняк и порожняк.
И прощальный генералу
Теркин ручкой сделал знак.

Дескать, что кому пригодней.
На себя ответ беру,
Рад весьма, что в преисподней
Не пришелся ко двору.

И как будто к нужной цели
Прямиком на белый свет,
Вверх и вверх пошли тоннели
В гору, в гору. Только — нет!

Чуть смежил глаза устало,
И не стало в тот же миг
Ни подножки, ни состава —
На своих опять двоих.

Вот что значит без билета,
Невеселые дела.
А дорога с того света
Далека еще была.

Поискал во тьме руками,
Чтоб на ощупь по стене…
И пошло все то кругами,
От чего кричат во сне…

Там в страде невыразимой,
В темноте — хоть глаз коли —
Всей войны крутые зимы
И жары ее прошли.

Там руин горячий щебень
Бомбы рушили на грудь,
И огни толклися в небе,
Заслоняя Млечный Путь.

Там валы, завалы, кручи
Громоздились поперек.
И песок сухой, сыпучий
Из-под ног бессильных тек.

И мороз по голой коже
Драл ножовкой ледяной.
А глоток воды дороже
Жизни, может, был самой.

И до робкого сознанья,
Что забрезжило в пути, —
То не Теркин был — дыханье
Одинокое в груди.

Боль была без утоленья
С темной тяжкою тоской.
Неисходное томленье,
Что звало принять покой…

Но вела, вела солдата
Сила жизни — наш ходатай
И заступник всех верней, —
Жизни бренной, небогатой
Золотым запасом дней.

Как там смерть ни билась круто,
Переменчива борьба,
Час настал из долгих суток,
И настала та минута —
Дотащился до столба.

До границы. Вот застава,
Поперек дороги жердь.
И дышать полегче стало,
И уже сама устала
И на шаг отстала Смерть.

Вот уж дома — только б ноги
Перекинуть через край.
Но не в силах без подмоги,
Пал солдат в конце дороги.
Точка, Теркин. Помирай.

А уж то-то неохота,
Никакого нет расчета,
Коль от смерти ты утек.
И всего-то нужен кто-то,
Кто бы капельку помог.

Так бывает и в обычной
Нашей сутолоке здесь:
Вот уж все, что мог ты лично,
Одолел, да вышел весь.

Даром все — легко ль смириться
Годы мук, надежд, труда…
Был бы бог, так помолиться.
А как нету — что тогда?

Что тогда — в тот час недобрый,
Испытанья горький час?
Человек, не чин загробный,
Человек, тебе подобный, —
Вот кто нужен, кто бы спас…

Смерть придвинулась украдкой,
Не проси — скупа, стара…

И за той минутой шаткой
Нам из сказки в быль пора.

В этот мир живых, где ныне
Нашу службу мы несем…

— Редкий случай в медицине, —
Слышит Теркин, как сквозь сон.

Проморгался в теплой хате,
Простыня — не белый снег,
И стоит над ним в халате
Не покойник — человек.

И хотя вздохнуть свободно
В полный вздох еще не мог,
Чует — жив! Тропой обходной
Из жары, из тьмы безводной
Душу с телом доволок.
Словно той живой, природной,
Дорогой воды холодной
Выпил целый котелок…

Поздравляют с Новым годом.
— Ах, так вот что — Новый год!
И своим обычным ходом
За стеной война идет.

Отдохнуть в тепле не шутка.
Дай-ка, думает, вздремну.

И дивится вслух наука:
— Ай да Теркин! Ну и ну!
Воротился с того света,
Прибыл вновь на белый свет.
Тут уж верная примета:
Жить ему еще сто лет!

x x x

— Точка?
— Вывернулся ловко
Из-под крышки гробовой
Теркин твой.
— Лиха концовка.
— Точка все же с запятой…

— Как же: Теркин на том свете!
— Озорство и произвол:
Из живых и сущих в нети
Автор вдруг его увел.
В мир загробный.

— А постольку
Сам собой встает вопрос:
Почему же не на стройку?
— Не в колхоз?
— И не в совхоз?
— Почему не в цех к мотору?
— Не к мартену?
— Не в забой?
— Даже, скажем, не в контору? —
Годен к должности любой.

— Молодца такой закваски —
В кабинеты — не расчет.
— Хоть в ансамбль грузинской пляски,
Так и там не подведет.

— Прозевал товарищ автор,
Не потрафил в первый ряд —
Двинуть парня в космонавты.
— В космонавты — староват.

— Впору был бы по отваге
И развитию ума.
— В космонавты?
— Нет, в завмаги!
— Ох, запутают.
— Тюрьма…

— Укрепить бы сеть Нарпита.
— Да не худо бы Жилстрой…
— А милиция забыта?
— А пожарник — не герой?..

Ах, читатель, в этом смысле
Одного ты не учел:
Всех тех мест не перечислить,
Где бы Теркин подошел.

Спор о том, чьим быть герою
При наличье стольких свойств,
Возникал еще порою
Меж родами наших войск.

Теркин — тем ли, этим боком —
В жизни воинской своей
Близок был в раскате дней
И с войны могучим богом,
И гремел по тем дорогам
С маршем танковых частей,
И везде имел друзей,
Оставаясь в смысле строгом
За царицею полей.

Потому в солдатском толке,
По достоинствам своим,
Признан был героем Теркин
Как бы общевойсковым…

И совсем не по закону
Был бы он приписан мной —
Вдруг — по ведомству какому
Или отрасли одной.

На него уже управа
Недействительна моя:
Где по нраву —
Там по праву
Выбирает он края.

И не важно, в самом деле,
На каком теперь посту —
В министерстве иль артели
Занимает высоту.
Там, где жизнь, ему привольно,
Там, где радость, он и рад,
Там, где боль, ему и больно,
Там, где битва, он — солдат.
Хоть иные батареи
И калибры встали в строй,
И всему иной покрой…
Автор — пусть его стареет,
Пусть не старится герой!

И такой сюжет для сказки
Я избрал не потому,
Чтобы только без подсказки
Сладить с делом самому.

Я в свою ходил атаку,
Мысль одна владела мной:
Слажу с этой, так со всякой
Сказкой слажу я иной.

И в надежде, что задача
Мне пришлася по плечу,
Я — с чего я книжку начал,
Тем ее и заключу.

Я просил тебя покорно
Прочитать ее сперва.
И теперь твои бесспорны,
А мои — ничто — права.

Не держи теперь в секрете
Ту ли, эту к делу речь.
Мы с тобой на этом свете:
Хлеб-соль ешь,
А правду режь.

Я тебе задачу задал,
Суд любой в расчет беря.
Пушки к бою едут задом —
Было сказано не зря.

Кем именно богат этот драфт. Краткий разбор по позициям – First & Goal

Когда речь идет о доступных для драфта-2020 футболистах, сразу возникает вопросы: какая позиция наиболее представлена, и, наоборот, игроки каких амплуа будут в дефиците. Ответы на эти вопросы, основанные на оценках проспектов специалистами, приведены ниже. Но сначала — несколько уточнений по моим критериям этой иерархии.

Оценивая каждое амплуа, я определял звезд, потенциальных игроков основы и резервистов для обеспечения глубины состава. И, в общем, я остановился на выпускниках, которые, скорее всего, будут выбраны с первого по пятый раунды.

Ресиверы

С 2005 года было всего четыре драфта, в которых было выбрано шесть ресиверов в первом раунде. В этом году ситуация может повториться, поскольку в профессионалы метит выдающееся поколение принимающих. Бывший скаут НФЛ и нынешний аналитик NFL Network Дэниэл Джеремайа сказал, что это самая сильная группа ресиверов, которую он когда-либо оценивал. Мы можем стать свидетелями выбора от 12 до 14 принимающих в первые семьдесят пиков. Ресиверов будут продолжать драфтовать и дальше, поскольку останется много доступных игроков уровня третьего или четвертого запасного в пятом раунде.

Тэклы нападения

Embed from Getty Images

Как и ресиверы, представители этого амплуа будут играть заметную роль в первый день драфта – в числе первых 32 выборов ожидаются, как минимум, четверо тэклов нападения. Джедрик Уиллс и Мекай Бектон – двое лучших на мой взгляд, но Эндрю Томас и Тристан Уирфс также являются талантами, способными мгновенно занять место в стартовом составе. Джош Джонс, Остин Джексон, Эзра Кливленд и Айзея Уилсон находятся в группе, которая может прийтись на драфт-пики с середины третьей десятки до сорокового. В целом, на этот драфт выходит больше (потенциальных) лайнменов основы, чем в последние несколько лет.

Тэклы защиты

Ди-тэклы были популярны в прошлом году – сразу шестеро были задрафтованы в первом раунде. В этот раз, Деррик Браун и Джавон Кинло – единственные, кто обладает звездным потенциалом. Тем не менее, во второй день останется приличное количество потенциальных игроков основы, а в третий день можно взять приличного защитника для глубины состава.

Лайнбекеры

Embed from Getty Images

Айзея Симмонс является самым ярким представителем этого амплуа, а Зак Баун, Патрик Куин и Кеннет Мюррей – потенциальные драфт-пики первого раунда, которые очень быстро могут заявить о себе в лиге. К счастью для команд, ищущих лайнбекеров, во второй волне в диапазоне выборов с 60 по 100, можно будет найти будущего игрока основного состава. А с четвертого по шестой раунды будет доступно небольшое количество бэкапов на эту позицию.

Раннинбеки

На прошлогоднем драфте среди раннинбеков можно было сразу выделить таланты – особенно в течение первых двух раундов (за первые два раунда было выбрано всего два бегущих – Прим.ред.) – но в этом году все должно быть иначе. Между командами мнения насчет топового проспекта может, конечно, разделиться, но Деандре Свифт видится наиболее вероятным «первораундником». Кроме того, есть пул потенциальных игроков основы, среди которых можно выделить Джей Кея Доббинса, Кэма Эйкерса и Джонатана Тeйлора. И еще хорошие новости! В средних раундах также будут интересные парни, умеющие играть разнообразно и непредсказуемо.

Корнербеки

Embed from Getty Images

Джефф Окуда – лучший корнер на будущем драфте, за ним идет Си Джей Хендерсон, а дальше – пропасть. У меня в списке проспектов всего шесть корнербеков, котируемых на выбор в первом или втором раунде. Обычно игроки этого амплуа из-за потребности команд в них выбираются выше остальных, так что следует ожидать переоцененных корнеров во втором и третьем раунде. Вместе с тем, в четвертом и пятом раундах может появиться что-то стоящее.

Крайние защитники

За исключением Чейза Янга, лучшим определением для группы крайних защитников является слово «нестабильный». Кейлевон Чейссон и Йитур Гросс-Матос показывают наиболее высокий потенциал после Янга. Хотя есть еще группа интересных, но нестабильных рашеров, имеющих все необходимые качества, но нуждающихся в дополнительной работе прежде, чем попасть в основной состав клуба НФЛ (например, Террел Льюис, Джош Уче, Джабари Зунига и Джулиан Оквара). Команды вряд ли смогут украсть что-нибудь ценное на третий день в этом году.

Квотербеки

Embed from Getty Images

На драфте есть четыре распасовщика, способных уйти в первом раунде, с Джо Бурроу в лице стопроцентного топ-выбора. У Туа Танговаилоа прекрасные физические данные, но вот способность противостоять травмам вызывает опасения. У Джастина Херберта и Джордана Лава есть необходимые качества и талант, но они будут выбраны ближе к концу первого раунда. За пределами первого раунда бросается в глаза Джейкоб Исон, но он нестабилен, в то время Джейлен Хертс и Джейк Фромм могут, в лучшем случае, рассматриваться менеджерами в качестве посредственных разыгрывающих. После них найти качественного бэкапа будет очень сложно.

Сейфти

Драфт-2011 был последним, когда первый раунд прошел без сейфти, но некоторые драфт-аналитики видят определенную возможность повторения ситуации в апреле. Эта позиция сразу выделяет звезд и игроков глубины. Взрывные, небольшие сейфти Джереми Чинн и Кайл Даггер вместе с Зейвьером Маккинни и Антуаном Уинфилдом-младшим упоминаются как наиболее вероятные для выбора в топ-50. Помимо топовых шести или семи сейфти, мы можем увидеть целую толпу средних выпускников уровня скамейки запасных.

Тайт-энды

Embed from Getty Images
Большинство из тех, с кем я разговаривал, называют Коула Кмета лучшим тайт-эндом. Правда, у каждого из них свой вариант остального состава лучшей пятерки на этой позиции, но мы, наверняка, увидим только троих в первых трех раундах. Группа тайт-эндов, выходящая на драфт, имеет недостаточную глубину, но средние игроки основного состава и хорошие резервисты будут доступны в четвертом и пятом раундах. Стоит отметить, что некоторые команды считают Чейза Клейпула из «Нотр-Дама» уникальным тайт-эндом, способным создавать мисматчи и готовым уйти раньше, чем все перечисленные здесь.

Линейные нападения

Поприветствуем наиболее слабую позицию драфта-2020. Данное амплуа может поддержать условный факт: видят ли команды таких тэклов, как Джош Джонс и Роберт Хант, в роли гардов, но факт остается фактом – центр и гарды – общая проблема этого класса. Сезар Руиз и Ллойд Кушенберри могут быстро стать игроками основы как потенциальные пики второго дня драфта. Но команды, ищущие гардов, могут подождать до третьего или четвертого раунда, прежде чем они начнут даже рассматривать возможность выбора.

Читайте также: Херберт выше Туа, хитрый вираж «Пэтс». Рынкевич составил мок-драфт

Имам Шамиль сдался или был взят в плен? Исторический разбор

Ожесточенные споры в соцсетях о роли и месте имама Шамиля в истории Чечни и Дагестана – явление не редкое. В очередной раз они имели место неделю назад, когда блогеры из двух республик поспорили на эту тему. Да и трудно найти более политизированную тему в последнее время, чем вопросы, связанные с Кавказской войной. Вопросов-то по теме могут быть тысячи, но чаще всего в дискуссиях дается оценка лидерам как горского сопротивления, так и российского военно-политического истеблишмента.

Но на подобные вопросы давным-давно уже ответили историки. Есть целый пласт из десятка тысяч документов в архивах, позволяющих узнать тонкости той или иной операции или подробности принятия решения историческими персонажами.

Сопротивление горцев Северного Кавказа российскому завоеванию в XVIII-XIX веках получило название «Кавказская война», хотя некоторые историки считают, что куда правильней придерживаться термина «Кавказские войны». Для России эта была война с общим врагом, горцами Кавказа, независимо от того, кто населял тот или иной регион. Но каждый из противостоявших России народов считал себя самостоятельным соперником империи.

Поэтому фигура имама Шамиля вызывает горячие споры. Сдался ли он сам или его захватили? Были ли переговоры или все решило коварство князя Ивана Барятинского? Пленение лидера горцев Северного Кавказа в корне изменило происходящее в то время: кто-то принял итоги войны, кто-то решил продолжить сопротивление, кто-то просто наблюдал за происходящим.

Имам Шамиль, начавший свою борьбу в качестве лидера Дагестана в 1834 году, сумел заручиться поддержкой чеченцев в 1840 году. Став главой Чечни и Дагестана, он образовал классическое исламское теократическое государство – имамат, которое просуществовало до лета 1859 года.

О завершении войны на Северо-Восточном Кавказе и пленении имама Шамиля чеченский историк Майрбек Вачагаев по просьбе редакции Кавказ.Реалии поговорил с дагестанским историком Патимат Тахнаевой, старшим научным сотрудником Института востоковедения при Российской академии наук. Ученая посвятила этому периоду монографию «Хаджи-Мурат. Хаджимурад из Хунзаха», «Гуниб, август 1859», а также ряд статей и работ, позволяющих день за днем проследить события, происходившие в канун окончания войны на горе Гуниб.

– Итак, имам Шамиль к лету 1859 года полностью потерял Чечню, что была захвачена войсками Российской империи. Он уходит в Дагестан, в Гуниб. Почему именно туда?

– В апреле 1859 года, когда столица имамата – Ведено – была штурмом взята русскими войсками, Шамиль отступил во Внутренний Дагестан, за Андийский хребет. И он не отступал в далекий Гуниб, ни в коем случае. Потеряв 1 апреля Ведено, а к концу мая и всю Чечню, имам не был намерен мириться с этим фактом.

С начала мая он активно укрепляется на новых позициях, дагестанских рубежах. Его не останавливало и то, что к 13 мая из девяти чеченских наибств имамата – Гехинское, Шалинское, Мичиковское, Ауховское, Ичкерийское, Чеберлоевское, Шубут, Нашхоевское и Шароевское – под его властью не осталось ни одного. Потому спешно возводилась новая линия обороны по правому берегу реки Андийское Койсу. Известно письмо андийского наиба Дибира об организации оборонных работ на границе с Чечней в горах Чеберлоя, датированное первыми числами мая 1859 г. Это было жесткое извещение наибам привести подвластное им работоспособное население в Чеберлой на строительство пограничных укреплений с лопатами и кирками. Имам писал: «Не оставляйте ни одного отделенным от этой группы, все равно – алима или кадия. И кто отделится – будет заключен в тюрьму на месяц». На месяц!

– На тот период, да и на протяжении всей Кавказской войны, в Чечне не было ни одной крепости, ни одного военного укрепления. То есть получается, что это первый приказ имама Шамиля построить именно военное укрепление на границе Чечни с Дагестаном.

– Да, как я уже говорила, к середине мая чеченские наибства перестали существовать как таковые, а отдельные селения обществ Шарой, Шикарой и Чеберлой, селений Зандак, Энгеной и Беной отправят своих делегатов к командованию в июне и июле. Из цитированного мною письма совершенно очевидно, что у имама не было намерений покинув Чечню, целенаправленно следовать на Гуниб. Более того, он был намерен стоять на границе, не пускать русских вовнутрь Дагестана со стороны Чечни.

Фотогалерея

Наибы имама Шамиля

Фотокопии картин любезно предоставлены «Кавказ.Реалии» Ставропольским государственным музеем-заповедником имени Г.Н. Прозрителева и Г.К. Праве

Видимо, построить укрепления в Чеберлое не удалось, и он укрепляется в Дагестане, за Андийским перевалом, в обществе Гумбет, на довольно неприступной горе Килилдерил-меэр, между селениями Ичичали и Килятль. Это такая копия горы Гуниб, только поменьше, но на ней не было воды.

Тем не менее, имам издавна возлагал на стратегические перспективы этой горы определенные надежды. Писарь Шамиля Абдурахман отмечал, что по приказу имама гора ранее дважды укреплялась вырытыми окопами, каменными стенами. Последний раз ее укреплением занимались в 1858-м. Таким же образом к концу июня были укреплены побережья Андийского и Аварского Койсу, перевал Буцрах. Помимо укрепления правобережья Андийского Койсу, на предполагаемом пути следования русских войск по Анди и Гумбету имам приказал сжечь аулы, как писал Абдурахман, чтоб «не осталось в них и деревянного кола». В 1845 году имам уже использовал довольно успешно в этих краях подобный метод – во время так называемого даргинского похода (военная операция по захвату русской армией крепости Дарго в Чечне) графа Михаила Воронцова. Имам Шамиль не был намерен пропускать противника вглубь Дагестана.

То есть мыслей об отступлении и, более того, сдаче в плен на тот момент у него не было.

– Итак, он все же отступает в Дагестан и пытается оказать сопротивление. Но на этот период, после Крымской войны, которая закончилась в 1856 г., некоторые воинские части империей были переброшены на Кавказ для подкрепления. Но какие силы были у имама Шамиля на тот момент?

– Здесь важно знать и понимать следующее. План предстоящей в 1859 г. летней наступательной операции в Дагестане был окончательно утвержден главным штабом армии 6 мая 1859 г. Согласно этому плану, наступление на Дагестан предполагалось вести одновременно тремя отрядами: главным Чеченским – из Ичкерии через Андийский перевал, Дагестанским и Лезгинским.

В общей сложности силы всех трех отрядов по данным главного штаба составляли 40 батальонов, 7 эскадронов драгун, 39 сотен милиции при 44 орудиях. По подсчетам генерала-майора Ростислава Фадеева, кстати, участника тех событий, численность войск, собранных для наступления в горы с трех сторон, не превышала 40 тысяч человек под ружьем из 160 тысяч, составлявших в эти месяцы Кавказскую армию. По подсчетам другого военного историка, полковника Дмитрия Романовского, численность войск трех отрядов к началу операции достигала до 30 тысяч человек.

– С севера продвигается отряд Дагестанский, Лезгинский продвигается с юго-востока, из Чечни с западной стороны продвигается Чеченский отряд. На востоке – Каспийское море, там уже отходить некуда. Речь идет о том, что практически эти три отряда должны были взять в кольцо последнее пристанище Шамиля.

– Разумеется. Территория имамата была не очень большой. Поэтому 30 тысяч человек или 40 тысяч – тот случай, когда количество уже не имело значения. Надо иметь в виду, что к тому времени, когда имам вышел из Чечни, рядом с ним находилась всего горстка вооруженных людей, умеющих воевать. И их число не достигало даже ста человек.

Но я не люблю, когда начинают оперировать этими огромными цифрами как гарантом безусловной победы Барятинского. Тут сыграли свою важную роль определённые факторы, о которых не любили вспоминать местные дагестанские авторы, начиная с Карахи, Абдурахмана, Гаджи-Али (дагестанские летописцы, современники имама Шамиля, оставившие письменные источники о тех годах. – Прим. ред.). О них почему-то не упоминали позже и советские историки, не упоминают и современные.

Имама в горах просто уже не поддерживали. Надо понимать, что к тому времени имамат, начиная с 1851–1852 годов, переживал внутренний кризис: кризис власти, усугубленный тяжелейшим экономическим положением. С середины 1850-х годов от имама стали отходить лица из его ближайшего окружения. В частности, в 1856 году был уличен в измене, тайных отношениях с русскими, Кебедмухаммад Телетлинский, один из известных соратников имама, алим, правовед, воин. В свое время он начинал наибом Телетля, к 1850-м годам являлся мудиром (своего рода «губернатор» региона объединенных из различных наибств. – Прим. ред.) четырех дагестанских наибств, был очень близок к имаму. Последний даже обещал выдать обеих своих дочерей за сыновей Кебедмухаммада, но слова не сдержал. Шамиль считал, что Кебедмухаммад пользуется в Дагестане таким же влиянием, как и он сам. Смертная казнь за измену в порядке исключения была заменена ему ссылкой в Дарго, под личное наблюдение имама.

Патимат Тахнаева, старший научный сотрудник Института востоковедения РАН

Не могу не процитировать здесь фрагмент из письма князя Моисея Аргутинского, который благодаря лазутчикам был всегда хорошо информирован о том, что происходило в горах. В марте 1851 года он со ссылкой на «достоверные сведения» с удивлением и удовлетворением писал, что впервые состоялось собрание наибов, на котором обсуждались не военные задачи, а вопросы «о бедственном положении горцев». Цитирую: «Наибы и почетные лица представляли Шамилю трудное положение их подчиненных и указывали на постоянные потери, претерпеваемые ими в течение круглого года, то в делах против Чеченского и Дагестанского отрядов, то на Сунженской линии, не имея ни времени для обрабатывания полей, ни для призрения вообще своих семейств, и что проистекающее от того расстроенного положения их домашнего быта, по необходимости лишает их возможности сражаться за веру свою с таким же самоотвержением, как бы того требовать можно». Но имам, со слов лазутчиков, об этом и слышать не хотел. Цитирую: «В ответ на это Шамиль будто бы говорил, что за малодушие скопищ они впредь отвечать будут головою, начиная с наибов».

Летописец Мухаммад Тахир ал-Карахи писал, что последние два года в имамате «из-за сильной засухи и падежа скота усилился голод», «слабость ополченцев еще больше увеличилась» из-за трудных работ на оборонительных сооружениях, с «мучительными стараниями» возводимых в разных местах. Но не эти испытания, по мнению хрониста, стали в итоге разрушительными для имамата, а повсеместный произвол наибов. Все это верно. Как и то, что не желали или не хотели увидеть главного, трагического предельного истощения всех ресурсов имамата, давно назревшего кризиса власти. Практически все местные авторы-современники, произведения местного фольклора были склонны усматривать за падением имамата исключительно всеобщее предательство, измену, продажность – как наибов, так и всех горцев имамата.

– В качестве подтверждения тезиса, что был кризис и что некоторые из видных людей из окружения имама Шамиля искали пути переговоров с русским командованием, ты наверняка помнишь описанный в прессе тех лет случай, когда имам запретил чеченцам присылать кого-либо с просьбой разрешить им вести переговоры относительно перехода под юрисдикцию Российской империи.

Историк Майрбек Вачагаев

Зная, что кто-то должен к нему подойти из чеченской делегации, Шамиль заранее объявил, что любой, кто придет к нему, будет наказан 100 ударами плетью. И, соответственно, чтобы избежать этого, чеченская делегация решила, что свою мать он точно не накажет: они якобы уговорили мать поговорить с имамом Шамилем. И в Ведено состоялось это судилище над матерью, но вместо 100 ударов дал 7, а все остальное принял на себя. Это, конечно, не подтвержденный исторический факт, а миф об имаме и его нравах тех лет.

– Во-первых, это бродячий сюжет, нелепый, выдуманный от начала до конца. И у него много вариаций. Он не прошел даже мимо внимания известного дагестанского поэта Расула Гамзатова. В его популярнейшем «Моем Дагестане» действие происходит в Гимры. Там вообще адская смесь. Он передает этот сюжет в рассказе «Песня матери Шамиля». Имам, после сражения на горе Ахульго весь израненный, возвращается в Гимры. К тому времени существовал запрет имама на исполнение песен. Но только имам въехал в селение, как услышал песню-плач по погибшим. Имам, уточнив, что в песне 142 строки, велел найти автора и всыпать ему такое же количество ударов кнутом. К нему привели автора и исполнителя песни. И это оказалась его мать. Дальше Гамзатов пишет, что имам скинул с себя черкеску, сказал, что «мать бить нельзя», – я цитирую слово в слово – и принял экзекуцию. Причем один раз даже прервал ее, ударил кнутом мюрида, который недостаточно сильно наносил удары. Показал, как надо.

Тот вариант сюжета, о котором ты говоришь, когда чеченцы якобы обратились к матери Шамиля с просьбой о примирении с русскими, очень красочно и зловеще описан у грузинского писателя-эмигранта первой волны Григола Робакидзе в новелле «Имам Шамиль». Она была написана в 1932 г. Там шла речь о ста ударах. 95 имам принял на себя, а пять оставил матери. Дальше дело пошло веселее – Робакидзе пишет, что по завершении экзекуции, на радостях, что все обошлось без отрубания голов, «полетели чистые мелодии и ритмы Кавказа», а потом начались танцы.

Фотогалерея

Кавказская война в российской живописи

– Да, но это показывает именно состояние имамата того периода. То есть люди искали пути, чтобы попытаться договориться с имамом о выходе из состава имамата.

– Чечня больше всех выстрадала и вынесла последнее десятилетие имамата. С начала 1850-х годов, по мнению князя Аргутинского, напомню, хорошо информированного многочисленными лазутчиками, в имамате царила гнетущая атмосфера, вызванная как длительностью войны, так и цепью военных неудач последних лет, сопряженная с большими людскими потерями, общим упадком хозяйств горцев Чечни и Дагестана.

К концу 1850-го – началу 1851 года в имамате в наиболее тяжелом положении оказались чеченцы. Здесь возобновилось наступление русских войск на Большую Чечню, которые методично рубили просеки, продвигаясь в ее плоскостную часть. Годом ранее, в марте 1851 года, в одном из писем князь Аргутинский писал о сложившейся ситуации в Чечне. Со ссылкой на своих лазутчиков он утверждал, что имам «к чеченцам уже доверия не имеет, и они, как говорят, не скрывают, что потеряли к нему доверие».

Неслучайно в течение 1851 года имам Шамиль дважды приводил чеченцев и дагестанцев к «присяге на верность», последний раз в ноябре 1851 года в Чечне, в Автурах. Здесь на собрании дагестанских и чеченских наибов Шамиль обязал всех присягать на Коране в том, что «не будут выходить к русским с покорностью». Кстати, на это собрание был приглашен и опальный наиб Хаджи-Мурат, но по ряду обстоятельств не дошел до Автуров.

Еще в марте того же года, по сообщениям лазутчиков, в поисках решения, вызванного безысходностью, чеченцы были готовы бросаться из одной крайности в другую – они собирались либо «выйти» к русским, либо обратиться за помощью к турецкому султану. Я процитирую этот любопытный и «говорящий» документ: «Чеченцы, опасаясь потерять последние пахотные земли в Чечне и уже не надеясь на защиту Шамиля, хотят выселиться к нам или, как рассказывают другие, хотят просить через султана турецкого соизволения государя императора на свободный пропуск их в Турцию, для приобретения там оседлости».

В 1851–1853 гг. на Большую Чечню обрушатся ряд Ччеченских экспедиций, которые заключались в рубке просек, прокладывании дорог, уничтожении аулов, хуторов, угоне скота. Шло методичное и тотальное уничтожение аулов Большой и Малой Чечни. Имам, в свою очередь, не допускал мыслей о каких-либо мирных переговорах с русскими. Но, возвращаясь к тому бродячему сюжету с поркой имама, напомню, что в 1856 году о мире с русскими с ним вел разговоры его сын Джамалуддин, отданный в 1839 году аманатом, то есть заложником, русским. Отец и не думал его казнить, но прервал их, мотивировав свое решение тем, что если султан заключил мир с русскими в Крымской войне, то он пойдет на мир. Но только в том случае, если это ему предложит сделать сам султан. Как с досадой передавал слова отца Джамалуддин, «ибо турецкий султан есть глава магометан, и желание его есть свято для каждого бусурманина».

Выйти из пределов имамата, бежать – всегда было тяжелым испытанием, оно приравнивалось к измене и несло за собой тяжелые кары, которые в первую очередь обрушивались на родственников изменника. В имамате семья бежавшего, т.е. вероотступника («муртада»), мгновенно оказывалась вне правового поля и, соответственно, лишалась какой-либо защиты. Таким образом, у объявленных вне закона мусульман заключенные ими браки считались недействительными, поскольку «утрачивали законную силу в случае вероотступничества».

Тем не менее, князь Воронцов всячески демонстрировал, что на территории «мирной» Чечни беглецов ждут буквально с распростертыми объятиями. Он, к примеру, писал, что «следовал всегда сис­теме покровительства всякому, желающему выселиться к нам», «нужно при­нять соответствующие меры, чтобы всякий желающий передаться нам был принят: это всегда ослабляет непри­ятеля, и это, наконец, согласно с тем, что я всегда гово­рил и обещал». Воронцов прекрасно понимал, что – цитирую – «не принимая отдельных лиц, а требуя общей покорности, мы требуем невозможного». Он понимал, что это действенное решение, и настаивал на «принятии индивидуальной покорности отдельных семейств в Большой Чечне и в нагорной части Малой Чечни», так как «ожидать теперь же покорения массами почти невозможно …совершая это мало-помалу, в результате может оправдаться сравнение с «комом снега»…». Надо понимать, что означали эти слова для чеченцев, когда перед ними остро стоял вопрос о выживании. Не в бою, а от голода и холода.

– Был выбор, вынужденный выбор, когда люди целыми округами в общем-то оставались без права пропитания. Отмечу, что в те времена Чечня являлась житницей не только горного Дагестана, но и всей равнинной части Северо-Восточного Кавказа. То есть это были земли, которые давали пропитание не только чеченцам, но и населению, которое было вокруг Чечни. Это был такой момент, который позволял российской армии очень сильно надавить…

– Манипулировать.

– Да-да.

– После того, как потеряли Ведено, Чечню, и имам отступил в Дагестан, многие стали, конечно, задаваться вопросом – что дальше? Укрепившись в Гумбете, на горе Килирдерил меэр у селения Килатль, имам ожидал, что к нему придет много людей. Как в 1839 году, на Ахульго. Но ожидания имама не оправдалась. Не пришли из самых воинственных обществ Анди и Гумбет. Но это неудивительно, если помнить, что с января по апрель 1859 года, вплоть до падения Ведено, андийские и гумбетовские отряды находились на передовых позициях по пути продвижения русских войск, где несли самые большие потери. В частности, в последнем сражении за Ведено, 1 апреля, андийцы в течение 12 часов удерживали свои позиции на передовом т. н. «Андийском редуте». По русским источникам, на него в течение нескольких часов «было сброшено более 1000 ядер гранат и бомб». Местные авторы, которые укоряли горцев в том, что не явились в Ичичали к имаму, не вспоминают также о том, что новая линия обороны по Андийскому Койсу уже к концу весны 1859 года была прочно укреплена и занята отрядами андийцев и гумбетовцев. Их задача – остановить Чеченский и Дагестанский отряды почти с первого их шага в горы.

Но всего этого не случилось. 14 июля 1859 года Чеченский отряд генерала Евдокимова вместе с главнокомандующим князем Барятинским выступил из Ведено и 22-го вышел на Андийские высоты. Но дальше основную роль сыграл Дагестанский отряд, который шел из Гумбета. 18 июля им неожиданно легко удалось взять стратегический мост Сагри на Аварском Койсу и выйти на его правый берег. Путь в Аварию, во внутренний Дагестан, был открыт. В течение одного-двух дней все общества между Аварским и Андийским Койсу принесли свою присягу на покорность русским. Лезгинский отряд Меликова, действовавший в верхнем Дагестане, в верховьях Аварского Койсу, принял покорность всех обществ чуть позже, к концу июля. После 21 июля началось беспрепятственное движение войск вглубь Дагестана. Горцы не хотели воевать. За этим надо усматривать не трусость и предательство, а логическое следствие колоссального кризиса, в котором пребывал имамат с 1851 года.

– То есть мы наблюдаем просто разочарование населением имамата…

– Это кризис.

– Да, это кризис, который привел к тому, что люди разуверились в имаме и в его политике.

Обратимся теперь к Александру II. Он недавно стал императором. Для него, конечно, после Крымской войны (1853–1856) было бы очень желательно иметь хорошую красивую победу. И на этом фоне, на фоне того, что происходило в последние месяцы существования имамата, Александр II один за другим посылает письма, приказы Барятинскому, который был наделен неимоверными полномочиями на месте…

– И силами.

– Да. То есть такого не было у предыдущих, начиная с Ермолова, который считался проконсулом. Все-таки Барятинский на его фоне, конечно, очень сильно выделялся, в том числе и отношением императора.

– Мне показалось, что Александр II был настроен крайне миролюбиво и спешил закончить «войну на Кавказе», точнее, в апреле 1859 года – войну в Дагестане. Даже после 1 апреля 1859 года, когда была взята столица имамата Ведено, император пишет Барятинскому, что, может быть, попытаться закончить эту войну дипломатическим путем, вступить с Шамилем в переговоры, предложить, чтобы он сложил оружие и уехал за пределы Кавказа, обещая достойное содержание. Оно было написано 20 апреля.

Еще раз повторю: 1 апреля взята столица имамата, а 20 апреля император пишет Барятинскому: может быть, имеет смысл начать секретные переговоры с Шамилем, чтобы выяснить, расположен ли он к полному подчинению, обещая ему прощение за все прошлые преступления и гарантируя ему независимое обеспеченное существование, но, естественно, вдали от Кавказа.

Барятинский настаивал на своем, то есть не на дипломатическом решении, а на военном. Он отвечал, что нужно сломить силой оружия сопротивление; не подкупом, а невозможностью дальнейшей борьбы «заставить изъявить покорность и сдаться на волю победителя». Вот такие две противоположные точки зрения на завершение Кавказской войны.

А 10 августа, напомню, что к тому времени имам Шамиль уже на Гунибе и он окружен, Барятинский получил еще одно императорское письмо. К тому времени, уже информированный о триумфальном шествии войск по Аварии, император не скрывал, что потерял интерес к мирным переговорам с имамом, и писал, что мирные переговоры теряют свою значимость в свете последних событий. Логично. К тому времени стало более чем очевидно, что вопрос окончания войны в Дагестане – это вопрос нескольких дней или пары месяцев. Противник был надежно «закрыт» на горе.

Но не будем демонизировать князя Барятинского: 10 августа он получает письмо императора, а 19 августа открывает переговоры с имамом Шамилем. Он понимал, что имам обречен, но хотел избежать лишнего кровопролития.

Окрестности села Гуниб в Дагестане

– На что тогда рассчитывает Шамиль, видя, что где-то стоит не просто отряд, а практически армия?

– Вокруг Гуниба собрались 16 тысяч военных. Имам Шамиль с горы прекрасно видел, обозревал, какие силы подступили. Надеяться на то, что им достаточно продержаться на осажденной горе пару месяцев до осени или даже зимы, а русские войска не продержатся, отступят, – было конечно немного наивно.

– Поражение в битве при Ахульго в 1839 году, с которым каждый раз сравнивается Гуниб в 1859 году, – тогда ведь Россия, продвигаясь вперед, в горы, возводила военные укрепления, создавала для себя базы.

– Да, если сравнивать положение Кавказской армии в 39-м году и в 59-м – это две разные армии, опыт, командование.

Переговоры с имамом Шамилем, открытые по инициативе Барятинского, проходили с 19 по 22 августа.

19 августа сын имама Газимухаммад выехал из Гуниба на переговоры с представителями Барятинского – полковником Иваном Лазаревым и Даниял-султаном. Газимухаммада сопровождали люди из ближайшего окружения имама – Гаджи-Али, Абдурахмана, Инквачил Дибира; все трое позже оставят воспоминания об этих событиях.

Абдурахман писал, что имам пойдет на перемирие с русскими, если они отпустят его в Мекку, буквально – «освободят дорогу» в Мекку, вместе с семьей и некоторыми мюридами. В противном случае между ними ничего нет, «кроме войны». Таким образом, на переговорах о мире, точнее, «сложении оружия», как того требовал главнокомандующий, имам не говорил о заключении мира – речь шла только о «перемирии», т.е. временном прекращении военных действий по соглашению сторон. Важно понимать, чем «перемирие» отличается от «мира». Перемирие оставляет в силе притязания, послужившие поводом к войне, – спор не окончен, война может повториться, во время перемирия военное положение сохраняется. Имам Шамиль говорил только о перемирии.

– Он рассчитывал после Мекки вернуться?

– Во всяком случае, он обещал покинуть пределы Российской империи, уйти в султанат. Чего и добивался император с самого начала, причем за большие деньги. Барятинский, выслушав 19 августа условия перемирия, выдвинутые имамом, на следующий день отправил на Гуниб письмо, в котором изложил все требования имама Шамиля как удовлетворительные взамен на «сложение оружия». Абдурахман подтверждал, что на следующий день, после переговоров 19 августа, от князя Барятинского было получено письмо с текстом на арабском и русском языках. За сложение оружия главнокомандующий «именем государя» предлагал: 1) «имаму и всем находившимся на Гунибе полное прощение»; 2) «дозволение самому Шамилю с семейством ехать в Мекку»; 3) полное обеспечение «путевых издержек и доставление его на место»; 4) обещание «определить размер денежного содержания ему с семейством». Имам с сыновьями должен был явиться в ставку главнокомандующего и скрепить это соглашение подписями.

Важно обратить внимание на первый пункт – Барятинский прежде всего предлагал имаму «прощение императора». О заключении какого-либо мира нет ни слова. Предложить заключение мира человеку, не являющемуся политической фигурой и главой легитимного государства (а имамат таковым не являлся), главнокомандующий не мог. Напомню, еще недавно от тех событий, в апреле 1859 г., император, заинтересованный в скорейшем завершении войны, так же писал о своем намерении даровать имаму «прощение за все прошлые преступления» с условием его «полного подчинения», обещая взамен «независимое обеспеченное существование, но, естественно, вдали от Кавказа». Основное требование: прежде чем «получить полное прощение» и «дозволение с семейством ехать в Мекку», имам и его сыновья должны были «дать письменное обязательство жить там безвыездно». И это соглашение необходимо было письменно скрепить в его ставке на Кегерских высотах.

Имам отказался ехать в ставку главнокомандующего. По сути, он отказался от этого предложения. Почему? У нас есть хорошие источники, которые позволяют отвечать на этот вопрос. 21 августа к главнокомандующему прибыли послы имама Юнус Чиркеевский и Инквачилав Дибир. Гаджи-Али писал, что послы должны были на словах передать от Шамиля Барятинскому, что он согласится с изложенным в его письме, если даст ему, имаму, еще один месяц для пребывания на Гунибе. На это Барятинский пойти не мог, но предпринял ещё одну попытку закончить «дело под Гунибом» без кровопролития.

Запоминаем цифры: 21 августа рано утром послы имама вернулись на Гуниб из ставки главнокомандующего. Но ответа в тот день Барятинский не дождался. 22 августа было написано ещё одно письмо на Гуниб от имени начальника штаба армии князя Милютина, в котором требовали немедленного ответа. Письмо было написано на арабском и вопрошало об одном – хотите мира, как-то было указано в письме главнокомандующего от 20-го числа? Вопрос был поставлен в ультимативной форме – если на него не будет положительного ответа, быть сражению. В тот же день имам прислал в ставку Барятинского официальный отказ от заключения мирного соглашения.

Портрет князя И. Барятинского работы С.Ф. Александровского

– Это уже второй официальный отказ.

– Ответ имама был написан на обороте письма, отправленного к нему утром. Абдурахман передавал содержание этого письма, он его писал под диктовку имама: «Если вы отпустите меня с семьей, детьми и с некоторыми из моих асхабов в хадж, то между нами – мир и согласие, в противном случае – меч обнажен и рука тверда».

Дмитрий Милютин, начальник штаба, подтверждал, что сверх всякого ожидания был получен чрезвычайно дерзкий ответ, цитирую: «Мы не просим у вас мира и никогда с вами не помиримся; мы просили только свободного пропуска на заявленных нами условиях».

Перемирие, на которое имам рассчитывал, – то есть прекращение огня и свободный выход с осажденной горы – не состоялось. А мира с русскими имам не искал. В тот же день Барятинский отправил военному министру генерал-адъютанту Николай Сухозанету отношение, в котором сообщал о результатах переговоров: «После 4-дневных бесплодных переговоров я приказал прекратить их и приступить к предварительным работам для овладения Гунибом».

То есть 22 августа с Гуниба был получен отрицательный ответ от имама на предложенные условия «сложения оружия». 23 августа в ставке Барятинского было принято решение о штурме Гуниба. 24 августа войска приготовились к штурму, и следующим утром, с рассветом, 25 августа войска поднялись на гору Гуниб. А к 9 утра окружили селение Гуниб, в котором закрылись его последние защитники. Вот вся история первого этапа переговоров. Когда после полудня на Гуниб поднялся сам главнокомандующий, приступили к очередному этапу переговоров. Вот теперь начинаются те события, которые позволяют говорить о «пленении» имама. К осаждённым в селении был отправлен парламентёр от имени Барятинского, чтобы имам немедленно сдался, иначе аул будет подвергнут атаке. Слово «сдался» что вообще предполагает? Сдался в плен, наверное?

– Сдался на милость победителю?

– Нет, я всё-таки настаиваю на слове «плен», «пленение», потому что оно отражает военную составляющую, а не дипломатическую. Дипломатические формулировки после 22 августа были неуместны.

Фотогалерея

Русско-кавказская война в рисунках Теодора Горшельта

– Можно ли говорить о дипломатических терминах, когда Россия не воспринимала его как лидера имамата, лидера государства? Для России всё-таки имам Шамиль не был правителем.

– Очень хорошая поправка. Имам Шамиль не являлся представителем, руководителем легитимного государства. Ни в глазах так называемого «мирового сообщества», а уж тем более Российского государства. Он был «преступник», «бунтовщик», «смутьян». Другого определения статуса имама Шамиля в официальных документах тех лет вы не встретите.

Согласно Уложению о наказаниях уголовных и исправительных, кодифицированному нормативному акту, утверждённому еще в 1845 году, имам Шамиль мог быть осужден по ст. 283 и ст. 284 (раздел IV «О преступлениях и проступках против порядка управления, глава I «О сопротивлении распоряжениям правительства и неповиновении установленным от оного властям»).

Цитирую ст. 284: «За явное против властей, правительством установленных, восстание… когда такое принуждение или противодействие будет произведено вооруженными чем-либо людьми и сопровождаемо с их стороны насилием и беспорядками, виновные приговариваются: к лишению всех прав состояния и к ссылке в каторжную работу в рудниках на время от пятнадцати до двадцати лет, а буде они по закону не изъяты от наказаний телесных, и к наказанию плетьми, чрез палачей… с наложением клейма». Совершенно очевидно, что имама ожидали ссылка на каторжную работу в рудники от 15 до 20 лет с наложением клейма (от наложения клейм освобождались женщины и лица, достигшие 70 лет).

Об освобождении от суда и наказания – именно это имел в виду император Александр II, когда писал о своем обещании высочайшего прощения – пользуясь правом монарха прощать преступника. В Своде законов Российской империи было закреплено абсолютное право монарха на помилование и прощение общим милостивым манифестом, но при этом подчеркивалось, что помилование не является законом, а является «изъятием из законов», т.е. исключением.

После того, когда закончились дипломатические формы решения, и после короткого сражения, когда имам был окружен в маленьком неукрепленном селении с горсткой защитников, от него требуют выйти, сдаться в плен. У вас есть другие варианты? Я лично не представляю, чтобы князю Барятинскому и офицерам могла прийти какая-то другая мысль. Здесь начинается самое главное, которое сегодня стало…

– …жаркой дискуссией.

– Да, и я была тем немало удивлена. Что происходит за эти несколько часов? Имам Шамиль категорически отказывается выходить из аула, он о сдаче в плен и слышать не хочет.

Он клялся на Коране, когда был готов встретить противника в Гумбете, укрепившись на Килилдерил-меэре, что погибнет с оружием в руках, в бою. Об этом хорошо пишет сподвижник имама Абдурахман.

На Гунибе повторяется то же самое. И лично у меня даже сомнений нет в том, что могло быть как-то иначе. Но должна сказать, что осаждённые очень боялись плена. Они еще по Ахульго помнили, какая участь ожидала плененных тогда. Горцы помнили о тяжелой участи, постигшей женщин в далеком 1839 году: до 500 из них, зачисленные в казачье сословие, были обращены в христианскую веру и выданы за казаков замуж. Возможно, последний аргумент сыграл свою роль. Имама уговорили пойти на переговоры с главнокомандующим с надеждой, что удастся возобновить прежние договоренности? Шамиль отправляет своего самого доверенного человека Юнуса Чиркейского к князю Барятинскому. Как писал Милютин, «для переговоров об условиях».

О том, что ему ответил Барятинский, писали участники событий из его ближайшего окружения. По Милютину: «Ни о каких условиях не может быть и речи, что Шамиль немедленно должен выйти к главнокомандующему, предоставив его великодушию участь свою и семьи». По Волконскому: «Условий никаких. Безусловная сдача. И если не поторопится – войскам будет приказано взять аул». По Зиссерману: «Предлагаю ему лишь одно условие: его собственная и всего семейства личная безопасность».

Но, поскольку я понимаю своих специфических оппонентов, которые в корне не доверяют русским источникам, вернемся от главнокомандующего назад, в аул Гуниб, вместе с Юнусом Чиркейским. И что он передает имаму Шамилю? По Абдурахману (напомню, зятю имама и сыну шейха Джамалуддина), вернувшись от «сардара» к имаму, Юнус «принес известие о том, что русские хотят, чтобы имам прибыл к главнокомандующему для устных переговоров с ним и чтобы он сообщил ему о своем положении и пожеланиях и, в свою очередь, узнал о положении дел у русских».

Согласитесь, ответ, который он принес, выглядел по меньшей мере странно: имама просят, чтобы он вышел из окруженного аула к главнокомандующему для того, чтобы «сообщить ему о своем положении»? И, далее, совершенно уже непонятное, «узнал о положении дел у русских»? По русским источникам, решение имама выйти из селения к главнокомандующему было принято через час после того, как Юнус встретился с «сардаром» и вернулся к имаму.

По Мухамад-Тахиру ал-Карахи, имам Шамиль согласился выйти на переговоры из осажденного аула «только при условии, что он и его товарищи пойдут к генералу вооруженные и что генерал даст ему и тем, кто захочет идти с ним, свободно уйти в Мекку». Далее по тексту: «Они так же условились между собою, что если русские будут отделять товарищей от Шамиля или же попытаются взять у них оружие, то они начнут сражаться и дерзнуть напасть на русских, ища смерти в битве». Как известно, идущие с намерением «сдаваться в плен» не сопротивляются при разоружении.

Несомненно, если бы Юнус передал имаму слова наместника без искажений (не знаю, намеренно или «так вышло») о том, что его ждет плен, а не продолжение прерванных три дня назад переговоров, – уверена, имам не вышел бы из селения. Напомню, что главнокомандующего сопровождали пять переводчиков с арабского, Юнус хорошо знал арабский язык (он учился вместе с имамом). Я не думаю, что здесь произошла какая-то ошибка, ну хорошо, пусть будет ошибка. Но имама действительно ввели в заблуждение. В результате произошло пленение, по определению «ограничение свободы лица, принимавшего участие в военных (боевых) действиях».

Если бы Юнус сказал имаму, что его ждет плен, я абсолютно уверена – имам Шамиль шага не сделал бы из Гуниба. Он поклялся в том на Коране.

Разговор был коротким. Барятинский сообщил ему, что он военнопленный.

– Давай уточним, Патимат. Он вышел на переговоры?

– Да, он вышел на переговоры. И когда имам подошел к главнокомандующему, тот встретил его словами: «Шамиль, ты не принял условий, которые я тебе предлагал, и не захотел приехать ко мне в лагерь, теперь я приехал за тобой. Ты сам захотел предоставить войне решить дело. И она решила его в нашу пользу. Теперь о тех условиях уже и речи нет. Ты должен ехать в Петербург и там ожидать решения своей участи от милосердия государя. За одно тебе ручаюсь – это за личную безопасность твою и твоего семейства».

– Тогда вопрос возникает. Шамиль вышел с оружием, так почему же он не предпринял шаги сделать этот газават, который он обещал? Были ли попытки оказать сопротивление?

– Он обещал газават в бою. Здесь он шел на переговоры. Тем не менее, когда он вдруг оказался в этой критической ситуации, с ним рядом не было тех сподвижников, которые вооруженные вышли его сопровождать на этот случай. Их небольшой отряд отсекли от имама драгунами. Так получилось, что к Барятинскому были допущены трое: имам Шамиль, Юнус Чиркеевский и наиб Инкав. Таким образом, перед Барятинским стоял не отряд из 20–30 кинжалов, а три человека. И имам Шамиль, когда услышал, что он военнопленный, опешил. Вот давайте сейчас просто отстраним всех авторов мемуаров, которые описывали те минуты. Мне очень интересно воспоминание Теодора Горшельта, художника, который там присутствовал.

– Тот, который написал один из лучших портретов?

– Да, лучший портрет имама – его кисти. По воспоминаниям очевидцев, имам Шамиль отказывался верить в то, что оказался в плену, напоминал о цели своего визита, говорил о Турции и об обещании его туда отпустить. Но слышал в ответ: «Я тебя звал к себе … и предлагал тебе условия. Ты не поверил, теперь я пришел к тебе, и условий быть не может». Горшельт писал, цитирую: «Он все никак не мог привыкнуть к мысли, что он пленник безусловно, и хотел говорить об условиях, которые ему были предложены несколько дней тому назад. На что князь велел ему ответить приблизительно следующее: «Три дня тому назад я звал тебя к себе на самых выгодных условиях, я тебе дозволял жить, где тебе вздумается, кроме Кавказа, а ты ничего и знать не хотел. Теперь не может быть и речи об условиях». Шамиль пытался еще делать всевозможные возражения, но все было напрасно».

Теодор Горшельт. Пленный Шамиль перед главнокомандующим князем Барятинским 25 августа 1859 года (Википедия)

По местным источникам, в частности по Абдурахману, 25 августа имам вышел из аула на переговоры с главнокомандующим, на время которых было объявлено перемирие «с условием возвращения обратно».

Газимухаммад, сын имама, узнав о неожиданном задержании отца русскими, схватился за оружие, решив, цитирую, «нарушить перемирие, которое было заключено».

26 августа Барятинский отправил в Петербург сообщение: «Гуниб взят. Шамиль в плену».

– Мы имеем на сегодня именно непонимание Шамиля, было ли это специально сделано, или это была оговорка, и Юнус Чиркейский неправильно перевел. Но факт: что имам шел с одними целями. Барятинский давно имел в виду, по крайней мере в тот день, он принял уже решение окончательно, что Шамиль будет военнопленным. В итоге что произошло 25 августа 1859 года?

– На открытых 19 августа 1859 г. переговорах имам Шамиль предлагал временное перемирие, которое позволило бы ему с единомышленниками беспрепятственно покинуть осажденную гору и отправиться в хадж, т.е. в Османскую империю. Главнокомандующий со своей стороны настаивал на предварительном заключении с имамом и его сыновьями письменного соглашения о сложении оружия и обязательства жить за пределами Российской империи. Имам не только отказался заключать соглашение, которое гарантировало выполнение его условий перемирия, но и выдвинул еще одно невыполнимое требование – оставить его на Гунибе в течение еще одного месяца. Однако 25 августа, сознательно или случайно введенный в заблуждение доверенным лицом, Шамиль вышел из осажденного селения Гуниб на продолжение переговоров с главнокомандующим и был взят в плен.

Беседа об имаме Шамиле открывает новый проект редакции Кавказ.Реалии. 5 января слушайте на сайте kavkazr.com и в интернет-сервисах первый выпуск подкаста «Хроника Кавказа с Вачагаевым«. Майрбек Вачагаев вместе со своими гостями — учёными, экспертами, общественными деятелями — обсуждает исторические проблемы развития кавказского региона и пути их решения.

Диалог с директором

Уважаемый Ефим Лазаревич! Сегодня у меня была необходимость поехать из школы на Елецкой в здание на Захарова. Попросила учителя взять нас с ребенком на школьный автобус. Я просто была потрясена! (Водителя зовут Сергей). Так водить автобус с детьми, да и не только с детьми, просто нельзя. То притормозит, то сдает с места, как будто под ним земля горит. Трогает с места, как будто сейчас включит последнюю скорость в космолете, а потом опять тормозит. Детки даже на сиденьях мотаются туда-сюда. Говорят, что он всегда так водит, и они уже привыкли, но это не нормально. Безусловно, существует такая манера вождения, но она характерна для людей неуравновешенных, раздраженных, о чем свидетельствует следующий эпизод. В какой-то момент, товарищ оторвался от руля, выглянув наполовину из кабины, и абсолютно мерзким голосом провизжал, чтобы сопровождающие следили за детьми, «…а не разводили ля-ля…А то, высажу всех на газон, и пусть там продолжают играть». Его оказываться раздражало, что дети веселятся, кричат, галдят, а учитель не делает замечаний и не кричит в ответ. После такого с позволения сказать выступления, затихли все, включая учителей. Мне показалось, что дети испугались. Я от такого хамства задохнулась. Ну не ожидала!!! Было огромное желание ответить и ровно в такой же манере, которую применил товарищ. Остановили дети. Очевидно, он этим и пользуется. Не понимаю, по какому праву водитель автобуса делает замечания учителю при школьниках! Таким образом, зарабатывается авторитет? Дети едут из школы, безусловно, они расслаблены, много шумят и кричат, большую часть дня они провели в школе и им очень хочется повеселиться прямо в автобусе (но они не бегали и не скакали). Сопровождающий учитель не считает нужным на них кричать за это, и очень хорошо. Не понимаю, почему это позволительно водителю автобуса? Думаю, в его функциональные обязанности входит: подача исправного транспортного средства в назначенное время, управление транспортным средством согласно правилам дорожного движения и т.п., но никак не замечания учителям и детям. Или он совмещает еще какую-нибудь должность, например начальник транспортного цеха? Школьный автобус всегда будет полон детскими криками, и слава богу. Так вот пусть имеет терпение, а если его нет (терпения) то тогда надо работать на автотранспорте специального назначения, например в службе ритуальных услуг. Полагаю, что этот член школьного коллектива, участник педагогического процесса работает не на общественных началах, а получает з/п, именно за то, что является водителем школьного автобуса и дети не должны являться раздражающим фактором. Впечатление, что человек не вполне адекватен, переполнен злобой, один сплошной негатив. От этого и скорее всего нервное вождение транспорта. Безопасность наших детей должна быть на первом месте! Как давно он проходил медкомиссию (диспансеризацию)? Если он такой ценный кадр может ему необходимо оказывать психологическую помощь? Хочу заметить, что ездила с другим водителем, абсолютно другая обстановка. Управляет автобусом уверено, спокойно, без истерик и претензий. Из-за ограниченности времени не успела подробно узнать о поведении Сергея ранее, но как я поняла, подобные истории уже были. Такое поведение водителя недопустимо. Убедительная просьба, примите меры. С уважением, Наталья, мама ученицы 2 «д»

Здравствуйте, Наташа! Несколько необычно для формата Диалогов, но я попросил ответить на все Ваши обвинения водителя Сологубова, который вполне владеет эпистолярным жанром. Ниже привожу ответ: Здравствуйте, уважаемая Наталья, мама ученицы 2 «д»! Ефим Лазаревич любезно предоставил мне возможность ответить на Ваше письмо. Зовут меня Сергей Александрович Сологубов. Я являюсь водителем школы и, как Вы выразились, «начальником транспортного цеха». В письме затронуто много вопросов, посему отвечать буду, вставляя свой комментарий в текст подчёркнутым курсивом. Уважаемый Ефим Лазаревич!Сегодня у меня была необходимость поехать из школы на Елецкой в здание на Захарова. Попросила учителя взять нас с ребенком на школьный автобус. Я просто была потрясена! (Водителя зовут Сергей). Вероятно, имя водителя Вы узнали от сопровождающей, а она Вас неправильно проинформировала (к сожалению, за полгода не узнав имени шофера). Так вот, Вашего обидчика зовут Праслов Александр Викторович. Так водить автобус с детьми, да и не только с детьми, просто нельзя. То притормозит, то сдает с места, как будто под ним земля горит. Трогает с места, как будто сейчас включит последнюю скорость в космолете, а потом опять тормозит. Трудно ждать от автобуса, сделанного из грузовика, плавности и комфортности. А насчёт горящей земли… позвольте мне Вам не поверить. Я открою Вам страшную тайну: это транспортное средство со дня своего рождения не развивает мощность, поэтому его предел редко превышает 55 км/ч, и скорость разгона у него тоже хромает (неправильно работает система коман рейл). Детки даже на сиденьях мотаются туда-сюда. Говорят, что он всегда так водит, и они уже привыкли, но это не нормально. Хотелось бы услышать тех, КТО ГОВОРИТ. Скорее, это относится ко мне у меня и автобус помощнее, и езжу я поагрессивнее. Безусловно, существует такая манера вождения, Насчёт манеры, смею Вас заверить, что возят ваших детей опытные водители со стажем: у меня — 27лет, а у Александра Викторовича — 37лет но она характерна для людей неуравновешенных, раздраженных, о чем свидетельствует следующий эпизод. В какой-то момент, товарищ оторвался от руля, выглянув наполовину из кабины, Как-то это страшно звучит. А он остановился хотя бы? Извините, это я пошутил…. Про этот случай я узнал в тот же день: мы своим тесным ШОФЁРСКИМ кругом обсуждаем подобные случаи и абсолютно мерзким голосом провизжал, А вот здесь Вы оскорбляете человека, намного старше Вас. чтобы сопровождающие следили за детьми, «…а не разводили ля-ля…А то, высажу всех на газон, и пусть там продолжают играть». А что, по-Вашему, должен делать сопровождающий? Разговаривать с попутчиками? Смотреть в окно?Или все-таки, выполняя свои функциональные обязанности, следить за дисциплиной в автобусе, поскольку, как и водитель, работает не на общественных началах, а получает ЗАРАБОТНУЮ ПЛАТУ?! Ведь от работы сопровождающего в немалой степени ЗАВИСИТ БЕЗОПАСНОСТЬ перевозки ВАШИХ детей. Водителем было сказано, что детей высадят на газон и подождут, пока детишки наиграются, а потом отвезут к месту назначения. Его оказываться раздражало, что дети веселятся, кричат, галдя т, а учитель не делает замечаний и не кричит в ответ. По- моему, этими словами всё сказано. Кстати, не всё… Одна из учениц второго класса встала с заднего сидения, пробежала по автобусу вперёд, поговорила с мамой и спокойно побежала на место (всё это время автобус продолжал движение). После такого с позволения сказать выступления, затихли все, включая учителей. Мне показалось, что дети испугались. Я от такого хамства задохнулась. Что Вы называете ХАМСТВОМ? Водитель указал на то, что СОПРОВОЖДАЮЩАЯ не выполняет свои обязанности… ЭТО Вас оскорбило? Ну не ожидала!!! Было огромное желание ответить и ровно в такой же манере, которую применил товарищ. Остановили дети. Очевидно, он этим и пользуется. Не понимаю, по какому праву водитель автобуса делает замечания учителю при школьниках! Насчёт ПРАВ: водитель — единственное лицо, несущее УГОЛОВНУЮ ОТВЕТСТВЕННОСТЬ (!!!) при перевозке. СОПРОВОЖДАЮЩАЯ дана ему в помощь, чтобы его в пути ничто не отвлекало. Вы посмотрите: в общественном транспорте водитель сидит за стенкой и железной дверью. Это что? ФЕНЕЧКА?.. Её ДУРАКИ придумали? Таким образом, зарабатывается авторитет? У кого? Он взрослый человек, у него двое взрослых детей, и у его детей есть дети — зачем ему это? У него всё есть. Дети едут из школы, безусловно, они расслаблены, много шумят и кричат, большую часть дня они провели в школе и им очень хочется повеселиться прямо в автобусе (но они не бегали и не скакали). А у меня другая информация: бегали, скакали, кричали (см. выше). Сопровождающий учитель не считает нужным на них кричать за это, и очень хорошо. Не понимаю, почему это позволительно водителю автобуса? Думаю, в его функциональные обязанности входит: подача исправного транспортного средства в назначенное время, управление транспортным средством согласно правилам дорожного движения и т.п., но никак не замечания учителям и детям. Вы немного узко понимаете ФУНКЦИОНАЛ водителя Или он совмещает еще какую-нибудь должность, например начальник транспортного цеха? Школьный автобус всегда будет полон детскими криками, и слава богу. Так вот пусть имеет терпение, а если его нет (терпения) то тогда надо работать на автотранспорте специального назначения, например в службе ритуальных услуг. Я Вам поясню: АВТОБУС — это транспортное средство, а значит, объект ПОВЫШЕННОЙ ОПАСНОСТИ и, как все подобные ОБЪЕКТЫ, подчиняется правилам, в том числе и перевозки детей в автобусе… Я не буду их здесь цитировать, но, согласно этим правилам, даже разговаривать детям можно только вполголоса, не говоря уже про еду в пути и пробежки по салону. Полагаю, что этот член школьного коллектива, участник педагогического процесса работает не на общественных началах, а получа ет з/п, именно за то, что является водителем школьного автобуса и дети не должны являться раздражающим фактором. Впечатление, что человек не вполне адекватен, переполнен злобой, один сплошной негатив. От этого и скорее всего нервное вождение транспорта. Безопасность наших детей должна быть на первом месте! Как давно он проходил медкомиссию (диспансеризацию)? Если он такой ценный кадр может ему необходимо оказывать психологическую помощь? Хочу заметить, что ездила с другим водителем, абсолютно другая обстановка. Управляет автобусом уверено, спокойно, без истерик и претензий.Из-за ограниченности времени не успела подробно узнать о поведении Сергея ранее, но как я поняла, подобные истории уже были Кстати, на рейсе в 15.30. всегда с дисциплиной проблемы, с другими сопровождающими ездить легче. С этим рейсом связана одна история: с сопровождающей садилась бабушка с ребёнком и спокойно доезжала с нами, выходя по дороге, но перед Новым Годом возникла проблема с вместимостью автобуса…. Стали разбираться, спрашиваем у сопровождающего: «А что это за бабушка?» А сопровождающая и не знает, кого в автобус сажает. Спрашиваем у бабушки: «А кто Вы такая?» Оказалось, никакого отношения к нашей школе бабушка с ребёнком не имеет, просто так решила свою транспортную проблему. Такое поведение водителя недопустимо. Убедительная просьба, примите меры.С уважением,Наталья, мама ученицы 2 «д» Конечно, Ефим Лазаревич примет меры, уволит Александра Викторовича и возьмёт на работу кого-нибудь… Благо, сейчас полно народу поувольняли с маршруток, так как в настоящее время нужна московская прописка, чтобы там работать. И опять же в зарплате экономия. (Простите, опять пошутил).

Награждение членов сборной России по хоккею — Новости хоккея

Сборная России по хоккею в воскресенье одержала победу в финале мирового первенства над командой Финляндии со счётом 5:2.

* * *

В.ПУТИН: Добрый день, дорогие друзья!

Я очень рад встретиться с вами вновь, поздравить с блестящим выступлением на чемпионате мира по хоккею.

Вы показали в Минске прекрасную игру – скоростную, техничную, результативную, что самое главное, выделялись отличной физической подготовкой, характером и волей к победе.

Мы знаем, сколько игроков было травмировано, но играли так, что никто этого не видел, от игры к игре «прибавляли» и были сильнее во всех матчах, а в финале взяли верх над финнами – принципиальными соперниками последних лет, над командой очень мощной, сыгранной и в высшей степени достойной самых высоких похвал и наград.

Наша сборная внесла достойный вклад в великие победные традиции отечественного хоккея, укрепила лидерство в мировом спортивном рейтинге и, конечно, сделала замечательный подарок миллионам болельщиков во всей стране, всем, кто переживал за вас и верил в ваш успех.

Отдельно отмечу работу тренерского штаба. Последние годы мы много говорили о том, как непросто было добиться сыгранности, сбалансированности состава, подобрать эффективные звенья и «связки» из хоккеистов, выступающих и за океаном, и на наших площадках в рамках Континентальной хоккейной лиги.

В Минске это точно совершенно удалось. Игроки каждой «пятёрки» хорошо понимали друг друга, буквально чувствовали партнёра, оправдали доверие и опытные игроки, и те 14 так называемых условно «новичков», тех, кто впервые выступал за сборную нашей страны на чемпионате мира.

Я хочу поздравить Олега Валерьевича Знарка с профессиональным успехом – первым «золотом» мирового первенства, его первым «золотом». Вы приняли команду всего два месяца назад, за этот небольшой срок сумели многого добиться.

Рассчитываю на столь же добротную подготовку сборной к будущим соревнованиям. Имею в виду и ежегодные престижные турниры, и, конечно же, чемпионат мира по хоккею 2016 года, который пройдёт в нашей стране, в России.

Дорогие друзья! Хоккей по праву пользуется в нашей стране особой любовью и особым вниманием. И ваш триумф в Минске очень значим для популяризации хоккея, развития массового спорта, для формирования здорового, активного образа жизни, прежде всего, конечно, у молодёжи.

Только что я встречался с теми людьми, которые занимаются проблемами детского, подросткового здоровья. И хочу вам сказать, что одна из важнейших составляющих в решении этой общенациональной задачи – улучшение здоровья нации в целом – это, конечно, повышение интереса к спорту. И именно примеры подобного рода самым эффективным образом способствуют решению этой задачи.

Мы рассчитываем на вас. Ждём, что вы будете и впредь добиваться результатов, как и ваши великие предшественники, высоко будете держать планку отечественного хоккея.

Ещё раз от души вас всех поздравляю. Желаю блестящих побед и всего самого-самого доброго. Большое вам спасибо.

<…>

Дорогие друзья! Я ещё раз вас поздравляю.

Знаете, у меня есть ещё несколько информаций. Первая заключается в том, что сегодняшнее мероприятие, ваш успех – это, безусловно, то что является результатом всей истории развития российского спорта и всего российского хоккея, нашей школы, тех людей, которые тренировали и играли до вас, добивались других не менее значимых побед. Таких у нас было очень много, вы знаете.

И в этом зале находится человек, который входил в сборную команду СССР, когда она впервые принимала участие в Олимпийских играх, в 1956 году. Это Шувалов Виктор Григорьевич. К сожалению, в трудные 90-е годы Виктор Григорьевич утратил свою олимпийскую медаль, так получилось, много было сложностей и проблем. В конечном итоге она оказалась в Соединённых Штатах, где некоторые из вас и работают сейчас. Мы её нашли, с помощью меценатов выкупили. И я хочу вернуть её Виктору Григорьевичу.

И ещё одно хотел бы сказать. Знаете, не удержался от того, чтобы зайти к вам в раздевалку после окончания матча. И первое, что я сделал, это поздравил тренера Олега Знарка с результатом, с его первым результатом и с вашей победой, но совершенно неожиданно для меня в ответ вдруг прозвучало: «Извините, простите меня, пожалуйста». Я рот открыл: «За что?» – «За мой недостойный жест. Не повторится больше никогда».

Вы знаете, в такой момент, когда, казалось бы, триумф общий, победа, и победителей, конечно, не судят, но то, что тренер об этом говорит, это здорово, это показывает наш общий настрой на честную, результативную борьбу. Собственно говоря, вы это и подтвердили в ходе мачта: были очень сдержанными, мужественно играли, но в то же время очень достойно.

Мои слова благодарности ещё раз всему тренерскому составу за всё, что было сделано, и, конечно, хоккеистам за эту блистательную победу. Спасибо вам большое.

А.ОВЕЧКИН: Уважаемый Владимир Владимирович! Уважаемая команда, наша семья!

От лица капитанов хотел бы поблагодарить Вас, всю страну, всех болельщиков за поддержку, за ту силу, которую вы нам даёте. И я думаю, что все знают, что мы настоящие бойцы, мы выступали единым кулаком – с травмами, с переломами, со всеми болячками, которые у нас были, но мы сделали это «золото». Это «золото» для вас, для всей России, для родных, для близких, для родителей. Спасибо вам огромное. И мы хотели бы вручить Вам майку с автографами.

Руководство эксперта к экзамену AP по языку и композиции

С экзаменом AP 2022 по английскому языку и сочинению, который состоится во вторник, 10 мая, , самое время убедиться, что вы знакомы со всеми аспектами экзамена. В этой статье я дам краткий обзор теста, сделаю более глубокое погружение в каждый из разделов, расскажу, как оценивается экзамен, предложу некоторые стратегии обучения и, наконец, подведу некоторые важные советы дня экзамена.

2021 AP Test Changes из-за COVID-19

В связи с продолжающейся пандемией коронавируса COVID-19 тесты AP теперь будут проводиться в течение трех разных сессий с мая по июнь. Даты ваших экзаменов, а также то, будут ли они проводиться онлайн или в бумажном виде, будут зависеть от вашей школы. Чтобы узнать больше о том, как все это будет работать, а также получить последнюю информацию о датах тестирования, онлайн-обзоре AP и о том, что эти изменения значат для вас, обязательно ознакомьтесь с нашей статьей часто задаваемых вопросов о AP COVID-19 на 2021 год.

Обзор экзамена

Экзамен AP по языку и композиции проверяет ваши риторические и композиционные навыки. По сути, как авторы создают эффективные аргументы в своих статьях? Какие инструменты они используют? Как вы можете использовать эти инструменты для самостоятельного создания эффективного письма? В этом суть риторического анализа.

Экзамен состоит из двух частей: первая часть длится часов и включает 45 вопросов с несколькими вариантами ответов. Включает пять наборов вопросов, каждый из которых основан на отрывке или отрывках. В этом разделе будет 23-25 ​​вопросов риторического анализа, которые проверят ваши риторические навыки. Также будет 20-22 вопроса о композиции, которые потребуют от вас пересмотра текстов, которые вам показывают.

Второй раздел — бесплатный ответ. Он начинается с 15-минутного периода чтения, а затем у вас будет 120 минут, чтобы написать три аналитических эссе:

• Одно эссе, в котором вы синтезируете несколько предоставленных текстов для создания аргумента
• Одно эссе, в котором вы анализируете отрывок из научной литературы на предмет его риторической конструкции
• Одно эссе, в котором вы создаете оригинальный аргумент в ответ на подсказку.

У вас будет около 40 минут на написание каждого сочинения, но никто не предложит вам перейти от сочинения к сочинению — вы можете структурировать 120 минут по своему усмотрению.

В следующих разделах я более подробно рассмотрю каждый раздел экзамена — сначала множественный выбор, а затем свободный ответ.

AP Английский язык и функция выбора композиции

Раздел с множественным выбором проверяет вас по двум основным направлениям. Во-первых, насколько хорошо вы можете читать и понимать отрывки из научно-популярной литературы для использования в них риторических приемов и инструментов.Во-вторых, насколько хорошо вы можете «мыслить как писатель» и вносить изменения в тексты в вопросах композиции.

Вам будут представлены пять отрывков, по которым вы получите небольшое количество ориентировочной информации, например «Этот отрывок взят из сборника эссе о лодке» или «Этот отрывок взят из эссе, написанного в 19 веке на Гаити». Каждый отрывок будет сопровождаться набором вопросов.

Как правило, существует восьми типов вопросов, с которыми вы можете столкнуться в разделе экзамена с несколькими вариантами ответов. Я взял свои примеры из типовых вопросов в «Описании курсов и экзаменов».

Волшебный шар-восемь говорит, что существует восемь типов вопросов с несколькими вариантами ответов!

Тип 1: понимание прочитанного

Эти вопросы направлены на подтверждение того, что вы поняли, что говорится в определенной части отрывка на конкретном, буквальном уровне. Эти вопросы можно определить по таким фразам, как «согласно», «относится» и т. Д.Лучший способ добиться успеха в ответах на эти вопросы — это вернуться назад и очень внимательно перечитать ту часть отрывка, о которой идет речь.

Пример:

Тип 2: Последствия

Эти вопросы продвигают понимание прочитанного на один шаг вперед — они в первую очередь сосредоточены на том, что подразумевает автор , не выходя прямо и не говоря это. Однако на эти вопросы будет правильный ответ, основанный на свидетельствах из отрывка.Какую интерпретацию, предложенную в ответах, больше всего поддерживает этот отрывок? Вы можете определить подобные вопросы, используя такие слова, как «лучше всего поддерживается», «подразумевает», «предполагает», «предполагается» и т. Д.

Пример:

Тип 3: Общий переход и вопросы автора

Эти вопросы касаются общих элементов отрывка или автора, таких как отношение автора к обсуждаемой проблеме, цель отрывка, общий стиль отрывка, аудитория отрывка и так далее.

Вы можете идентифицировать эти вопросы, потому что они не относятся к конкретному моменту в тексте. Чтобы ответить на эти вопросы, вам нужно подумать об отрывке из «с высоты птичьего полета» и подумать, что объединяют все мелкие детали, чтобы сказать.

Пример:

Тип 4: отношения между частями текста

В некоторых вопросах вам будет предложено описать взаимосвязь между двумя частями текста, , являются ли они абзацами или конкретными строками.Вы можете идентифицировать их, потому что они обычно явно спрашивают о взаимосвязи между двумя идентифицированными частями текста, хотя иногда вместо этого они спрашивают о взаимосвязи неявно, говоря что-то вроде «по сравнению с остальной частью отрывка».

Пример:

Тип 5: Интерпретация образов / образный язык

Эти вопросы зададут вам более глубокое значение или значение образного языка или образов , которые используются в тексте.По сути, почему автор решил использовать это сравнение или эту метафору? Чего он пытается достичь?

Как правило, вы можете определить подобные вопросы, потому что вопрос конкретно относится к моменту образного выражения в тексте. Однако может не сразу стать очевидным, что упомянутая фраза является образной, поэтому вам может потребоваться вернуться и посмотреть на нее в отрывке, чтобы быть уверенным в том, с каким вопросом вы сталкиваетесь.

Пример:

Тип 6: Назначение части текста

Еще другие вопросы попросят вас определить , какой цели служит конкретная часть текста в более крупном аргументе автора. Что автор пытается достичь с конкретным моментом текста, указанным в вопросе?

Вы можете идентифицировать эти вопросы, потому что они обычно явно спрашивают, какой цели служит определенная часть текста. Вы также можете встретить такие слова или фразы, как «служит для» или «действует».

Пример:

Тип 7: Риторическая стратегия

Эти вопросы попросят вас определить риторическую стратегию , используемую автором.Они часто специально используют фразу «риторическая стратегия», хотя иногда вы сможете идентифицировать их вместо этого с помощью вариантов ответа, которые предлагают различные риторические стратегии в качестве возможностей.

Пример:

Тип 8: Состав

Это новейший тип вопросов, впервые представленный в 2019/2020 учебном году. Отвечая на эти вопросы, ученик должен будет действовать так, как если бы он был писателем, и продумал различные варианты выбора, которые писатели должны сделать при написании или редактировании текста.

Эти вопросы могут включать изменение порядка предложений или абзацев, добавление или пропуск информации для усиления аргумента или повышения ясности, внесение изменений для привлечения внимания читателя и другие варианты выбора на основе композиции.

Пример:

Здесь происходят очень важные стильные эффекты.

Одна из самых важных частей вашего заявления в колледж — это то, какие уроки вы выбираете в старшей школе (в сочетании с тем, насколько хорошо вы успеваете в этих классах). Наша команда экспертов по поступлению в PrepScholar объединила свои знания в это единственное руководство по планированию расписания вашего школьного курса. Мы посоветуем вам, как сбалансировать ваше расписание между обычными курсами и курсами с отличием / AP / IB, как выбрать дополнительные уроки и какие классы вы не можете позволить себе не посещать.

AP English Language and Composition Free Response

Раздел бесплатных ответов рассчитан на чтение 15 минут. По истечении этого времени у вас будет 120 минут, чтобы написать три эссе, посвященных трем различным задачам.

Поскольку первое эссе предполагает чтение источников, рекомендуется использовать весь 15-минутный период чтения, чтобы прочитать источники и спланировать первое эссе. Тем не менее, вы можете взглянуть на другие вопросы во время чтения, чтобы идеи могли проникнуть в ваш мозг, когда вы работаете над первым эссе.

Эссе первое: Синтез

В этом эссе вы кратко ознакомитесь с проблемой, а затем предоставите информацию из шести-восьми источников, которые предоставляют различные точки зрения и информацию по проблеме.Затем вам нужно будет написать аргументированное эссе с поддержкой документов.

Если это звучит очень похоже на DBQ, как на экзаменах AP по истории, то это потому, что это так! Однако это эссе носит гораздо более аргументированный характер — ваша цель — убедить, а не просто интерпретировать документы.

Пример (документы не включены, см. Бесплатные ответы на вопросы 2015 г.):

Эссе второе: риторический анализ

Во втором эссе вам будет представлен отрывок из научно-популярной статьи, в котором приводится аргумент, и вас попросят написать эссе, анализирующее риторические стратегии, использованные для построения аргументации отрывка. Вам также будет предоставлена ​​некоторая ориентировочная информация — откуда был взят отрывок, кто его написал, его приблизительная дата, где он был опубликован (если вообще был) и кому был адресован.

Пример (выдержка не включена, см. Бесплатные ответы на вопросы 2015 г.):

Эссе третье: аргумент

В третьем эссе вам будет представлена ​​проблема и предложено написать убедительное эссе с изложением позиции по проблеме. Вам нужно будет подкрепить свою позицию доказательствами из вашего «чтения, опыта и наблюдений».

Пример (из вопросов с бесплатными ответами 2015 года):

Это не похоже на очень хорошо построенный аргумент.

Оценка экзамена по языку и композиции AP

Раздел экзамена с несколькими вариантами ответов дает 45% вашей оценки, а раздел бесплатного ответа дает остальные 55%.Таким образом, каждое из трех эссе с бесплатными ответами стоит около 18% вашей оценки.

Как и в случае с другими AP, ваша необработанная оценка будет преобразована в масштабную оценку от 1 до 5. Этот экзамен имеет относительно низкую оценку 5. Только 12,6% тестируемых получили 5 баллов в 2020 году, хотя 62,1% студентов получили оценку 3 или выше.

С точки зрения того, как получается предварительная оценка, раздел множественного выбора аналогичен другим разделам множественного выбора AP: вы получаете балл за каждый вопрос, на который вы ответили правильно, , и нет штрафа за угадывание.

В 2019 году были обновлены оценочные рубрики для вопросов с бесплатными ответами. Они оцениваются с использованием аналитических, а не целостных рубрик. За каждый вопрос с бесплатным ответом вам будет выставлена ​​оценка от 0 до 6. Рубрики оценивают три основных направления:

# 1: Тезис (от 0 до 1 балла): Есть ли тезис и правильно ли он отвечает на подсказку?

# 2: Доказательства и комментарии (от 0 до 4 баллов): Включает ли эссе подтверждающие доказательства и анализ, который является актуальным, конкретным, хорошо организованным и поддерживает тезис?

# 3: Изощренность (от 0 до 1 балла): Хорошо ли написано эссе и достаточно ли хорошо разбирается в нюансах подсказки?

Каждая оценочная рубрика широко оценивает эти три фактора.Однако каждая задача также отличается по своему характеру, поэтому рубрики действительно имеют некоторые отличия. Я пройдусь по каждой рубрике — и что это на самом деле означает — для вас здесь.

Обобщающий очерк Рубрики

ТЕЗИС

Оценка	Критерии оценки	Эссе с таким счетом:
0	Для любого из следующего: Нет защищаемого тезиса. Предполагаемый тезис только повторяет подсказку. Предполагаемая диссертация представляет собой краткое изложение проблемы без явных или логичных утверждений. Есть тезис, но он не отвечает на подсказку.	Только повторите запрос. Не занимайте позицию, или позиция расплывчата или должна предполагаться. Высказывайте или резюмируйте аргументы других, но не учащегося (например, некоторые люди говорят, что это хорошо, некоторые люди говорят, что это плохо). Укажите очевидный факт вместо того, чтобы делать заявление, требующее защиты.
1	Отвечает на запрос с тезисом, который представляет собой оправданную позицию.	Отвечайте на подсказку, а не перефразируйте или перефразируйте подсказку, и тезис явно займет позицию, а не просто констатирует, что есть «за» / «против».

ДОКАЗАТЕЛЬСТВА И КОММЕНТАРИИ

Оценка	Критерии оценки	Эссе с таким счетом:
0	Просто переформулирует тезис (если есть), повторяет предоставленную информацию или ссылается менее чем на два из предоставленных источников.	Несогласованные или не отвечающие на запрос. Может быть просто мнением без текстовых ссылок или ссылок, которые не имеют отношения к делу.
1	ДОКАЗАТЕЛЬСТВО: Предоставляет доказательства или ссылки как минимум на два из предоставленных источников. А ТАКЖЕ КОММЕНТАРИЙ: резюмирует доказательства, но не объясняет, как доказательства поддерживают аргумент студента	Сосредоточен на кратком изложении или описании источников, а не на конкретных деталях.
2	ДОКАЗАТЕЛЬСТВА: Содержит доказательства или ссылки как минимум на три из предоставленных источников. А ТАКЖЕ КОММЕНТАРИЙ: Объясняет, как некоторые свидетельства соотносятся с аргументами учащегося, но аргументация не устанавливается или аргументация ошибочна.	Состоит из сочетания конкретных доказательств и общих сведений. Может содержать упрощенные, неточные или повторяющиеся объяснения, которые не укрепляют аргумент. Может хорошо выразить одну точку зрения, но либо не предъявляет нескольких подтверждающих заявлений, либо не поддерживает более одного утверждения. Не объясняйте связи или прогрессию между утверждениями учащегося, поэтому аргументация четко не установлена.
3	ДОКАЗАТЕЛЬСТВО: Предоставляет конкретные доказательства из как минимум трех из предоставленных источников для подтверждения всех утверждений в рамках аргументации. А ТАКЖЕ КОММЕНТАРИЙ: Объясняет, как некоторые свидетельства подтверждают цепочку рассуждений.	Единообразные доказательства в поддержку требований. Сосредоточьтесь на важности конкретных слов и деталей из источников, чтобы построить аргумент. Организуйте аргумент как цепочку рассуждений, состоящую из нескольких подтверждающих утверждений. Комментарий может не включать некоторые доказательства или не поддерживать ключевое утверждение.
4	ДОКАЗАТЕЛЬСТВО: Предоставляет конкретные доказательства из как минимум трех из предоставленных источников для подтверждения всех утверждений в рамках аргументации. А ТАКЖЕ КОММЕНТАРИЙ: Последовательно объясняет, как доказательства подтверждают линию рассуждений.	Единообразные доказательства в поддержку требований. Сосредоточьтесь на важности конкретных слов и деталей из источников, чтобы построить аргумент. Организуйте и поддержите аргумент как цепочку рассуждений, состоящую из нескольких подтверждающих утверждений, каждое из которых содержит адекватные доказательства, которые четко объяснены.

ИЗОБРАЖЕНИЕ

Ответы

Оценка	Критерии оценки	Эссе с таким счетом:
0	Не соответствует критерию на один балл	Попытка контекстуализировать их аргументы, но такие попытки состоят преимущественно из радикальных обобщений. Только намекните или предложите другие аргументы. Используйте сложные или сложные предложения или язык, который неэффективен, потому что они не усиливают аргумент.
1	Демонстрирует сложность мысли и / или сложное понимание риторической ситуации.	, за которые набирается этот балл, могут продемонстрировать сложность мысли и / или сложное понимание риторической ситуации, выполнив любое из следующих действий: Создание аргументации с тонкими нюансами путем последовательного выявления и изучения сложностей или противоречий в источниках. Формулирование последствий или ограничений аргумента (либо аргумента студента, либо аргументов, переданных в источниках), помещая его в более широкий контекст. Делать эффективные риторические выборы, которые последовательно усиливают силу и влияние аргумента студента на протяжении всего ответа. Использование неизменно яркого и убедительного стиля.

Пора превратить это тесто в печенье.

Риторический анализ Очерк рубрики

ТЕЗИС

Оценка	Критерии оценки	Эссе с таким счетом:
0	Для любого из следующего: Нет защищаемого тезиса. Предполагаемый тезис только повторяет подсказку. Предполагаемая диссертация представляет собой краткое изложение проблемы без явных или логичных утверждений. Есть тезис, но он не отвечает на подсказку.	Только повторите запрос. Неспособность учесть риторический выбор автора отрывка. Опишите или повторите отрывок вместо того, чтобы делать заявление, требующее защиты.
1	Отвечает на запрос, выдвигая оправданный тезис, в котором анализируется риторический выбор автора.	Отвечайте на подсказку, а не пересказывайте или перефразируйте подсказку и четко сформулируйте оправданный тезис о риторическом выборе автора.

ДОКАЗАТЕЛЬСТВА И КОММЕНТАРИИ

Оценка	Критерии оценки	Эссе с таким счетом:
0	Просто переформулирует тезис (если есть), повторяет предоставленную информацию или предлагает информацию, не имеющую отношения к подсказке.	Несогласованные или не отвечающие на запрос. Может быть просто мнением без текстовых ссылок или ссылок, которые не имеют отношения к делу.
1	ДОКАЗАТЕЛЬСТВО: Предоставляет доказательства в основном общего характера. А ТАКЖЕ КОММЕНТАРИЙ: резюмирует доказательства, но не объясняет, как доказательства поддерживают аргумент студента.	Сосредоточьтесь на кратком изложении или описании отрывка, а не на конкретных деталях или методах. Упомяните риторические варианты с краткими пояснениями или без них.
2	ДОКАЗАТЕЛЬСТВО: Предоставляет некоторые конкретные относящиеся к делу доказательства. А ТАКЖЕ КОММЕНТАРИЙ: Объясняет, как некоторые свидетельства соотносятся с аргументами учащегося, но аргументация не устанавливается или аргументация ошибочна.	Состоит из сочетания конкретных доказательств и общих сведений. Может содержать упрощенные, неточные или повторяющиеся объяснения, которые не укрепляют аргумент. Может хорошо выразить одну точку зрения, но либо не предъявляет нескольких подтверждающих заявлений, либо не поддерживает более одного утверждения. Не объясняйте связи или прогрессию между утверждениями учащегося, поэтому аргументация четко не установлена.
3	ДОКАЗАТЕЛЬСТВО: Предоставляет конкретные доказательства в поддержку всех утверждений в виде аргументации. А ТАКЖЕ КОММЕНТАРИЙ: Объясняет, как некоторые свидетельства подтверждают цепочку рассуждений. А ТАКЖЕ Объясняет, как хотя бы один риторический выбор в отрывке способствует аргументации, цели или посланию автора.	Единообразные доказательства в поддержку требований. Сосредоточьтесь на важности конкретных слов и деталей из источников, чтобы построить аргумент. Организуйте аргумент в виде цепочки рассуждений, состоящей из нескольких подтверждающих утверждений. Комментарий может не включать некоторые доказательства или не поддерживать ключевое утверждение.
4	ДОКАЗАТЕЛЬСТВО: Предоставляет конкретные доказательства в поддержку всех утверждений в виде аргументации. А ТАКЖЕ КОММЕНТАРИЙ: Последовательно объясняет, как доказательства подтверждают линию рассуждений. А ТАКЖЕ Объясняет, как несколько риторических вариантов отрывка способствуют аргументации, цели или посланию автора.	Единообразные доказательства в поддержку требований. Сосредоточьтесь на важности конкретных слов и деталей из источников, чтобы построить аргумент. Организуйте и поддержите аргумент как цепочку рассуждений, состоящую из нескольких подтверждающих> утверждений, каждое из которых содержит адекватные доказательства, которые четко объяснены. Объясните, как использование писателем риторических вариантов помогает учащимся интерпретировать отрывок.

ИЗОБРАЖЕНИЕ

Ответы

Оценка	Критерии оценки	Эссе с таким счетом:
0	Не соответствует критерию на один балл	Попытка контекстуализировать их аргументы, но такие попытки состоят преимущественно из радикальных обобщений. Только намекните или предложите другие аргументы. Исследуйте отдельные риторические варианты выбора, но не исследуйте отношения между различными вариантами выбора на протяжении отрывка. Упростите сложности в отрывке. Используйте сложные или сложные предложения или язык, который неэффективен, потому что они не усиливают аргумент.
1	Демонстрирует сложность мысли и / или сложное понимание риторической ситуации.	, за которые набирается этот балл, могут продемонстрировать сложность мысли и / или сложное понимание риторической ситуации, выполнив любое из следующих действий: Объяснение значения или актуальности риторического выбора автора (с учетом риторической ситуации). Объяснение цели или функции сложностей или напряженности отрывка. Использование стиля, который всегда был ярким и убедительным на протяжении всего ответа учащегося.

Внимательно изучите свои тексты!

Аргументативное эссе Рубрики

ТЕЗИС

Оценка	Критерии оценки	Эссе с таким счетом:
0	Для любого из следующего: Нет защищаемого тезиса. Предполагаемый тезис только повторяет подсказку. Предполагаемая диссертация представляет собой краткое изложение проблемы без явных или логичных утверждений. Есть тезис, но он не отвечает на подсказку.	Только повторите запрос. Не занимайте позицию, или позиция расплывчата или должна предполагаться. Укажите очевидный факт вместо того, чтобы делать заявление, требующее защиты.
1	Отвечает на запрос с тезисом, который представляет собой оправданную позицию.	Отвечайте на подсказку, а не перефразируйте или перефразируйте подсказку, и тезис явно займет позицию, а не просто констатирует, что есть «за» / «против».

ДОКАЗАТЕЛЬСТВА И КОММЕНТАРИИ

Оценка	Критерии оценки	Эссе с таким счетом:
0	Просто переформулирует тезис (если есть), повторяет предоставленную информацию или предлагает информацию, не имеющую отношения к подсказке.	Несогласованные или не отвечающие на запрос. Может быть просто мнением без текстовых ссылок или ссылок, которые не имеют отношения к делу.
1	ДОКАЗАТЕЛЬСТВО: Предоставляет доказательства в основном общего характера. А ТАКЖЕ КОММЕНТАРИЙ: резюмирует доказательства, но не объясняет, как доказательства подтверждают аргумент.	Обычно сосредотачиваются на кратком изложении доказательств, а не на конкретных деталях.
2	ДОКАЗАТЕЛЬСТВО: Предоставляет некоторые конкретные относящиеся к делу доказательства. А ТАКЖЕ КОММЕНТАРИЙ: Объясняет, как некоторые свидетельства соотносятся с аргументами учащегося, но аргументация не устанавливается или аргументация ошибочна.	Состоит из сочетания конкретных доказательств и общих сведений. Может содержать упрощенные, неточные или повторяющиеся объяснения, которые не укрепляют аргумент. Может хорошо выразить одну точку зрения, но либо не предъявляет нескольких подтверждающих заявлений, либо не поддерживает более одного утверждения.
3	ДОКАЗАТЕЛЬСТВО: Предоставляет конкретные доказательства в поддержку всех утверждений в виде аргументации. А ТАКЖЕ КОММЕНТАРИЙ: Объясняет, как некоторые свидетельства подтверждают цепочку рассуждений.	Единообразные доказательства в поддержку требований. Сосредоточьтесь на важности конкретных слов и деталей из источников, чтобы построить аргумент. Организуйте аргумент как цепочку рассуждений, состоящую из нескольких подтверждающих утверждений. Комментарий может не включать некоторые доказательства или не поддерживать ключевое утверждение.
4	ДОКАЗАТЕЛЬСТВО: предоставляет конкретных доказательств для поддержки> всех утверждений в рамках аргументации. А ТАКЖЕ КОММЕНТАРИЙ: Последовательно объясняет, как доказательства подтверждают линию рассуждений.	Единообразные доказательства в поддержку требований. Сосредоточьтесь на важности конкретных слов и деталей из источников, чтобы построить аргумент. Организуйте и поддержите аргумент как цепочку рассуждений, состоящую из нескольких подтверждающих утверждений, каждое из которых содержит адекватные доказательства, которые четко объяснены.

ИЗОБРАЖЕНИЕ

Ответы

Оценка	Критерии оценки	Эссе с таким счетом:
0	Не соответствует критерию на один балл	Попытка контекстуализировать их аргументы, но такие попытки состоят преимущественно из радикальных обобщений. Только намекните или предложите другие аргументы. Используйте сложные или сложные предложения или язык, который неэффективен, потому что они не усиливают аргумент.
1	Демонстрирует сложность мысли и / или сложное понимание риторической ситуации.	, за которые набирается этот балл, могут продемонстрировать сложность мысли и / или сложное понимание риторической ситуации, выполнив любое из следующих действий: Создание аргументации с тонкими нюансами путем последовательного выявления и изучения сложностей или противоречий. Формулирование последствий или ограничений аргумента (либо аргумента студента, либо аргумента, связанного с подсказкой), помещая его в более широкий контекст. Делать эффективные риторические выборы, которые последовательно усиливают силу и влияние аргумента студента. Использование стиля, который всегда был ярким и убедительным на протяжении всего ответа учащегося.

Самый лучший вид безумия — это щенячье безумие!

AP Советы по подготовке к изучению английского языка

В отличие от своего двоюродного брата, экзамена AP по английской литературе и композиции, экзамен (и курс) по языку и композиции AP имеет мало общего с художественной литературой или поэзией. Таким образом, некоторые студенты, привыкшие к более традиционным занятиям по английскому, могут быть в некотором недоумении относительно того, что делать, чтобы подготовиться.

К счастью, у меня есть для вас целый ряд советов по подготовке!

Читайте документальную литературу с умом

Главное, что вы можете сделать, чтобы подготовиться к экзамену AP Lang and Comp, — это прочитать документальную литературу — , в частности, , документальную литературу, в которой аргументируется позиция , явно (как обзорная статья) или неявно (как многие мемуары и личные эссе). ).Читайте различные жанры и темы научно-популярной литературы и обратите внимание на следующее:

• Каков аргумент автора?

• Какие доказательства они используют в поддержку своей позиции?

• Какие риторические приемы и стратегии они используют для построения своих аргументов?

• Насколько они убедительны? Какие контраргументы вы можете выделить? Они обращаются к ним?

Обдумывание этих вопросов во время чтения поможет вам отточить свои навыки риторического анализа.

Изучите риторические термины и стратегии

Конечно, если вы собираетесь анализировать читаемые вами научно-популярные произведения на предмет их риторических приемов и стратегий, вам необходимо знать, что это такое! Вы должны выучить у своего учителя прочный набор риторических терминов, но вот мой путеводитель по наиболее важным терминам AP Language and Composition.

Если вы хотите просмотреть, есть много ресурсов, к которым вы можете обратиться:

• Еще один отличный ресурс для изучения риторического анализа и того, как на самом деле используются риторические приемы, — это аргумент обучения канала YouTube, в котором есть видеоролики, риторически анализирующие все, от музыкальных клипов Тейлор Свифт до Рекламы Суперкубка.Это интересный способ подумать о риторических приемах и познакомиться с аргументативными структурами.

• Наконец, отличная книга — которую вы, возможно, уже использовали в своем классе — это «Они говорят, я говорю». Эта книга представляет собой обзор риторики специально для академических целей, который хорошо послужит вам для подготовки к AP и не только.

Написать

Вам также необходимо практиковать аргументированное и убедительное письмо. В частности, вам следует практиковать стили письма, которые будут проверяться на экзамене: синтез ваших собственных аргументов, основанных на нескольких внешних источниках, риторический анализ другого фрагмента письма и создание полностью оригинальных аргументов на основе ваших собственных доказательств и опыт.

Чтобы подготовиться, вы должны выполнять много письменных заданий в своем классе AP, но вдумчивое дополнительное написание поможет. Вам также не обязательно превращать всю практику письма, которую вы делаете, в отточенные части — просто написание для себя, пытаясь решить некоторые из этих задач, даст вам легкий способ опробовать различные риторические структуры и аргументированные ходы, , а также отработка таких вещей, как организация и развитие собственного стиля письма.

Не самое удачное начало для аргументированного эссе.

Практика к экзамену

Наконец, вам понадобится практики специально для формата экзамена. В разделе «Описание курса AP и экзамена» есть образцы вопросов с несколькими вариантами ответов, а на веб-сайте College Board есть старые вопросы с бесплатными ответами.

К сожалению, Совет колледжа официально не опубликовал никаких полных экзаменов за предыдущие годы для экзамена AP по английскому языку и композиции, но вы можете найти некоторые из них, которые учителя загрузили на школьные веб-сайты и т. Д. С помощью Googling «AP Language complete выпустили экзамены.»У меня также есть руководство по практическим тестам AP по языку и композиции.

Как только вы подготовитесь и будете готовы к работе, как вы сможете сделать все возможное на тесте?

Ищете помощь в подготовке к экзамену AP?

Наши индивидуальные онлайн-услуги по обучению AP могут помочь вам подготовиться к экзаменам AP. Найдите лучшего репетитора, получившего высокие баллы на экзамене, на который вы готовитесь!

AP Советы по тестированию языка и сочинения

Вот четыре ключевых совета для успеха тестового дня.

У вас стопроцентный успех!

Взаимодействовать с текстом

Когда вы читаете отрывки, как для раздела с множественным выбором, так и для первых двух вопросов со свободным ответом, взаимодействуйте с текстом! Отметьте в нем вещи, которые кажутся важными, приемы, которые вы замечаете, аргументы автора и все остальное, что кажется важным для риторического построения текста. Это поможет вам взаимодействовать с текстом и упростит ответы на вопросы или написание эссе о отрывке.

Подумайте об основной цели и аргументе каждого текста

Точно так же в каждом прочитанном вами отрывке учитывайте главную цель и аргумент автора. Если вы сможете с уверенностью определить , каково основное утверждение автора, будет легче проследить, как все другие аспекты текста играют в основной мысли автора.

Планируйте свои сочинения

Самая важная вещь, которую вы можете сделать для себя в разделе бесплатных ответов на экзамене AP по английскому языку, — это потратить несколько минут на планирование и набросок ваших эссе, прежде чем вы начнете их писать.

В отличие от некоторых других экзаменов, где содержание является наиболее важным аспектом эссе, на экзамене AP Language Exam, организация , хорошо продуманная аргументация и убедительные доказательства имеют решающее значение для высоких оценок за эссе. План поможет вам во всем этом. Вы сможете убедиться, что каждая часть вашего аргумента логична, имеет достаточно доказательств и что ваши абзацы составлены таким образом, чтобы они были четкими и плавными.

Предвидеть и рассматривать контраргументы

Еще одна вещь, которую вы можете сделать, чтобы дать вашим свободным ответам дополнительный импульс, — это выявить контраргументы против вашей позиции и рассмотреть их в своем эссе.Это не только помогает укрепить вашу позицию, но и — довольно сложный ход в рассчитанном по времени эссе, который принесет вам славу среди грейдеров AP.

Обращайтесь к контраргументам правильно, иначе они могут быть возвращены отправителю!

Основные выводы

Экзамен AP по языку и композиции проверяет ваши риторические навыки. Экзамен состоит из двух частей.

Первый раздел представляет собой часовой тест из 45 вопросов с множественным выбором , основанный на риторических приемах и выборе композиции.

Второй раздел — это двухчасовой раздел с бесплатными ответами (с 15-минутным начальным периодом чтения) с тремя вопросами для сочинения: один, где вы должны синтезировать данные источники, чтобы выдвинуть оригинальный аргумент, второй, где вы должны риторически проанализировать данный отрывок, и тот, в котором вы должны создать полностью оригинальный аргумент по проблеме без каких-либо внешних источников.

Вы получите один балл за каждый правильный ответ в разделе экзамена с несколькими вариантами ответов, что составляет 45% вашей оценки.Раздел бесплатных ответов стоит 55% вашей оценки. За каждый вопрос с бесплатным ответом вы получите оценку по шкале от 0 до 6. Ваш общий необработанный балл будет преобразован в балл по шкале от 1 до 5.

Вот несколько стратегий подготовки к тесту для AP Lang:

# 1 : читайте научную литературу с учетом риторики
# 2 : изучите риторические стратегии и техники
# 3 : потренируйтесь писать, чтобы применить риторические навыки
# 4 : потренироваться перед экзаменом!

Вот несколько советов по успешному тестированию:

# 1 : взаимодействуйте с каждым проходом, с которым вы сталкиваетесь!
# 2 : Учитывайте главную цель и аргумент каждого текста.
# 3 : Следите за временем
# 4 : Планируйте свои эссе
# 5 : Выявляйте контраргументы в своих эссе и устраняйте их.

Обладая всеми этими знаниями, вы готовы сразить зверя AP English Language and Composition!

Благородный рыцарь, приготовьтесь сразить дракона AP!

Что дальше?

Хотите больше обзора AP Lang? У нас есть полная коллекция выпущенных практических тестов AP Language, а также список терминов AP Lang, которые вам необходимо знать, и руководство по разделу множественного выбора.

Сдаете литературный экзамен AP? Ознакомьтесь с нашим полным руководством по тесту AP по английской литературе и нашим списком практических тестов AP по литературе.

Сдаете другие экзамены AP? См. Наши полные руководства по всемирной истории AP, истории AP США, химии AP, биологии AP, всемирной истории AP и географии человека AP.

Нужны дополнительные инструкции по подготовке AP? Узнайте, как подготовиться к экзаменам AP и как найти практические тесты AP.

Хотите создать наилучшее приложение для колледжа?

Мы можем помочь. PrepScholar Admissions — лучшая в мире консалтинговая служба при приеме на работу. Мы объединяем консультантов мирового класса с нашими , основанными на данных, патентованными стратегиями приема . Мы наблюдаем за тем, как тысячи студентов поступают в свои лучшие школы , от государственных колледжей до Лиги плюща.

Мы знаем, каких студентов хотят принять колледжи. Мы хотим, чтобы вы поступили в школу вашей мечты .

Узнайте больше о зачислении на PrepScholar , чтобы максимально увеличить свои шансы на поступление.

На что следует обратить внимание при выборе инструмента анализа состава программного обеспечения

Развитие программного обеспечения с открытым исходным кодом сопряжено с рисками для сегодняшних приложений. Используйте инструмент анализа состава программного обеспечения, чтобы уменьшить эти риски.

Gartner в своем «Руководстве по анализу состава программного обеспечения» подробно описывает необходимость включения анализа состава программного обеспечения (SCA) в набор инструментов для тестирования безопасности приложений. Мы обсудили, что и почему в недавнем сообщении в блоге; сегодня давайте обсудим как.

Все большее число компаний добавляют инструменты SCA в свой набор инструментов, поскольку потребность в программном обеспечении с открытым исходным кодом и его использование не ослабевают. Стремительный рост использования открытого исходного кода не нов, и в основе использования открытого исходного кода лежит его основное преимущество при разработке коммерческого программного обеспечения: скорость. В сочетании с другой растущей тенденцией в разработке программного обеспечения, принятием DevOps, важность скорости, автоматизации и тесной интеграции в существующие наборы инструментов возрастает еще больше.

Четыре соображения при добавлении анализа композиции программного обеспечения в набор инструментов

При выборе инструмента анализа композиции программного обеспечения необходимо учитывать несколько моментов, но несколько ключевых моментов имеют решающее значение для реализации долгосрочной стратегии с открытым исходным кодом.

1. Открытие

Понимание того, что является открытым исходным кодом в вашем коде, является первым важным шагом. В конце концов, вы не можете исправить то, о чем не подозреваете. Выбирая решение SCA, вы должны посмотреть на языковой охват каждого набора инструментов, чтобы убедиться, что он включает языки, которые вы используете сегодня.Но не забывайте смотреть в будущее. Со временем ваши потребности могут расширяться и расти, и вы не хотите быстро перерасти свой набор инструментов. Во-вторых, убедитесь, что вы понимаете, какие методы обнаружения использует инструмент для поиска открытого исходного кода. Сканирование менеджеров пакетов выполняется быстро и эффективно, но они могут упустить открытый исходный код, который мог быть изменен или скопирован по частям. В этих случаях вам понадобится более сложный подход к сканированию. Кроме того, у вас может не всегда быть доступ к исходному коду, поэтому вам нужно выбрать инструмент, который может сканировать двоичные файлы.

2. Данные об уязвимости

Когда у вас есть полный список материалов (BoM), его необходимо сопоставить с известными уязвимостями безопасности. Инструменты с разнообразным набором источников данных и собственная исследовательская группа, дополняющая данные, предоставят наиболее полные и действенные данные. Поскольку количество уязвимостей продолжает расти из года в год, а практика DevOps требует, чтобы команды продолжали повышать скорость и гибкость, поиск поставщика, который не только сообщает об уязвимостях, но и определяет их приоритетность, и предоставляет действенные рекомендации по исправлению, становится еще более важным.Обратите внимание, что Национальная база данных об уязвимостях (NVD) является отличным источником информации об уязвимостях, но она не должна быть вашим единственным источником. Об уязвимостях сообщают в самых разных местах, и им может потребоваться некоторое время, чтобы найти путь к NVD.

3. Данные лицензии

Безопасность заняла центральное место в области открытого исходного кода, поскольку серьезные нарушения, такие как Apache Struts, часто появляются на первых полосах газет. Но лицензионный риск в открытом исходном коде может быть столь же дорогостоящим, если не управляется должным образом. Поиск инструмента, который сочетает в себе обширный охват лицензий с открытым исходным кодом, а также комплексные методы обнаружения, помогает значительно снизить этот риск.А предварительная реализация надлежащих политик увеличивает скорость утверждения и использования новых компонентов с открытым исходным кодом, потому что команды могут устанавливать политику, а все остальное делать инструменту.

4. Интеграции

Чтобы команды работали быстро и эффективно, лучше всего иметь инструмент, который без проблем работает с инструментами, которые команды уже используют. Обеспечение интеграции инструмента SCA на протяжении всего жизненного цикла разработки программного обеспечения (SDLC) является ключом к внедрению. И не останавливайтесь только на инструментах CI / CD.Интеграция инструмента SCA в IDE ранее помогает разработчикам быстрее делать осознанный выбор в отношении использования открытого исходного кода, а отправка проблем непосредственно в средство отслеживания проблем, которое они уже используют, ускоряет исправление. Сочетание этих действий может иметь большое влияние на скорость и эффективность — меньше проблем попадает в кодовую базу, а те, которые действительно относятся к инструментам, с которыми разработчики уже знакомы. Наконец, помимо интеграции в различные точки SDLC, поиск инструмента, который может удовлетворить широкий набор требований к инструменту тестирования безопасности приложений (AST), может обеспечить еще более тесную интеграцию для групп разработчиков.

С этой целью в «Технологии анализа состава программного обеспечения» Gartner предлагаются конкретные рекомендации по добавлению инструментов SCA в существующую программу AST: «Организации, оценивающие инструменты SCA, обычно должны сначала рассмотреть инструменты, предлагаемые их существующим поставщиком инструментов тестирования. Как уже отмечалось, сочетание [статического тестирования безопасности приложений (SAST)] и SCA может помочь обеспечить более точные результаты ».

По мнению Gartner, обращение к одному поставщику для решения нескольких задач AST ​​дает преимущества.Вы не только получаете преимущества более простого администрирования и обслуживания и меньшего количества поставщиков, которыми нужно управлять, но часто инструменты могут поставляться с более жесткими точками интеграции и более простой установкой, чем при использовании многоточечных решений.

Сочетание SAST и SCA дает дополнительные преимущества

Важно учитывать, особенно когда вы думаете о добавлении SAST и SCA к вашему набору тестирования, дополнительное преимущество, которое вы получаете от объединения результатов этих двух инструментов. Synopsys предлагает два конкретных способа выполнения этой конвергенции:

• Code Sight ™: Подключаемый модуль Code Sight IDE работает в контексте IDE разработчика, анализируя зависимости и отмечая проблемы безопасности как код разработчика.Кроме того, помимо интеграции с Black Duck® для получения результатов SCA, Code Sight также работает с нашим ведущим в отрасли инструментом SAST, Coverity®, для одновременного отображения проблем SAST и SCA прямо в среде IDE.
• Анализ воздействия уязвимости: Black Duck анализирует уязвимости, чтобы определить, присутствует ли уязвимость в вашем пути вызова, предоставляя дополнительную точку данных, которую следует учитывать при определении приоритетов усилий по исправлению. Эта точка данных в сочетании с нашими расширенными данными Black Duck Security Advisories позволяет командам быстро определять приоритеты, сортировать и устранять критические уязвимости в первую очередь.

В дополнение к нашим инструментам Coverity SAST и Black Duck SCA, Synopsys также предлагает инструменты для интерактивного тестирования безопасности приложений (IAST) и фаззинга. А учитывая быстрое внедрение DevOps и DevSecOps, организации могут искать рекомендации экспертов о том, как интегрировать эти методы в свой жизненный цикл разработки. Сервисная группа Synopsys предлагает отчет Building Security in Maturity Model (BSIMM), который оценивает вашу текущую программу безопасности, сравнивает ее с вашими коллегами и выделяет области, на которых следует сосредоточиться в первую очередь, чтобы продвинуть вашу организацию вперед.План действий по зрелости (MAP) определяет лучший путь для реализации вашей стратегии безопасности.

Gartner разъясняет в своем «Руководстве по анализу состава программного обеспечения», что внедрение инструмента SCA является жизненно важной частью безопасности приложений: «Множественные факторы риска и взрывной рост использования программного обеспечения с открытым исходным кодом делают анализ состава программного обеспечения важным инструментом безопасности приложений. . » Решение о том, какой подход выбрать, в конечном итоге будет зависеть от целей и приоритетов, которые ставит каждая организация.Но, учитывая тенденции в области безопасности приложений — взрывной рост открытых исходных кодов, быстрое внедрение DevOps и необходимость сдвинуть безопасность как можно дальше влево для достижения оптимальных результатов — выбор поставщика AST, такого как Synopsys, может помочь оценить ваше текущее состояние, рекомендовать дальнейший путь и сотрудничать с вами для достижения не только ваших целей SCA, но и вашей комплексной стратегии AppSec, которая может обеспечить несравненные преимущества.

Нанесение на карту градиентов состава сообщества с вменением ближайшего соседа: расширение данных участка для анализа ландшафта

U.S. Forest Service
Уход за землей и обслуживание людей

Министерство сельского хозяйства США

1. Нанесение на карту градиентов состава сообщества с вменением ближайшего соседа: расширение данных участка для анализа ландшафта

   Автор (ы): Джанет Л. Оманн; Мэтью Дж. Грегори; Эмили Б. Хендерсон; Хизер М. Робертс
   Дата: 2011
   Источник: Journal of Vegetation Science.doi: 10.1111 / j.1654-1103.2010.01244.x: 17 p
   Серия публикаций: Scientific Journal (JRNL)
   Station: Pacific Northwest Research Station
   PDF: Скачать публикацию (1,38 MB)
   
   Описание Вопрос: Как можно использовать условное исчисление ближайшего соседа (NN) для разработки карт множественных видов и растительных сообществ? Местоположение: Западный и Центральный Орегон, США, но методы применимы везде. Методы: Мы демонстрируем вменение NN путем картирования сообществ древесных растений на> 100 000 км ² разнообразных лесов и редколесий.Численность видов примерно на 25 000 участков была связана с пространственными предикторами (растрами), описывающими климат, топографию, почву и географическое положение с использованием ограниченной ординации (CCA). Каждому пикселю карты вменялись данные о видах с ближайшего участка в многомерном пространстве CCA. Карты нескольких отдельных видов и типов сообществ были построены на основе единой условной поверхности. Мы вычислили различные диагностические методы, чтобы охарактеризовать различные качества условно рассчитанных (нанесенных на карту) данных сообщества.Результаты: Градиенты состава сообщества были сильно связаны с климатом и высотой, и в меньшей степени с топографией и почвой. Точность модели вменения для наличия / отсутствия 150 видов широко варьировалась (каппа от 0,00 до 0,80). Частота ошибок из-за пропусков была выше, чем комиссионные из-за низкой распространенности видов, а ареальная представленность видов была лишь слегка завышена. Карта из 78 типов сообществ была правильной на 41% и нечетко правильной на 78%. Ошибки упущения и совершения были сбалансированы, а пространственное представление как редких, так и многочисленных сообществ было точным.Точность карты для некоторых видов может быть ниже, чем при использовании других методов, но ареальное представление видов и сообществ на больших ландшафтах сохраняется. Поскольку условно рассчитанные поверхности растительности разрабатываются для всех видов одновременно, единицы карты содержат наборы видов, которые, как известно, одновременно встречаются в природе. Карты отдельных видов и образованных на их основе типов сообществ будут внутренне согласованными в местах расположения карт. Выводы: вменение NN — полезный подход к моделированию, когда необходимы карты нескольких видов и растительных сообществ, например, при планировании управления природными ресурсами и их сохранении или в моделях, которые прогнозируют изменение ландшафта при альтернативных сценариях возмущения или климата.Необходимы дополнительные исследования для оценки других методов ординации для вменения NN растительных сообществ.
   Примечания к публикации
   • Посетите страницу запроса публикации PNW, чтобы запросить печатную копию этой публикации.
   • Мы рекомендуем вам также распечатать эту страницу и прикрепить ее к распечатке статьи, чтобы сохранить полную информацию о цитировании.
   • Эта статья была написана и подготовлена ​​служащими правительства США в официальное время и поэтому находится в открытом доступе.
   Citation Ohmann, Janet L .; Грегори, Мэтью Дж .; Хендерсон, Эмили Б.; Робертс, Хизер М. 2011. Отображение градиентов состава сообщества с вменением ближайшего соседа: расширение данных участка для анализа ландшафта. Журнал науки о растительности. DOI: 10.1111 / j.1654-1103.2010.01244.x: 17 стр.
   Ключевые слова картографирование растительности, ограниченная ординация, градиентный анализ, градиент ближайшего соседа, анализ ландшафтного сценария, Орегон, моделирование распределения видов, лесные сообщества
   Связанный поиск

   ---

   XML: Просмотр XML

Показать больше

Показать меньше

https: // www.fs.usda.gov/treesearch/pubs/39638

Просматривайте пользователей по общим свойствам — Amplitude

Эта статья поможет вам: Понимание различий между диаграммой состава пользователя и диаграммами амплитуды других типов Построить анализ состава пользователей Интерпретируйте результаты вашего анализа

Диаграмма «Состав пользователей» показывает разбивку активных пользователей на основе одного свойства пользователя.Это сгруппированное представление дает представление о том, кто ваши пользователи и какими свойствами они обладают.

Прежде чем начать

Прежде всего, события не будут отображаться ни на каких диаграммах амплитуды до тех пор, пока инструменты не будут завершены, поэтому убедитесь, что вы это сделали. Вы обязательно захотите прочитать нашу статью о построении диаграмм в Amplitude, так как именно здесь вы узнаете основы пользовательского интерфейса Amplitude. Вам также следует ознакомиться с нашим полезным списком определений Amplitude и убедиться, что вы понимаете разницу между свойствами пользователя и свойствами события.

Настройка анализа состава пользователей

Большинство диаграмм Amplitude полагаются на модуль событий для построения анализа. Диаграмма состава пользователей не является анализом, управляемым событиями, и поэтому в ней нет модуля событий, поэтому она работает немного иначе.

Вместо событий анализ состава пользователей опирается на свойств пользователя . Выберите свойство пользователя, которое вас интересует, определите свои пользовательские сегменты, и диаграмма состава пользователей отобразит разбивку значений этого свойства по указанным вами пользовательским сегментам.

В приведенном выше примере мы смотрим на сравнение пользователей вашего продукта в США и Германии с разбивкой по самому последнему значению количества сообществ, к которым они присоединились.

Чтобы построить собственный анализ состава пользователей, выполните следующие действия:

1. В модуле композиции (где обычно находится модуль событий) выберите интересующее вас свойство пользователя.
2. В модуле сегментации определите пользовательский сегмент, который вы хотите включить в этот анализ.Вы можете импортировать ранее сохраненный сегмент, щелкнув Сохраненные сегменты и выбрав нужный из списка. В противном случае Amplitude исходит из предположения, что ваш анализ будет нацелен на всех пользователей.
   
3. Если вы не хотите импортировать ранее сохраненный пользовательский сегмент, вы можете начать создавать свой собственный, добавляя свойства. Для этого нажмите +, где , выберите свойство, которое вы хотите включить, и укажите значение свойства, которое вас интересует.
4. Вы можете еще больше сузить фокус, указав Amplitude, что вы хотите включать только пользователей, которые уже выполнили определенные действия.Для этого нажмите + выполнить , затем выберите интересующее вас мероприятие.
5. При желании добавьте еще один сегмент пользователя, нажав + Добавить сегмент и повторив шаги 3 и 4.
6. Используйте средство выбора даты, чтобы установить период времени для анализа.
   
7. В модуле метрик укажите для свойства пользователя значения , которые вам больше всего интересны:

• • Самое недавнее значение будет учитывать только последних значений этого свойства пользователями. Это значение будет взято из последнего активного события пользователя. Например, пользователи, содержащиеся в приведенной ниже корзине San Francisco , — это те пользователи, которые в последний раз использовали это значение для свойства пользователя «[Amplitude] City», когда они выполняли свое последнее активное событие:
    
    Пользователи могут появляться только в один ведро, когда выбрано самое последнее значение.
  • Все значения будет включать каждое значение, которое ваши активные пользователи имели для рассматриваемого свойства в течение периода времени вашего анализа.Помните, что диаграмма состава пользователей включает только активных пользователей, поэтому значения свойств пользователей, привязанные к неактивным событиям, не будут возвращены. Например, на приведенной выше диаграмме любые пользователи, которые запускали инструментальное событие Amplitude из Сан-Франциско и Нью-Йорка за последние 30 дней, будут включены в обоих сегментов .
  • Значения перекрестных свойств покажет наборы свойств, которые были у активных пользователей в выбранном временном диапазоне. Эти сегменты являются взаимоисключающими ; пользователи могут попасть только в одну корзину.Таблица ниже показывает, что большинство пользователей используют наш продукт только на одной платформе:

Во всех случаях Amplitude будет выделять 13 верхних значений для вашего пользовательского свойства; любые другие значения будут сгруппированы в сегменте Другое . Значение в центре диаграммы — это значение суммы столбца в таблице данных разбивки; он включает только тех пользователей, которые входят в 100 самых популярных групп значений свойств пользователей по количеству пользователей.

Вы также можете просмотреть свои результаты в виде гистограммы:

И, конечно же, вы всегда можете проверить состав ваших групп пользователей с помощью микроскопа.

Таблица данных поломки

Под диаграммой находится таблица данных о составе. В этой таблице перечислены 100 самых популярных значений свойств пользователей с наибольшим количеством пользователей. Сумма в столбце Поле в нижней части таблицы совпадает с суммой в центре диаграммы.

Вы также можете экспортировать таблицу как файл .CSV, нажав Экспорт CSV . Файл .CSV имеет ограничение в 10 000 строк; это означает, что с помощью CSV можно получить 10 000 самых популярных значений свойств пользователей по количеству пользователей.

Границы | Анализ локусов и генов-кандидатов жирных кислот в мышцах свиней, выявленный в результате анализа ассоциаций нескольких популяций

Введение

Состав жирных кислот влияет на пищевую ценность и вкусовые качества мяса (Wood et al., 2004). Преобладающими насыщенными жирными кислотами (НЖК) в свинине являются C14: 0, C16: 0 и C18: 0, которые вместе составляют около 38% от общего количества жирных кислот. С точки зрения качества питания, замена пищевых насыщенных жирных кислот (НЖК) мононенасыщенными жирными кислотами (МНЖК) и полиненасыщенными жирными кислотами (ПНЖК) полезна для здоровья человека за счет снижения холестерина липопротеинов низкой плотности (FAO, 2010; Sacks et al., 2017), которые являются факторами риска сердечно-сосудистых заболеваний (Katan et al., 1994). Более того, с точки зрения вкусовых качеств мяса, насыщенные жирные кислоты связаны с плотностью мясного жира, в то время как содержание мононенасыщенных жирных кислот, в основном C18: 1n-9 и C16: 1n-7, положительно коррелирует с общей приемлемостью мяса (Cameron и др., 2000). Следовательно, разумной целью улучшения качества жира в свинине является снижение содержания C14: 0 и C16: 0 и одновременное повышение процентного содержания мононенасыщенных жирных кислот, которые позволят получить свинину с лучшими питательными и вкусовыми качествами.

Полногеномные исследования ассоциации (GWAS), основанные на массивах SNP, успешно идентифицировали многочисленные области генома, связанные с характеристиками состава жирных кислот в различных популяциях свиней (Ramayo-Caldas et al., 2012; Yang et al., 2013; Ros-Freixedes et al., 2016; Zhang et al., 2016; Zhang et al., 2017). Из-за низкой плотности чипов SNP свиньи и неравновесия по сцеплению на больших расстояниях между маркерами, большинство идентифицированных локусов имеют большие доверительные интервалы, что требует дальнейших исследований точного картирования для точного определения причинных вариантов.Увеличение плотности маркеров и комбинированный анализ нескольких популяций потенциально может обеспечить гораздо более высокое разрешение картирования для локусов, связанных с признаками (Pausch et al., 2017; Bouwman et al., 2018). Секвенирование тысяч людей может быть дорогостоящим, экономически эффективным подходом к увеличению плотности маркеров является вменение генотипа из эталонной популяции с помощью полногеномных последовательностей (Druet et al., 2014).

В этом исследовании, ссылаясь на последовательности генома из панели из 396 особей, мы приписали 34 миллиона SNP 2446 свиньям из шести популяций свиней, которые ранее были генотипированы с помощью 60 K или 1.4 миллиона чипов SNP и провели полногеномную ассоциацию и метаанализ по 38 признакам состава жирных кислот. Анализы помогли идентифицировать новые локусы и повысили значимость ассоциации локусов, обнаруженных с помощью SNP чипов. Мы дополнительно исследовали общие и специфические ассоциативные сигнатуры в локусах гена SCD и FASN , соответственно, с помощью гаплотипического эффекта и анализа филогенетического дерева. Наконец, мы выполнили функциональную аннотацию SNP отведений с помощью инструмента Ensembl Variant Effect Predictor (VEP) (McLaren et al., 2010), и на основе данных пиков ChIP-seq триметилирования по лизину 4 гистона 3 (h4K4me3) и ацетилирования по лизину 27 гистона 3 (h4K27ac) из 3 образцов печени свиньи (Villar et al., 2015). Кроме того, мы исследовали функциональные белок-белковые взаимодействия (PPI), кодируемые генами-кандидатами, используя базу данных STRING Genomics 10.5 сети PPI (Szklarczyk et al., 2017). Эти анализы предоставили полезную информацию о генетической архитектуре и биологическом пути, лежащем в основе изменений в составе жирных кислот в мышцах свиней.

Материалы и методы

Заявление об этике

Все эксперименты с участием животных проводились в соответствии с утвержденными руководящими принципами Министерства сельского хозяйства и сельских районов Китая. Комитет по этике Сельскохозяйственного университета Цзянси одобрил эксперименты на животных в этом исследовании.

Животные и фенотипы

В этом исследовании были исследованы шесть популяций свиней, в том числе белый дюрок × эруалиан F ₂ , трехсторонний кросс Сутай, дюрок-ландрас-йоркшир (DLY), свиньи лайву, эрхуалиан и бамаксианг.Подробная информация о шести популяциях была описана (Yang et al., 2013; Liu et al., 2015; Xiong et al., 2015; Zhang et al., 2016; Zhang et al., 2017). Вкратце, гибрид F ₂ был получен путем скрещивания двух белых хряков дюрок и 17 свиноматок породы эрхуалиан с получением F ₁ голов, девять свиноматок F ₁ и 59 свиноматок F _{1 были скрещены с получением 976 F 2 самцов и 945 самок 2 самок в шести партиях. Свинья Сутай — китайская синтетическая порода, выведенная путем скрещивания хряков дюрок и свиноматок тайху, и отбиралась более 18 поколений по плодовитости и росту.Свиньи эрхуалиан, лайу и бамаксианг — это местные породы Китая. Эруалян хорошо известен своей плодовитостью. Лайу славится высоким содержанием внутримышечного жира (в среднем 9 ~ 12%). Бамаксианг имеет черты двухцветного окраса черного окраса и небольшого размера тела. В общей сложности 385 свиней эруалян и 390 свиней лайу в возрасте около 90 дней были приобретены в городе Чанчжоу в провинции Цзянсу и городе Лайу в провинции Шаньдун, соответственно. Свиньи породы Бамаксианг были приобретены в округе Бама в провинции Гуанси в возрасте около 60 дней.В общей сложности 698 свиней DLY в возрасте 180 ± 3 дня были куплены на коммерческой свиноферме в городе Сюшуй провинции Цзянси. Хряков DLY кастрировали в возрасте около 25 дней, и всех свиней DLY кормили кукурузо-соевой диетой, содержащей 16% сырого протеина, 3132 перевариваемой энергии и 0,85% лизина. В популяциях F 2 , Sutai, Erhualian, Laiwu и Bamaxiang все поросята были отлучены от груди на 46 день, самцов кастрировали на 90 день. % сырого протеина, усвояемая энергия 3100 кДж и 0.78% лизина при стандартном контроле. Свиньи F 2 и Sutai в возрасте 240 ± 5 дней, свиньи DLY в возрасте 180 ± 5 дней и свиньи Erhualian, Laiwu и Bamaxiang в возрасте 300 ± 5 дней были забиты на коммерческой бойне.}

Составы жирных кислот в мышцах longissimus dorsi измеряли у 591 F ₂ , 296 Sutai, 608 DLY, 305 Laiwu, 331 Erhualian и 315 Bamaxiang свиней согласно методам, описанным ранее (Folch et al., 1957). Мы также рассчитали соотношения различных пар жирных кислот, которые отражают активность соответствующих жирных кислот элонгазы и десатуразы, используя уравнения, описанные ранее (Ulbricht and Southgate, 1991; Pamplona et al., 1998). Всего для последующего анализа было получено 38 характеристик состава жирных кислот (дополнительная таблица 1).

Генотипы

Геномная ДНК животных была извлечена из биопсии уха с использованием классического фенол / хлороформного метода. Всего 1020 особей F ₂ и 524 Sutai были генотипированы с использованием 62 163 SNP с использованием PorcineSNP60 v1 BeadChip, 610 DLY, 331 Erhualian и 319 свиней Laiwu были генотипированы на 61 565 SNP с использованием PorcineSNP60 v2 BeadChip, 2009), et al. и 307 свиней породы эрхуалиан и 318 свиней бамаксианг были генотипированы на 1 348 804 SNP с 1.4-мегабайтный чип Affymetrix Axiom SNP. В каждой популяции индивидов с частотой вызовов генотипа выше 90%, SNP с частотой вызовов более 90% и частотой минорных аллелей (MAF) выше 5% оставляли для дальнейшего анализа. Все процедуры контроля качества выполнялись с использованием программы PLINK (Purcell et al., 2007).

Ряд из 396 секвенированных особей использовался в качестве эталонной популяции для вменения генотипа. 396 свиней включают 221 свинью 20 местных пород / популяций Китая, 17 азиатских кабанов, 140 коммерческих свиней из разных стран, большинство из которых составляют свиньи дюрок, крупная белая, ландрас и пьетрен, и 18 европейских кабанов (дополнительная таблица 2).Большая часть секвенирования была проведена платформами Illumina HiSeq или Xten с использованием библиотек парных концов 100–150 пар оснований. Средняя глубина данных последовательности составляет 20,8 ×, варьируется от 4,2 × до 45,5 ×. Данные о последовательностях 232 из 396 человек были получены нашей лабораторией, остальные были загружены из общественного достояния (Groenen et al., 2012; Li et al., 2013; Moon et al., 2015). Среди 396 свиней две свиньи белого дюрока и 17 свиней эруалиан являются основателями популяции белого дюрок × эруалиан F ₂ , а 10 свиней мейшан, 12 бамаксианг, 15 лайву, 32 дюрок, 24 ландрас и 71 крупная белая свинья имеют аналогичные или одинакового происхождения с представителями шести популяций, исследованных в этом исследовании.

Для большинства секвенированных лиц были удалены необработанные считывания последовательностей, которые содержат> 50% пар оснований с показателем качества основания <20 или имеют> 10% пар оснований без вызовов (Ns). Чистые считывания каждого индивида сравнивали со сборкой эталонного генома Sus scrofa 10.2 с использованием BWA (Li and Durbin, 2009). Отображенные чтения были отсортированы с помощью SAMtools (Li et al., 2009) и обработаны с помощью перестройки Indel и маркировки дубликатов в Picard (http: // broadinstitute.github.io/picard/). Затем файлы GVCF были сгенерированы из каждого файла BAM с использованием Haplotypecaller в GATK путем фильтрации считываний BadCigar и BadMate и объединены с использованием CombineGVCFs в GATK. SNP были вызваны из объединенных файлов GVCF с использованием функции GenotypeGVCFs в GATK с параметрами stand_call_conf 30.0 и stand_emit_conf 30.0 и отфильтрованы с использованием VariantFiltration с параметром QD <2.0 || FS> 60.0 || MQ <40,0 || HaplotypeScore> 13.0 || MappingQualityRankSum <-12,5 || ReadPosRankSum <-8.0 в соответствии с рекомендациями GATK (McKenna et al., 2010). Наконец, было вызвано в общей сложности 34 миллиона SNP. Гаплотипы 396 контрольных животных были сконструированы с использованием Beagle версии 4.0 (Browning and Browning, 2007).

Импутация генотипа

SNP чипа размером 60 K и 1,4 M, которые имеют обратную цепь по сравнению с SNP для секвенирования генома, были перевернуты с помощью программы PLINK (Purcell et al., 2007). Затем 34 миллиона SNP у 396 секвенированных особей были приписаны 2446 свиньям, которые были генотипированы по 60 K или 1,4 миллиона SNP с использованием Beagle v4. После контроля качества 14 009 920, 13 686 661, 12 655 741, 13 176 546, 18 282 745 и 18 824 020 SNP с MAF> 0,05 в 591 F ₂ , 296 Sutai, 608 DLY, 305 Laiwu, 331 Erhualian и 315 Bamaxiang, соответственно, были оставлены для последующего анализа, соответственно. . Точность вмененных SNP оценивалась по значениям Beagle R ² (Browning and Browning, 2007).

Общегеномные исследования ассоциации и метаанализ

Ассоциативные тесты проводились в каждой популяции с использованием следующей модели, реализованной в программе GEMMA (Zhou and Stephens, 2012), та же модель также использовалась для оценки геномной наследственности на основе Данные SNP:

, где y — вектор остаточных фенотипических значений с поправкой на пол и партию убоя как фиксированные эффекты; x — вектор заболеваемости генотипов маркера, в котором три генотипа локуса AA, AB и BB были закодированы как 0, 1 и 2, соответственно, где B — минорный аллель.β — аддитивный аллельный эффект маркера; Z — матрица идентичности, u — вектор случайных полигенных эффектов, которые, как предполагается, следуют за MVN ( 0 , G σa2), где G представляет матрицу геномных отношений, рассчитанную на основе полногеномных маркеров SNP и σa2 — аддитивная генетическая дисперсия; и e — вектор случайных остатков, e ∼ MVN (0, I σe2), где I — единичная матрица, а σe2 — компонент остаточной дисперсии.SNP, которые достигли порогового значения P , равного 5 × 10 ^-8 , эмпирически считались значимыми (Pe’er et al., 2008; Johnson et al., 2010). Мы определили наиболее значимые SNP на каждой хромосоме, которые удовлетворяли пороговому значению P , равному 5 × 10 ^-8 , как ведущие SNP для данного признака. Фенотипическая вариация признака, объясняемая ведущим SNP, была рассчитана как (V _{уменьшить} -V _полный ) / V _{уменьшить} , где V _{уменьшить} и V _полный — это дисперсия остатков обычной линейной модели. без и с генотипами ведущих SNP в моделях.Эта оценка была очень похожа на те, которые были рассчитаны с использованием 2p (1-p) a ² / σ _p ² , где p — частота аллеля, а a — аддитивный аллельный эффект данного SNP, σ _p ² — фенотипическая дисперсия изучаемого признака. Мета-анализ результатов GWAS по шести популяциям был проведен с использованием метода z-значений, реализованного в программном обеспечении METAL (Willer et al., 2010), который рассчитал и протестировал статистику, которая объединила эффекты и стандартные ошибки каждого SNP на заданном признак в шести популяциях с учетом размера выборки и направленности эффектов генотипа в каждой популяции.Поскольку некоторые из 38 признаков, исследованных в этом исследовании, сильно коррелированы друг с другом, ведущие SNP для разных признаков могут располагаться близко и с высоким неравновесием по сцеплению, поэтому мы объединили ведущие SNP, которые находились в пределах 1 Мб в одной и той же геномной области, и использовали ведущий SNP с самой сильной ассоциацией (измеряется значением –log ₁₀ P ) в качестве сигнального SNP для этого региона (таблица 1).

Таблица 1 Резюме выбора SNP контрольных свиней по составу жирных кислот и признакам метаболизма в шести популяциях свиней по участкам хромосом.

Анализ гаплотипов

Для данного локуса мы сначала извлекли гаплотипы 41 SNP с центром на ведущем SNP (20 SNP на каждой стороне ведущего SNP), а затем оценили влияние гаплотипов на соответствующие признаки, используя смешанный модель, аналогичная реализованной в Nicod et al. (2016) (Nicod et al., 2016):

Где H — это матрица заболеваемости n × p для генотипа гаплотипов в популяциях, n — размер выборки и p — количество исследуемых гаплотипов. β — вектор гаплотипических эффектов с элементами p . y, Z, u и e такие же, как и в модели с одним SNP GWAS. Мы умножаем обе стороны смешанной модели на обратную матрицу W :

W − 1y = (W − 1H) β + W − 1 (Zu + e) ​​

Где W — квадратный корень из дисперсии и ковариационной матрицы. фенотипов V , который рассчитывается как σa2G + σe2I, σa2 и σe2 были оценены в EMMA (Kang et al., 2008). W вычисляется посредством разложения на собственные значения V в программе R.После преобразования гаплотипические эффекты можно оценить с помощью обычной линейной модели, реализованной в программе R. Мы сгенерировали филогенетическое дерево гаплотипов с помощью метода объединения соседей, реализованного в программе MEGA7 (Kumar et al., 2016).

Аннотации вариантов и функциональный анализ генов

Геномное положение всех SNP, используемых в GWAS, было аннотировано на основе сборки Sus scrofa 10.2 (Groenen et al., 2012). Для облегчения сравнения наших результатов с результатами, полученными на основе Sus scrofa 11.1, мы также преобразовали координаты SNP отведений в сборку Sus scrofa 11.1 с помощью Liftover (https://genome.ucsc.edu/cgi-bin/hgLiftOver) (дополнительная таблица 3). Все SNP отведений были аннотированы с использованием Variant effect predictor (VEP) (Ensembl release 89) (McLaren et al., 2010). Мы провели поиск функционально вероятных генов-кандидатов в областях в пределах 500 т.п.н. от ведущих SNP, используя веб-браузер UCSC (https://genome.ucsc.edu), который предоставляет гомологичные гены разных видов в соответствующей области QTL, идентифицированной в этом исследовании.Мы выбрали гены с функцией, относящейся к метаболизму жирных кислот или липидов, в качестве генов-кандидатов путем поиска в литературе. STRING v10.5 был использован для изучения генов-кандидатов в контексте сети белок-белковых взаимодействий (PPI) (Szklarczyk et al., 2017). В глобальной сети PPI сохранились только взаимодействия с высоким уровнем достоверности (оценка> 0,4). ClueGO в Cytoscape был использован для реализации генной онтологии (GO) и анализа обогащения пути KEGG (Bindea et al., 2009).Обогащенный анализ проводился с использованием правостороннего гипергеометрического теста с поправкой на множественное тестирование с использованием подхода Бенджамини-Хохберга. Для группировки расширенных терминов использовалась каппа-статистика (Bindea et al., 2009). Минимальная связность сети путей (оценка каппа) была установлена ​​на 0,4.

Результаты

Точность импутации генотипа

Средние значения SNP, использованных GWAS для Beagle R ² , составляют 0,754, 0,756, 0,741, 0,759, 0,892 и 0,893 для F ₂ , Sutai, DLY, Laiwu, Erhualian и Бамаксиангские свиньи соответственно.Beagle R ² положительно связан с частотой минорных аллелей SNP (дополнительный рисунок 1). Гораздо более высокая средняя точность вменения наблюдалась у свиней эрхуалиана и бамаксианг, потому что эти две популяции были генотипированы с помощью 1,4 миллиона SNP, которые имеют гораздо более высокую плотность маркеров по сравнению с генотипом 60 K SNP для остальных четырех популяций.

Полногеномные исследования ассоциации в каждой популяции

Мы оценили геномную наследуемость ( h _г ² ) для 38 признаков состава жирных кислот в каждой из шести популяций на основе полногеномных SNP, в среднем h _g ² оценка 38 признаков в шести популяциях равна 0.46. ​​В общей сложности 125 (54,8%) h _g ² оценки были между 0,3 и 0,6, а 48 (21,1%) были больше 0,6. Значения h _g ² , оцененные по вмененным SNP, сильно коррелировали с оценками по SNP чипов (Zhang et al., 2019) (дополнительный рисунок 2).

Мы провели полногеномные ассоциативные исследования для 38 признаков состава жирных кислот с использованием вмененных SNP в каждой из шести популяций. Мы определили наиболее значимые SNP на каждой хромосоме, которые удовлетворяли пороговому значению P 5 × 10 ^-8 как ведущие SNP или QTL для данного признака.Всего мы идентифицировали 131 SNP свинца на 15 хромосомах свиней (дополнительная таблица 3). Количество SNP отведений для каждого признака варьируется от 0 до 3 и положительно связано с h _g ² (P _{корреляция Спирмана} = 2 × 10 ^-12 ) (дополнительный рисунок 3). Всего 29 SNP отведений, расположенных на расстоянии более 1 Мб от SNP отведений, идентифицированных массивами SNP, были признаны новыми. Кроме того, у 27 SNP отведений есть по крайней мере 2 единицы увеличения (диапазон от 2 до 10) в силе ассоциации (–log ₁₀ P значение) по сравнению с теми, которые определены на основе 60K или 1.Микросхемы 4M были расценены как улучшенные (дополнительная таблица 3).

Далее мы покажем четыре примера, как GWAS, основанный на вмененных SNP, улучшил результаты, полученные на основе SNP чипов. В популяции F ₂ мы ранее идентифицировали значимые SNP отведений (7: 134683639, P = 6,80 × 10 ^-14 ) для C20: 1n-9 на SSC7, которые объясняют 21,0% SNP чипов на основе фенотипической дисперсии. . Напротив, ассоциация вмененного SNP (7: 134527363) дает значение P , равное 1.58 × 10 ^-23 и объясняют 31,2% фенотипической дисперсии для C20: 1n-9 (рис. 1A). Другой пример: верхний ассоциированный вариант (8: 126831850, P = 1,11 × 10 ^-9 ) для C18: 1n-9 / C16: 1n-7 на хромосоме 8, обнаруженный в 60K чипах, менее значим, чем найдите примерно 6 МБ от верхнего SNP (8: 120599982, P = 3,99 × 10 ^-12 ), обнаруженного при этом (рисунок 1B). Примечательно, что недавно идентифицированный SNP находится ближе к ELOVL6 , наиболее функционально правдоподобному гену в этой области, и тем SNP, идентифицированным в популяциях DLY и Erhualian (Zhang et al., 2016; Zhang et al., 2017) (дополнительная таблица 3). У свиней сутай 5: 73950290 для C20: 0 / C18: 0 ( P = 2,24 × 10 ^-11 ) на SSC5, идентифицированном здесь, показывает большую значимость ассоциации, чем один (5: 70181543, 3,20 × 10 ^-7. ), идентифицированный на основе данных SNP 60 K (рисунок 1C). У эруалианских свиней ведущий SNP (2: 84, P = 2,90 × 10 ^-22 ) для C20: 3n-6 / C18: 2n-6, идентифицированный в настоящее время, был более значимым, чем локусы (2: 8

6, Р = 3.48 × 10 ^-18 ), ранее обнаруженный с помощью 1,4 M чипа SNP (рис. 1D). Эти примеры демонстрируют, что GWAS, основанный на предполагаемых SNP последовательности генома, помог уточнить сигналы, выявленные с помощью данных SNP 60K (рисунок 2, таблица 1 и дополнительная таблица 3).

Рис. 1 Сравнение силы ассоциации между импутированными и чиповыми SNP. (A) область для C20: 1n-9 на SSC7 в популяции F ₂ ; (B) область для C18: 1n-9 / C16: 1n-7 на SSC8 в популяции F ₂ . (C) область для C20: 0 / C18: 0 на SSC5 в популяции Сутай. (D) область для C20: 3n-6 / C18: 2n-6 на SSC2 в эруальской популяции. Вмененные и чиповые SNP были обозначены синим и красным цветом соответственно. SNP отведений отмечены треугольниками.

Рис. 2 Комбинированный Манхэттенский график для GWAS по признакам состава жирных кислот в шести популяциях. Полногеномное представление всех ведущих SNP позволило идентифицировать GWAS одной популяции, которые были отмечены цветной точкой.Результаты из разных популяций были представлены разными цветами. Ось y показывает значения -log ₁₀ p- для ассоциации с соответствующими характеристиками состава жирных кислот, а ось x показывает геномное положение генетических вариантов. Гены-кандидаты обозначены разными цветами: синий для гена-кандидата, ранее идентифицированного, и красный для гена-кандидата, недавно обнаруженного в текущем исследовании.

Мета-анализ полногеномных ассоциативных исследований

Мы провели мета-анализ полногеномной статистики ассоциации из шести популяций.Всего было идентифицировано 154 SNP отведения ( P <5 × 10 ^-8 ) (дополнительная таблица 4). Среди них 49 обнаруживают> 1 Мб от ведущих SNP, идентифицированных в GWAS одной популяции. Более того, мы наблюдали 5 SNP отведений, показывающих более чем 5 единиц увеличения значений –log ₁₀ P по сравнению с SNP отведений, идентифицированных в одной популяции (рисунок 3, дополнительная таблица 3 и дополнительная таблица 4). К ним относятся 7: 134556509 для C20: 1n-9 / C18: 1n-9 рядом с геном ELOVL5 ( P = 9.62 × 10 ^-46 по сравнению с P = 1,07 × 10 ^-23 при 7: 134678195 у эруалианских свиней) (рис. 3A), 8: 119942096 для C18: 1n-9 / C16: 1n-7 около Ген ELOVL6 ( P = 8,51 × 10 ^-24 по сравнению с P = 1,90 × 10 ^-18 при 8: 119726275 у свиней DLY) (Рисунок 3B), 14: 121398370 для C18: 0 около Ген SCD ( P = 7,34 × 10 ^-50 по сравнению с P = 3,14 × 10 ^-33 при 14: 121454019 у свиней DLY) (Рисунок 3C) и 16: 43507850 для C20: 0 / C18 : 0 рядом с ген ELOVL7 ( P = 3.80 × 10 ^-95 по сравнению с P = 3,66 × 10 ^-62 при 16: 43497948 в свиньях DLY) (Рисунок 3D). Другие локусы, которые были усилены в метаанализах, расположены рядом с генами FADS2, ABCD2 и THRSP (дополнительная таблица 4).

Рисунок 3 Сравнение силы ассоциации между сигнальной популяцией GWAS и метаанализом. (A) Ассоциации SNP в области 4 Мб на SSC7 для C20: 1n-9 / C18: 1n-9 у эруалианских свиней (синие точки) по сравнению с метаанализом GWAS (красные точки). (B) Ассоциации SNP в области 8 Мб на SSC8 для C18: 1n-9 / C16: 1n-7 у свиней DLY (синие точки) по сравнению с метаанализом GWAS (красные точки). (C) Ассоциации SNP в области 8 Мб на SSC14 для C18: 0 у свиней DLY (синие точки) по сравнению с метаанализом GWAS (красные точки). (D) Ассоциации SNP в области 8 Мб на SSC16 для C20: 0 / C18: 0 у свиней DLY (синие точки) по сравнению с метаанализом GWAS (красные точки). Свинцовые SNP были отмечены серым ромбом.

Анализ гаплотипов общих и специфических локусов в популяции

Затем мы провели анализ гаплотипов двух областей QTL около генов SCD и FASN , исходя из следующих соображений: (1) обе области тесно связаны с множественными первичными насыщенными и мононенасыщенные жирные кислоты, которые тесно связаны с жирностью мяса; (2) оба гена SCD и FASN имеют прямое функциональное отношение к характеристикам состава жирных кислот.(3) Метаанализ в значительной степени повысил значимость ассоциации локусов SCD , но не локусов FASN , интересно исследовать эффекты и филогению гаплотипов в этих двух регионах в шести популяциях, чтобы дополнительно прояснить этот феномен.

Рядом с геном SCD мы идентифицировали ведущие SNP в области 1,83 Mb (между 120,10 и 121,93 Mb), которые оказали значительное влияние на несколько признаков жирных кислот (C16: 0, C16: 1n-7, C18: 0 и C18: 1n-9) в трех популяциях (F ₂ , Sutai и DLY).В этом регионе наиболее значимая ассоциация была обнаружена между 14: 121454019 и C18: 0 у свиней DLY (рис. 4A). Мы эмпирически исследовали эффекты 41 гаплотипа SNP с центром 14: 121454019 у свиней F ₂ , Sutai и DLY ( материалы и методы, ). На рисунке 4B показаны предполагаемые эффекты гаплотипов с частотой> 0,05 в каждой из трех популяций. Примечательно, что мы наблюдали, что Hap3 у свиней F ₂ ( P = 1,5 × 10 ^-4 ), Hap4 у свиней Sutai ( P = 7.6 × 10 ^-8 ) и Hap2, Hap3 и Hap4 у свиней DLY ( P = 2,2 × 10 ^-16 ) со значительным эффектом снижения содержания C18: 0 в трех популяциях, разделяющих сегмент размером 3,7 т.п.н. ( 121,450,788-121,454,457) (Рисунки 4B – D), этот анализ показал, что совпадение сигналов ассоциации в трех популяциях могло быть вызвано одной и той же причинной мутацией, расположенной в общем гаплотипе 3,7 т.п.н. или связанной с ним. Единственным исключением является Hap2 у свиней сутай, этот гаплотип также оказывает значительное влияние на снижение содержания C18: 0 ( P = 7.6 × 10 ^-8 ), но не содержат общий сегмент размером 3,7 кб.

Рисунок 4 Анализ гаплотипов основного QTL для C18: 0 на SSC14 в популяциях F ₂ , Sutai и DLY. (A) Важные региональные графики для SNP, который влияет на содержание C18: 0 в SSC14 в трех популяциях. (B) Распределение эффектов 41 SNP-гаплотипа с центром на ведущем SNP для C18: 0, идентифицированного у свиней DLY. Точки представляют собой оценки эффектов гаплотипа.Вертикальные полосы представляют собой стандартные ошибки оценок эффекта гаплотипа. Гаплотипы, которые разделяли сегмент 3,7 т.п.н. (121 450 788-121 454 457 пар оснований), были выделены оранжевым цветом. (C) Тепловая карта гаплотипов охватывает 20 КБ выше и ниже по течению (121 434 379-121 473 888 п.н.) от ведущего SNP 14: 121 454 019 у лиц, несущих Hap3 в F2, Hap4 у Sutai, Hap2, Hap3 и Hap4 у свиней DLY. (D) Подробная информация о паре оснований сегмента размером 7 т.п.н., который охватывает хромосомный сегмент 3,7 т.п.н. (121,450,788-121,454,457 п.н.), общий для F ₂ -Hap3, Sutai-Hap4, DLY-Hap2, DLY-Hap3 и Гаплотипы DLY-Hap4.

Рядом с геном FASN на SSC12 мы идентифицировали SNP свинца для C14: 0 как у свиней Erhualian, так и у свиней Laiwu (дополнительная таблица 3). Ведущий SNP (12: 1482194, P = 3,41 × 10 ^-22 ), идентифицированный у свиней Erhualian, расположенный на расстоянии 1,21 Mb от того, что идентифицирован у свиней Laiwu (12: 273754, P = 4,42 × 10 ^-11 ) (Дополнительная таблица 3). Представляет интерес выяснить, лежит ли одна и та же причинная мутация в основе ассоциативных сигнатур в двух популяциях.Мы оценили эффекты гаплотипов 41 SNP, сосредоточенных на SNP Erhualian отведения (12: 1482194), в шести популяциях. Интересно, что мы идентифицировали гаплотип (Hap4) у эрхуальских свиней, демонстрирующий значительный эффект ( P = 4,2 × 10 ^-19 ) на снижение содержания C14: 0 (рис. 5A). Филогенетический анализ 28 основных гаплотипов с частотой> 0,05 в соответствующей популяции позволил предположить, что Hap4 у эрхуальских свиней не был сгруппирован с какими-либо гаплотипами из других популяций (Рисунок 5B).Эти анализы подтвердили, что Hap4, который уникально обнаружен у свиней Erhualian, лежит в основе популяционно-специфичного сигнала GWAS у свиней Erhualian.

Рисунок 5 Анализ гаплотипа основного QTL для C14: 0 на SSC12 в популяциях EHL. (A) Распределение эффектов 41 SNP-гаплотипа с центром на ведущем SNP для C14: 0 (1,482,028–1483,956 п.н.), выявленных у эрхуальских свиней в шести популяциях. Точки представляют собой оценки эффектов гаплотипа. Вертикальные полосы представляют собой стандартные ошибки оценок эффекта гаплотипа.Гаплотип (Hap4) со значительным эффектом снижения C14: 0 у эруальских свиней был выделен оранжевым цветом. (B) Дерево соединения соседей для основных гаплотипов QTL на SSC12 в шести популяциях. Гаплотип (Erhualian-Hap4), характерный для свиней Erhualian, выделен красным цветом.

Аннотация и биологические исследования

SNP отведений, идентифицированные с помощью GWAS в каждой из популяций и метаанализа GWAS, соответствуют 205 уникальным SNP отведения. Среди этих SNP 63% локализуются в межгенной области, 26% — в интронах генов, 10% — в вышестоящих или нижних областях генов и 1% являются синонимичными вариантами (дополнительная таблица 3 и дополнительная таблица 4).Большинство этих SNP не являются вариантами кодирования. Поэтому мы дополнительно аннотировали эти SNP, используя опубликованные пики h4K27ac и h4K4me3 (Villar et al., 2015), и обнаружили, что в общей сложности 15% из 205 вариантов находятся в пределах пиков ChIP-seq (h4K27ac: 12,7% и h4K4me3: 2,5%). ), что в 2,5 раза больше по сравнению с исследуемыми полногеномными SNP (h4K27ac: 5,4% и h4K4me3: 0,75%) (дополнительная таблица 3 и дополнительная таблица 4).

Чтобы получить представление о биологических путях, лежащих в основе изменений в составе жирных кислот в мышцах у свиней, мы исследовали 32 гена-кандидата, которые были обнаружены в области 500 Кб от ведущих SNP с функцией, относящейся к метаболизму жирных кислот или липидов в контексте белкового сеть взаимодействия белков в базе данных STRING (Szklarczyk et al., 2017). Интересно, что 32 гена-кандидата оказались тесно связаны друг с другом, и было доказано, что несколько из недавно идентифицированных генов-кандидатов связаны с ранее идентифицированными генами, такими как FASN и SCD (рисунок 6A) (Zhang et al., 2016 ; Zhang et al., 2017). Анализ обогащения генной онтологии выделил метаболические процессы жирных кислот ( P = 2,2 × 10 ^-32 ), нейтрального липида ( P = 1,6 × 10 ^-17 ) и длинноцепочечных жирных кислот (7.6 × 10 ^-17 ) как наиболее обогащенные термины (фиг. 6В и дополнительная таблица 5), это ожидается, поскольку 32 гена были выбраны в соответствии с их функциональной значимостью для жирных кислот. Тем не менее, по-прежнему интересно наблюдать, что многие гены, связанные с катаболизмом или синтезом жирных кислот, расположены в непосредственной близости от локусов, связанных с жирными кислотами, что позволяет предположить, что катаболизм и синтез жирных кислот являются основными биологическими механизмами, которые влияют на состав жирных кислот в мышцах свиней. .

Рис. 6 Сеть белок-белковых взаимодействий и обогатительный анализ генной онтологии генов-кандидатов. (A) Сеть белок-белковых взаимодействий 32 наиболее вероятных генов-кандидатов ведущих SNP, обнаруженных с помощью GWAS и метаанализа в базе данных STRING v10.5. (B) Анализ обогащения генной онтологии генов-кандидатов. Чрезмерно представленные термины GO / path были сгруппированы на основе статистики каппа. Термины GO / path представлены в виде узлов, а размер узла представляет значимость обогащения, в то время как края представляют собой значительное сходство между категориями.

Обсуждение

Идентификация генетических вариантов композиций жирных кислот обеспечит рентабельный способ улучшения качества свиного жира. Ранее мы выполнили GWAS для признаков состава жирных кислот в шести популяциях на основе чипов SNP 60 K или 1,4 M (Yang et al., 2013; Zhang et al., 2016; Zhang et al., 2017). GWAS на основе вменения помог идентифицировать отсутствующий QTL для поясничного номера у свиней Сутай (Yan et al., 2017) и гематологических признаков у свиней F ₂ (Yan et al., 2018). В этом исследовании, выполнив GWAS и мета-анализ на основе предполагаемых вариантов последовательности генома, мы уточнили ранее идентифицированные локусы и выявили ряд новых локусов для признаков состава жирных кислот. Более того, вмененные данные позволили нам исследовать общий и специфический QTL в популяции с более высоким разрешением. В частности, интеграция сигналов GWAS, которые являются общими для популяций, например, в локусах SCD, помогла значительно уточнить QTL.

Точность генотипа вмененных SNP имеет решающее значение для успеха исследования ассоциации.Ранее та же стратегия вменения использовалась для выявления новых надежных локусов для числа позвонков и гематологических признаков в тех же популяциях, что и исследованные в текущем исследовании (Yan et al., 2017; Yan et al., 2018), что продемонстрировало, что вменение из относительно данные чипа SNP с низкой плотностью, например, от 60K генотипов SNP до SNP с полной последовательностью, обеспечивают ценную стратегию для повышения точности и мощности обнаружения GWAS (дополнительный рисунок 1). 78 из 285 отведений SNP, обнаруженных в этом исследовании, были рассмотрены как новые локусы.Хотя большинство недавно идентифицированных локусов показали умеренную значимость ассоциации, со значениями P в диапазоне от 1,10 × 10 ^-10 до 4,54 × 10 ^-8 , мы обнаружили ряд функциональных вероятных генов-кандидатов около этих локусов. Например, у свиней F ₂ , 2: 74664653 для C20: 3n-6 ( P = 1,89 × 10 ^-8 ), локализовано 133 Kb от гена PLIN5 , который играет решающую роль в регуляции внутриклеточные потоки жирных кислот и окисление (Laurens et al., 2016). У свиней Сутай 5: 73950290 для C20: 0 / C18: 0 ( P = 2,24 × 10 ^-11 ) на SSC5, расположенном примерно в 200 kb от гена ABCD2 (73,68 — 73,74Mb), который участвует в очень длинной цепи. катаболический процесс жирных кислот (van Roermund et al., 2011). Ведущий SNP (13: 242) для C20: 1n-9 / C20: 0 составлял приблизительно 240 Кб от ACAA1 (ацетил-КоА-ацилтрансфераза), этот ген кодирует фермент, важный для β-окисления жирных кислот в пероксисомах ( Zha et al., 2005). Локус для C18: 1n-9 / C16: 1n-7 на SSC7 в 27.3 Mb у свиней Laiwu находились рядом с APOM (27,48 Mb), функция которого связана с метаболизмом липидов и липопротеинов. Сообщалось, что ген APOM в значительной степени связан с особенностями отложения жира у свиней (Pan et al., 2010). У человека было показано, что подавление экспрессии APOM может быть индуцировано пальмитиновой кислотой (Luo et al., 2014). У свиней Erhualian ведущий SNP в 11,30 Mb для C20: 4n-6 / C20: 3n-6 близок к DGAT2 , гену, связанному с метаболизмом длинноцепочечных жирных кислот (Cases et al., 2001). У свиней породы Бамаксианг новый ведущий SNP для C20: 4n-6 / C20: 2n-6 на 138,71 Mb на SSC8 располагается в интроне гена SNCA . Предыдущие исследования на мышах продемонстрировали, что удаление SNCA снижает оборот C20: 4n-6 и увеличивает включение C22: 6n-6 в фосфолипиды мозга (Golovko et al., 2006; Golovko et al., 2007).

Более того, метаанализ выявил ряд новых генов-кандидатов, участвующих в метаболизме / транспорте жирных кислот или липидов. К ним относятся NAA40 (липидный метаболический процесс), SLC27A6 (транспорт длинноцепочечных жирных кислот), ANKRD23 (ядерный белок, участвующий в энергетическом метаболизме), ABCD3 (биогенез пероксисом, окисление дикарбоновых кислот), ACSF3 (процесс биосинтеза жирных кислот), ACOT7 (метаболический процесс ацил-КоА), ACAT1 (катализирует обратимое образование ацетоацетил-КоА), ABCG4 (гомеостаз клеточного холестерина), PRKAR2B (регулирует энергию баланса и ожирения), PCCA (альфа-субъединица гетеродимерного митохондриального фермента пропионил-CoA-карбоксилазы), ACAD9 (катализирует лимитирующую стадию бета-окисления жирного ацил-CoA), ABCG1 (транспорт фосфолипидов ), PTGIS (монооксигеназы, которые катализируют и синтез холестерина, стероидов и других липидов), AWAT1-AWAT2 (диацилглицерин ацилтрансфераза) (Suppleme Исходная таблица 4).

Кроме того, в дополнение к функционально вероятным генам-кандидатам мы также обнаружили несколько новых ведущих SNP, перекрывающихся с локусами, идентифицированными в других популяциях. Например, ведущий SNP для C14: 0 на 134,70 Мб на SSC4 близок к области (136,10–136,33 Мб на SSC4) для C16: 1n-7, что подтверждается скрещиванием иберийских × Ландрас F ₂ (Munoz et al., 2013). Ведущий SNP для C20: 3n-6 в 135,72 Mb на SSC6 рядом с геном LEPR близок к локусам для содержания SFA, PUFA и PUFA / SFA в мышцах longissmus у свиней породы дюрок (Ros-Freixedes et al., 2016). Ведущий SNP для C20: 1n-9 / C20: 0 при 24,93 Mb на SSC13 у свиней Sutai совпадает с областью 24,49-25,37 Mb для C16: 0 спины в популяции IBMAP (Munoz et al., 2013). Ведущий SNP для C20: 0 на 146,11 Mb на SSC15 у свиней Laiwu был близок к локусам на 145,53 Mb для C17: 0 в популяции свиней Duroc из нескольких поколений (van Son et al., 2017). Локусы размером 148,47 МБ на SSC9 и 57,71 МБ на SSC10, идентифицированные в текущем исследовании, перекрываются с 146–148 МБ на SSC9 для ПНЖК у свиней породы дюрок (Ros-Freixedes et al., 2016) и 55 — 56 Mb для C18: 2n-6 и PUFA на SSC10 у крупных белых свиней (Zappaterra et al., 2018) соответственно. Следовательно, есть основания полагать, что большинство вновь идентифицированных локусов не являются артефактами.

Мы наблюдали значимые ассоциации в SCD, ELOVL5, ELOVL6, ELOVL7 и THRSP во многих популяциях. Следовательно, у нас будет шанс использовать сигналы GWAS из нескольких популяций для уточнения соответствующих QTL в этих локусах. Мета-анализ крупного рогатого скота продемонстрировал возможности интеграции данных нескольких популяций для выявления небольшого числа возможных причинных вариантов (Bouwman et al., 2018). Соответственно, в этом исследовании метаанализ в значительной степени усилил ассоциативные сигналы в SCD , ELOVL5, ELOVL6 и ELOVL7 , наиболее значимые SNP, идентифицированные в метаанализах в этих локусах, являются потенциальными кандидатами для последующего функционального наблюдения. исследования.

Посредством анализа гаплотипов мы идентифицировали гаплотип размером 3,7 т.п.н. (121,450,788-121,454,457), общий для F ₂ , Sutai и DLY, демонстрирующий постоянный эффект уменьшения содержания C18: 0.Основываясь на данных чипа SNP из 660 тыс., Независимое исследование определило верхний SNP для содержания C18: 0 в спине на уровне 121 401 766 пар оснований на SSC14 (van Son et al., 2017), что составляет около 50 т.п.н. от области 3,7 т.п.н., идентифицированной в наше исследование. Обе области расположены примерно на 400 т.п.н. ниже гена SCD , поэтому мы предполагаем, что лежащая в основе мутация может влиять на экспрессию SCD через механизм удаленной регуляции и, следовательно, влиять на содержание C18: 0 в мышце longissimus .Требуются дальнейшие исследования для выявления основной причинной мутации.

Мы не обнаружили каких-либо миссенс-мутаций среди основных SNP, идентифицированных с помощью GWAS одной популяции или метаанализа, что позволяет предположить, что на вариации в составе жирных кислот у свиней в первую очередь влияют регуляторные варианты. Это дополнительно подтверждается обогащением SNP свинца пиками h4K27ac и h4K4me3, которые являются представителями активных промоторов и энхансеров (Villar et al., 2015).

Несмотря на то, что особенности состава жирных кислот изучались в течение десятилетий, основные молекулярные пути, которые влияют на состав жирных кислот мышцы longissimus , остаются неуловимыми.Функциональная аннотация и обогащение генов-кандидатов в идентифицированных локусах подтверждают, что пути генов, связанные с метаболизмом, а не с транспортом жирных кислот, будут первичным биологическим процессом, который влияет на состав жирных кислот в мышце longissmus .

Заключение

Мы провели мета-анализ GWAS и GWAS для 38 признаков состава жирных кислот у 2446 особей из шести различных популяций свиней на основе предполагаемых вариантов секвенирования генома. Анализ выявил 78 новых ассоциаций и уточнил ряд ранее идентифицированных локусов для признаков состава жирных кислот.Это исследование продемонстрировало, что вменение генотипа на основе данных секвенирования помогает повысить мощность и точность GWAS. Использование данных из нескольких популяций с различным генетическим фоном дает большие надежды для точного картирования QTL, который является общим для разных популяций. Доказательства наличия генов-кандидатов с функцией, непосредственно связанной с метаболизмом и транспортом жирных кислот вблизи соответствующего QTL, углубляют наше понимание биологического механизма, лежащего в основе характеристик состава жирных кислот свиней. Результаты, полученные в этом исследовании, предоставляют полезную информацию для программы разведения свиней с целью генетического улучшения профиля жирных кислот в свинине.

Заявление о доступности данных

Для этого исследования были проанализированы общедоступные данные. его можно найти по следующим ссылкам: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/sra/ERP001813/ https://www.ncbi.nlm.nih.gov/sra/SRA065461/ https: // www .ncbi.nlm.nih.gov / sra / SRP047260 / https://www.ncbi.nlm.nih.gov/sra/SRA096093/ https://www.ncbi.nlm.nih.gov/bioproject/PRJNA238851/ https : //dataview.ncbi.nlm.nih.gov/object/PRJNA550237? Reviewer = muq35cdjpr0nv5ivec9r1civl2 https://doi.org/10.5061/dryad.7kn7r

Заявление об этике

Эксперименты по этике Сельскохозяйственного университета Цзянси одобрили в этом исследовании.

Вклад авторов

LH задумал и разработал эксперимент и отредактировал рукопись. BY руководил экспериментом и анализом данных, а также написал часть рукописи. JZ измерил фенотип, проанализировал данные и написал рукопись. YZ, HG, LC, JM, CC, HA и SX внесли свой вклад в экспериментальные материалы. Все авторы прочитали и одобрили окончательную рукопись.

Финансирование

Работа выполнена при финансовой поддержке Национального фонда естественных наук Китая (31572379 и 31230069).

Конфликт интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось в отсутствие каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Рецензент JM заявил о прошлом соавторстве с одним из авторов SX редактору обработки.

Дополнительные материалы

Дополнительные материалы к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fgene.2019.01067 / full # additional-material

Ссылки

Биндеа, Г., Млечник, Б., Хакл, Х., Чароентонг, П., Тосолини, М., Кириловский, А. и др. (2009). ClueGO: плагин cytoscape для расшифровки функционально сгруппированных онтологий генов и сетей аннотаций путей. Биоинформатика 25 (8), 1091–1093. doi: 10.1093 / биоинформатика / btp101

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Bouwman, A.C., Daetwyler, H.D., Чемберлен, A.J., Ponce, C.H., Sargolzaei, M., Schenkel, F. S., et al. (2018). Мета-анализ полногеномных ассоциативных исследований роста крупного рогатого скота позволяет выявить общие гены, которые регулируют размер тела у млекопитающих. Nat. Genet. 50 (3), 362–367. doi: 10.1038 / s41588-018-0056-5

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Браунинг, С. Р., Браунинг, Б. Л. (2007). Быстрая и точная фазировка гаплотипов и вывод отсутствующих данных для исследований ассоциации всего генома с использованием локализованной кластеризации гаплотипов. Am. J. Hum. Genet. 81 (5), 1084–1097. doi: 10.1086 / 521987

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Кэмерон, Н. Д., Энсер, М., Нут, Г. Р., Уиттингтон, Ф. М., Пенман, Дж. К., Фискен, А. С. и др. (2000). Взаимодействие генотипа с питанием, жирнокислотным составом внутримышечного жира и взаимосвязью со вкусом свинины. Meat Sci. 55 (2), 187–195. DOI: 10.1016 / S0309-1740 (99) 00142-4

PubMed Реферат | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Cases, S., Stone, S.J., Zhou, P., Yen, E., Tow, B., Lardizabal, K.D., et al. (2001). Клонирование DGAT2, второй диацилглицерин-ацилтрансферазы млекопитающих и родственных членов семейства. J. Biol. Chem. 276 (42), 38870–38876. doi: 10.1074 / jbc.M106219200

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Druet, T., Macleod, I.M., Hayes, B.J. (2014). К геномному предсказанию на основе данных последовательности всего генома: влияние дизайна секвенирования на вменение генотипа и точность прогнозов. Наследственность (Ред.) 112 (1), 39–47. doi: 10.1038 / hdy.2013.13

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

FAO (2010). Жиры и жирные кислоты в питании человека. Отчет экспертной консультации. FAO Food Nutr. Пап. 91, 1–166.

PubMed Аннотация | Google Scholar

Фолч, Дж., Лиз, М., Слоан Стэнли, Г. Х. (1957). Простой метод выделения и очистки общих липидов из тканей животных. J. Biol.Chem. 226 (1), 497–509.

PubMed Аннотация | Google Scholar

Головко М. Ю., Розенбергер Т. А., Фаэргеман Н. Дж., Феддерсен С., Коул Н. Б., Прибилл И. и др. (2006). Активность ацил-КоА-синтетазы связывает альфа-синуклеин дикого типа, но не мутантный, с метаболизмом арахидоната в головном мозге. Биохимия 45 (22), 6956–6966. doi: 10.1021 / bi0600289

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Головко М.Ю., Розенбергер Т.А., Феддерсен С., Фаэргеман, Н. Дж., Мерфи, Э. Дж. (2007). Удаление гена альфа-синуклеина увеличивает включение и обмен докозагексаеновой кислоты в фосфолипидах мозга. J. Neurochem. 101 (1), 201–211. doi: 10.1111 / j.1471-4159.2006.04357.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Groenen, M. A., Archibald, A. L., Uenishi, H., Tuggle, C. K., Takeuchi, Y., Rothschild, M. F., et al. (2012). Анализ генома свиней дает представление о демографии и эволюции свиней. Nature 491 (7424), 393–398. doi: 10.1038 / nature11622

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Johnson, R. C., Nelson, G. W., Troyer, J. L., Lautenberger, J. A., Kessing, B. D., Winkler, C. A., et al. (2010). Учет множественных сравнений в исследовании ассоциации всего генома (GWAS). BMC Genomics 11, 724. doi: 10.1186 / 1471-2164-11-724

PubMed Реферат | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Канг, Х. М., Зейтлен, Н.А., Уэйд, К. М., Кирби, А., Хекерман, Д., Дейли, М. Дж. И др. (2008). Эффективное управление популяционной структурой при картировании ассоциаций модельных организмов. Генетика 178 (3), 1709–1723. doi: 10.1534 / genetics.107.080101

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Катан, М. Б., Зок, П. Л., Менсинк, Р. П. (1994). Влияние жиров и жирных кислот на липиды крови человека: обзор. Am. J. Clin. Nutr. 60 (6 доп.), 1017s – 1022s. DOI: 10,1093 / ajcn / 60.6.1017S

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Кумар, С., Стечер, Г., Тамура, К. (2016). MEGA7: анализ молекулярной эволюционной генетики версии 7.0 для больших наборов данных. Мол. Биол. Evol. 33 (7), 1870–1874. doi: 10.1093 / molbev / msw054

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Laurens, C., Bourlier, V., Mairal, A., Louche, K., Badin, P.M., Mouisel, E., et al. (2016). Перилипин 5 регулирует окисление липидов в соответствии с метаболическими потребностями и защищает скелетные мышцы от липотоксичности. Sci. Rep. 6, 38310. doi: 10.1038 / srep38310

PubMed Реферат | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Li, H., Handsaker, B., Wysoker, A., Fennell, T., Ruan, J., Homer, N., et al. (2009). Формат выравнивания / карты последовательностей и SAMtools. Биоинформатика 25 (16), 2078–2079. doi: 10.1093 / биоинформатика / btp352

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Li, M., Tian, ​​S., Jin, L., Zhou, G., Li, Y., Zhang, Y., et al. (2013).Геномный анализ позволяет выявить различные модели отбора у домашних свиней и тибетских кабанов. Nat. Genet. 45 (12), 1431–1438. DOI: 10.1038 / ng.2811

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лю, X., Xiong, X., Yang, J., Zhou, L., Yang, B., Ai, H., et al. (2015). Полногеномный ассоциативный анализ признаков качества мяса у китайских свиней эруальской породы и коммерческой популяции западного дюрока (ландрас x йоркшир). Genet Sel. Evol. 47, 44.doi: 10.1186 / s12711-015-0120-x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Луо, Г., Ши, Ю., Чжан, Дж., Му, К., Цинь, Л., Чжэн, Л. и др. (2014). Пальмитиновая кислота подавляет экспрессию гена аполипопротеина М через путь PPARbeta / delta в клетках HepG2. Biochem. Биофиз. Res. Commun. 445 (1), 203–207. doi: 10.1016 / j.bbrc.2014.01.170

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

McKenna, A., Hanna, M., Banks, E., Сиваченко А., Цибульскис К., Керницкий А. и др. (2010). Набор инструментов для анализа генома: платформа mapReduce для анализа данных секвенирования ДНК следующего поколения. Genome Res. 20 (9), 1297–1303. doi: 10.1101 / gr.107524.110

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

McLaren, W., Pritchard, B., Rios, D., Chen, Y., Flicek, P., Cunningham, F. (2010). Получение последствий геномных вариантов с помощью Ensembl API и SNP Effect Predictor. Биоинформатика 26 (16), 2069–2070.doi: 10.1093 / биоинформатика / btq330

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Moon, S., Kim, T. H., Lee, K. T., Kwak, W., Lee, T., Lee, S. W., et al. (2015). Полногеномное сканирование для выявления признаков направленного отбора у домашних свиней. BMC Genomics 16, 130. doi: 10.1186 / s12864-015-1330-x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Munoz, M., Rodriguez, M.C., Alves, E., Folch, J.M., Ibanez-Escriche, N., Silio, L., и другие. (2013). Полногеномный анализ состава свиного шпика и внутримышечных жирных кислот жирных кислот с использованием данных генотипирования и экспрессии с высокой плотностью. BMC Genomics 14, 845. doi: 10.1186 / 1471-2164-14-845

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Nicod, J., Davies, R. W., Cai, N., Hassett, C., Goodstadt, L., Cosgrove, C., et al. (2016). Полногеномная ассоциация нескольких сложных признаков у беспородных мышей с помощью секвенирования со сверхнизким охватом. Nat.Genet. 48 (8), 912–918. DOI: 10.1038 / ng.3595

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Pamplona, ​​R., Portero-Otin, M., Riba, D., Ruiz, C., Prat, J., Bellmunt, M.J., et al. (1998). Индекс перекисного окисления митохондриальной мембраны обратно пропорционален максимальной продолжительности жизни у млекопитающих. J. Lipid Res. 39 (10), 1989–1994.

PubMed Аннотация | Google Scholar

Pan, G., Fu, Y., Zuo, B., Ren, Z., Xu, D., Lei, M., et al. (2010).Молекулярная характеристика, профиль экспрессии и анализ ассоциации с признаками отложения жира гена APOM свиньи. Мол. Биол. Реп. 37 (3), 1363–1371. doi: 10.1007 / s11033-009-9518-2

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Пауш, Х., Эммерлинг, Р., Гредлер-Гранд, Б., Фрис, Р., Дэтвайлер, Х. Д., Годдард, М. Э. (2017). Мета-анализ основанных на последовательностях ассоциативных исследований трех пород крупного рогатого скота выявил 25 QTL для процентного содержания жира и белка в молоке при разрешении нуклеотидов. BMC Genomics 18 (1), 853. doi: 10.1186 / s12864-017-4263-8

PubMed Реферат | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Пеер И., Еленский Р., Альтшулер Д., Дейли М. Дж. (2008). Оценка бремени множественного тестирования для полногеномных ассоциативных исследований почти всех распространенных вариантов. Genet. Эпидемиол. 32 (4), 381–385. doi: 10.1002 / gepi.20303

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Перселл, С., Нил, Б., Тодд-Браун, К., Thomas, L., Ferreira, M. A., Bender, D., et al. (2007). PLINK: набор инструментов для анализа ассоциации всего генома и популяционного анализа сцепления. Am. J. Hum. Genet. 81 (3), 559–575. doi: 10.1086 / 519795

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ramayo-Caldas, Y., Mercade, A., Castello, A., Yang, B., Rodriguez, C., Alves, E., et al. (2012). Полногеномное ассоциативное исследование состава внутримышечных жирных кислот у кросса иберийских х ландрасов. Дж.Anim. Sci. 90 (9), 2883–2893. doi: 10.2527 / jas.2011-4900

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Рамос, А. М., Кройманс, Р. П., Аффара, Н. А., Амарал, А. Дж., Арчибальд, А. Л., Бивер, Дж. Э. и др. (2009). Разработка анализа генотипирования SNP с высокой плотностью у свиней с использованием SNP, идентифицированных и охарактеризованных с помощью технологии секвенирования следующего поколения. PLoS One 4 (8), e6524. doi: 10.1371 / journal.pone.0006524

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ros-Freixedes, R., Gol, S., Pena, R.N., Tor, M., Ibanez-Escriche, N., Dekkers, J.C., et al. (2016). Полногеномное исследование ассоциации выделяет scd и lepr как два основных локуса, влияющих на внутримышечное содержание жира и состав жирных кислот у свиней дюрок. PLoS One 11 (3), e0152496. doi: 10.1371 / journal.pone.0152496

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Sacks, F. M., Lichtenstein, A. H., Wu, J. H. Y., Appel, L. J., Creager, M. A., Kris-Etherton, P. M., et al.(2017). Диетические жиры и сердечно-сосудистые заболевания: президентский совет Американской кардиологической ассоциации. Тираж 136 (3), e1 – e23. doi: 10.1161 / cir.0000000000000510

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Szklarczyk, D., Morris, J. H., Cook, H., Kuhn, M., Wyder, S., Simonovic, M., et al. (2017). База данных STRING в 2017 году: сети белок-белковых ассоциаций с контролируемым качеством, стали общедоступными. Nucleic Acids Res. 45 (D1), D362 – d368.doi: 10.1093 / nar / gkw937

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

van Roermund, C. W., Visser, W. F., Ijlst, L., Waterham, H.R., Wanders, R.J. (2011). Дифференциальная субстратная специфичность ABCD1 и ABCD2 человека при бета-окислении пероксисомальных жирных кислот. Biochim. Биофиз. Acta 1811 (3), 148–152. doi: 10.1016 / j.bbalip.2010.11.010

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

van Son, M., Enger, E.G., Grove, H., Ros-Freixedes, R., Kent, M. P., Lien, S., et al. (2017). Полногеномное ассоциативное исследование подтвердило наличие основного QTL для состава жирных кислот в спине на SSC14 у свиней породы дюрок. BMC Genomics 18 (1), 369. doi: 10.1186 / s12864-017-3752-0

PubMed Реферат | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Villar, D., Berthelot, C., Aldridge, S., Rayner, T. F., Lukk, M., Pignatelli, M., et al. (2015). Эволюция энхансеров у 20 видов млекопитающих. Ячейка 160 (3), 554–566. DOI: 10.1016 / j.cell.2015.01.006

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Виллер, К. Дж., Ли, Ю., Абекасис, Г. Р. (2010). МЕТАЛЛ: быстрый и эффективный мета-анализ сканирования ассоциаций в масштабе всего генома. Биоинформатика 26 (17), 2190–2191. doi: 10.1093 / биоинформатика / btq340

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Вуд, Дж. Д., Ричардсон, Р. И., Нуте, Г. Р., Фишер, А. В., Кампо, М. М., Касапиду, Э. и др. (2004). Влияние жирных кислот на качество мяса: обзор. Meat Sci. 66 (1), 21–32. DOI: 10.1016 / s0309-1740 (03) 00022-6

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Xiong, X., Liu, X., Zhou, L., Yang, J., Yang, B., Ma, H., et al. (2015). Полногеномный ассоциативный анализ выявляет генетические локусы и гены-кандидаты для определения качества мяса у китайских свиней Лайу. Мамм. Геном 26 (3-4), 181–190. doi: 10.1007 / s00335-015-9558-y

PubMed Реферат | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ян, Г., Guo, T., Xiao, S., Zhang, F., Xin, W., Huang, T., et al. (2018). Исследование ассоциации полногеномных последовательностей на основе вменения выявляет постоянные и новые локусы гематологических признаков в крупномасштабной ресурсной популяции свиней F2. Перед. Genet. 9, 401. doi: 10.3389 / fgene.2018.00401

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Yan, G., Qiao, R., Zhang, F., Xin, W., Xiao, S., Huang, T., et al. (2017). Основанное на вменении исследование ассоциации полногеномной последовательности заново открыло недостающий QTL для поясничного номера у свиней Сутай. Sci. Rep. 7 (1), 615. doi: 10.1038 / s41598-017-00729-0

PubMed Реферат | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ян, Б., Чжан, В., Чжан, З., Фань, Ю., Се, X., Ай, Х., и др. (2013). Полногеномный ассоциативный анализ состава жирных кислот в мышцах свиней и брюшной жировой ткани. PLoS One 8 (6), e65554. doi: 10.1371 / journal.pone.0065554

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Zappaterra, M., Ros-Freixedes, R., Эстани, Дж., Даволи, Р. (2018). Исследование ассоциации подчеркивает влияние области гена элонгазы 6 жирных кислот ELOVL на состав жирных кислот в спине у крупной белой породы свиней. Животное 12 (12), 2443–2452. doi: 10.1017 / s1751731118000484

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Zha, S., Ferdinandusse, S., Hicks, J. L., Denis, S., Dunn, T.A., Wanders, R.J., et al. (2005). Путь бета-окисления жирных кислот с разветвленной цепью пероксисом активируется при раке простаты. Простата 63 (4), 316–323. doi: 10.1002 / pros.20177

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Zhang, J., Zhang, Y., Gong, H., Cui, L., Huang, T., Ai, H., et al. (2017). Генетическое картирование с использованием уточненных локусов с использованием 1,4M массива SNP для признаков состава жирных кислот у свиней китайского эруала и бамаксианг. J. Anim. Порода. Genet. 134 (6), 472–483. doi: 10.1111 / jbg.12297

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Zhang, W., Zhang, J., Cui, L., Ma, J., Chen, C., Ai, H., et al. (2016). Генетическая архитектура состава жирных кислот в длинной мышце спины, выявленная в результате полногеномных ассоциативных исследований различных популяций свиней. Genet Sel. Evol. 48, 5. doi: 10.1186 / s12711-016-0184-2

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Zhang, Y., Zhang, J., Gong, H., Cui, L., Zhang, W., Ma, J., et al. (2019). Генетическая корреляция состава жирных кислот с характеристиками роста, туши, отложения жира и качества мяса на основе данных GWAS в шести популяциях свиней. Meat Sci. 150, 47–55. doi: 10.1016 / j.meatsci.2018.12.008

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Анализ на основе секвенирования бактериального и грибкового состава кефирных зерен и молока из различных источников

Abstract

Кефир — это напиток на основе ферментированного молока, которому приписывают ряд полезных для здоровья свойств. Микробы, ответственные за ферментацию молока для производства кефира, состоят из сложной ассоциации бактерий и дрожжей, связанных в полисахаридной матрице, известной как кефирное зерно.Последовательность этой микробной популяции и той, которая присутствует в полученном напитке, была предметом ряда предыдущих, почти исключительно основанных на культуре, исследований, которые выявили различия в зависимости от географического положения и условий культивирования. Однако исследования идентификации на основе культур ограничены в силу выявления только видов, способных расти на конкретной используемой среде, и, таким образом, независимые от культуры, молекулярные методы предлагают потенциал для более всестороннего анализа таких сообществ.Здесь мы описываем подробное исследование микробной популяции кефира, как бактериальной, так и грибковой, с использованием высокопроизводительного секвенирования для анализа 25 видов кефирного молока и связанных зерен, полученных из 8 географически разных регионов. Это первый случай, когда эта технология была использована для исследования грибкового компонента этих популяций или для выявления микробного состава такого большого количества кефирных зерен или молока. В результате было выявлено несколько родов и видов, ранее не идентифицированных в кефире.Наш анализ показывает, что в бактериальных популяциях кефира преобладают 2 типа: Firmicutes и Proteobacteria. Также было установлено, что в грибных популяциях кефира преобладают роды Kazachstania , Kluyveromyces и Naumovozyma , но существует также и вариабельная субдоминантная популяция.

Образец цитирования: Марш А.Дж., О’Салливан О., Хилл С., Росс Р.П., Коттер П.Д. (2013) Анализ на основе секвенирования бактериального и грибкового состава кефирных зерен и молока из различных источников.PLoS ONE 8 (7): e69371. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0069371

Редактор: Колин Дейл, Университет Юты, Соединенные Штаты Америки

Поступила: 24 марта 2013 г .; Принята к печати: 7 июня 2013 г .; Опубликовано: 19 июля 2013 г.

Авторские права: © 2013 Marsh et al. Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Финансирование: Центр пищевых фармакологий — это исследовательский центр, финансируемый Ирландским научным фондом (SFI) в рамках Национального плана развития правительства Ирландии. Авторы и их работа поддержаны грантом SFI CSET, грантом APC CSET 2 07 / CE / B1368. Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, решении опубликовать или подготовке рукописи

Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что конкурирующих интересов не существует.

Введение

Кефир — это кисломолочный напиток. Это вязкий, самогазированный, кислый напиток с низким содержанием алкоголя, который, как полагают, возник в горах Кавказа около 2000 лет назад. Молоко ферментируется твердой, похожей на цветную капусту, полисахаридной матрицей, известной как кефирное зерно, которую повторно используют для запуска последующих ферментаций. Зерно в основном состоит из производимого бактериями кефирана [1], который содержит в себе сложный консорциум бактерий и дрожжей, которые работают в симбиозе, сбраживая молоко [2].

Считается, что микробный состав кефира и кефирных зерен варьируется в зависимости от географических, климатических и культурных условий, а также от разнообразия местных видов диких дрожжей и бактерий. Анализ культур показывает, что бактерии составляют большинство, до 90% популяции зерна [3]. Такие исследования на основе культур также показали, что бактериальный состав кефира преимущественно состоит из молочнокислых бактерий (LAB) Lactobacillus , Lactococcus , Leuconostoc и Streptococcus , а также уксуснокислых бактерий из рода Acetobacter [4], [5], [6].Бактерии способствуют выработке молочной кислоты, которая сохраняет молоко, и продуцирует различные противомикробные и ароматизирующие соединения (например, ацетальдегид) в дополнение к другим метаболитам (например, внеклеточным полисахаридам), свободным аминокислотам и витаминам [7]. Другие исследования показали, что дрожжевой компонент кефира состоит из Kluyveromyces , Saccharomyces , Candida и Torulaspora [3], [8], [9], [10], [11]. Другие дрожжи, которые реже ассоциируются с кефиром, включают Pichia / Issatachenkia [9], [12], Brettanomyces / Dekkera [8], [13], Zygosaccharomyces [4] и Yarrowia. [10], тогда как недавние молекулярные исследования обнаружили присутствие Kazachstania [14], [15], [16].Дрожжи выполняют жизненно важную роль в производстве алкоголя и углекислого газа в молоке и вырабатывают метаболиты, которые считаются важными с точки зрения ощущения во рту и вкуса [17]. В конечном итоге, после 24-часовой ферментации подходы на основе культивирования показывают, что лактококки / стрептококки присутствуют в 10 ⁸ –10 ⁹ мл ^-1 , Leuconostoc в 10 ⁷ –10 ⁸ мл ⁻¹ , уксуснокислые бактерии при 10 ⁵ –10 ⁶ мл ⁻¹ , лактобациллы при 10 ⁵ –10 ⁶ мл ⁻¹ и дрожжи при 10 ⁶ –10 ⁷ мл ^-1 [18], [19].

Несмотря на несомненную ценность вышеупомянутых исследований, анализы на основе культур ограничены в силу выявления только видов, способных расти на конкретной используемой среде. Таким образом, независимые от культуры методы могут обеспечить более точный и глубокий анализ. Хотя независимые от культуры методы, такие как секвенирование по Сэнгеру [12], [16], [20], [21] и DGGE [14], [15], [22], использовались для изучения популяции кефира, применение высоких Особо важным достижением стало высокопроизводительное секвенирование ДНК для исследования таких микробных экосистем.Эта стратегия использовалась для изучения микробного состава ряда ферментированных пищевых сред, таких как сыр [23], [24], ферментированная рыба [25], [26], ферментированные овощи [27], рисовые отруби [28] и суспензия жемчужного проса [29]. Действительно, недавно было также использовано высокопроизводительное секвенирование ДНК, чтобы получить более полное представление о бактериальной популяции одного ирландского кефирного зерна и молока и трех бразильских кефирных зерен [30], [31].

Преимущества более полного понимания микробного состава кефира и кефирных зерен связаны с тем фактом, что история кефира уже давно связана с его предполагаемой пользой для здоровья.Предварительные исследования показали, что кефир уменьшает симптомы непереносимости лактозы, стимулирует иммунную систему, снижает уровень холестерина и обладает антимутагенными и антиканцерогенными свойствами [7]. Поэтому неудивительно, что в последние годы кефир как функциональная молочная пища стал объектом повышенных исследований. Хотя некоторые из преимуществ для здоровья, которые, как считается, связаны с потреблением кефира, могут быть связаны с биохимическими изменениями, происходящими в молоке, такими как производство органических кислот, биоактивных пептидов и т. Д., присутствующие виды микробов также могут иметь свойства, способствующие укреплению здоровья. В частности, роды, к которым отнесены многие штаммы с полезными для здоровья или пробиотическими свойствами, такие как Lactobacillus , Bifidobacterium , Enterococcus , Bacillus и Streptococcus , были выделены из кефира в прошлом [20]. , [32]. С точки зрения грибков, в клинических испытаниях было установлено, что штаммы дрожжей Saccharomyces boulardii обладают полезными для здоровья свойствами [33], [34], [35].Штаммы Saccharomyces cerevisiae , а также Kluyveromyces lactis / Candida kefyr , обычно связанные с кефиром, также обладают потенциалом в этом отношении [36], [37], [38]. Однако, наоборот, было показано, что Candida kefyr вызывает эсфагит у пациента с плоскоклеточной карциномой [39].

Помимо выявления потенциально здоровых популяций, коммерциализация производства кефира может выиграть от получения подробного понимания связанных микробных популяций.Также существует потребность в оценке неоднородности этих популяций по большому количеству зерен и, в частности, в использовании молекулярных подходов для лучшей характеристики ассоциированных популяций дрожжей. В свете этих требований целью данного исследования было использование высокопроизводительных методов секвенирования для обеспечения углубленного анализа микробного консорциума из 25 различных зерен кефира и молока, полученных из множества различных источников, с целью минимизировать любые географические предубеждения. это может повлиять на флору.Это исследование является первым случаем, когда эта технология была применена к такому большому количеству образцов кефира, и первым исследованием такого рода, которое выявило грибковый компонент кефира.

Материалы и методы

Поддержание культуры

9 ирландских зерен кефира были повторно культивированы из хранилища -80 ° C в Коллекции культур Teagasc путем ферментации в 10% восстановленном обезжиренном молоке (RSM), которое было стерилизовано при 115 ° C в течение 15 минут. Первоначально они были приобретены у домохозяек по всей стране [18] и для целей настоящего исследования были обозначены как IR1, 2, 3, 4, 5, 6, 8, 9 и 10.Еще 16 зерен были получены от индивидуальных и коммерческих поставщиков из ряда различных мест (Таблица S1) и выращены в одинаковых условиях. Образцы из Соединенного Королевства были обозначены как UK1 — UK5, а образцы из США — как US1, 2, 3 и 5. Другие зерна кефира были получены из Испании (Sp1), Франции (Fr1), Италии (It1), Канады (Ca1). ) и Германии (Ger1 и Ger2). Культуры поддерживали при комнатной температуре и вносили в свежее молоко 3 раза в неделю в течение минимум 4 месяцев до экстракции.

Экстракция метагеномной ДНК

100 мл 10% RSM инокулировали 1 г кефирного зерна и ферментировали при 25 ° C в течение 24 часов, времени, при котором кефир готовят чаще всего. Для извлечения ДНК из кефира 1,8 мл ферментированного молока центрифугировали для получения осадка, который суспендировали в 450 мкл лизирующего буфера P1 из набора для выделения микробной ДНК Powerfood (MoBio Laboratories Inc, США). Ресуспендированный осадок подвергали ферментативному расщеплению ферментами мутанолизином (100 Ед / мл) и лизоцимом (50 мкг / мл) при 37 ° C в течение 1 часа с последующим расщеплением протеиназой K (250 мкг / мл) при 55 ° C в течение 1 часа. час.Экстракцию оптимизировали 10-минутной инкубацией при 70 ° C [40] перед механическим лизисом с использованием Qiagen TissueLyser II (Retsch ® ). Затем использовали набор для выделения микробной ДНК Powerfood в соответствии с инструкциями производителя. Чистую ДНК элюировали стерильной водой для ВЭЖХ. ДНК из кефирного зерна выделяли с помощью модифицированной процедуры экстракции на основе фенол-хлороформа [22].

Амплификация ДНК и пиросеквенирование

Экстракты

метагеномной ДНК использовали в качестве матрицы для амплификации ПЦР с BioMix red (Биолайн), которая имеет зарегистрированную частоту ошибок 2 × 10 ⁵ ошибок / п.н. [41].ПЦР-амплификацию вариабельной области V4 – V5 (408 п.н.) гена 16S рРНК проводили с использованием универсальных праймеров V1 (5′-AYTGGGYDTAAAGNG) и обратного V5 (5′-CCGTCAATTYYTTTRAGTTT) для облегчения исследования бактериального компонента микробные популяции [42]. Адаптеры с уникальным мультиплексным идентификатором длиной 8 п.н. были прикреплены между 454 последовательностями адаптеров и прямыми праймерами для облегчения объединения и последующей дифференциации образцов [43]. Меченые универсальные праймеры также использовали для амплификации ДНК грибов из вариабельной области рРНК ITS-1 [44].В этом случае прямой праймер ITS1F (5′-CTTGGTCATTTAGAGGAAGTAA) и обратный ITS2 (5′-GCTGCGTTCTTCATCGATGC) генерировали продукты ПЦР из примерно 410 п.н. Условия ПЦР, используемые для амплификации 16S: денатурация при 94 ° C в течение 2 минут, 35 циклов при 94 ° C в течение 1 минуты (денатурация), 52 ° C в течение 1 минуты (отжиг) и 72 ° C в течение 1 минуты (удлинение) с последующим последние 72 ° C в течение 2 минут. Условия ПЦР, используемые для ITS-амплификации: денатурация 94 ° C в течение 4 минут, 35 циклов 94 ° C в течение 30 секунд (денатурация), 50 ° C в течение 1 минуты (отжиг) и 72 ° C в течение 1 минуты и 30 секунд ( расширение).Был проведен последний этап отжига при 72 ° C в течение 10 минут. Вся ДНК подвергалась 10-минутному горячему запуску при 94 ° C перед амплификацией ПЦР. Ампликоны, полученные из трех реакций ПЦР / ДНК-матрицы, объединяли и очищали с использованием системы очистки Agencourt AMPure ® (Beckman Coulter Genomics, Takeley, UK). Очищенные продукты количественно определяли с использованием флуороспектрометра Nanodrop 3300 (Thermo Scientific) и набора для анализа дцДНК Quant-iT ™ Picogreen ® (Invitrogen). Объединяли равные концентрации ампликонов 16S или ITS, AMPure очищали и оценивали с помощью биоанализатора Agilent 2100 (Agilent Technologies), чтобы определить чистоту и гарантировать отсутствие димеров праймеров.Секвенирование ампликонов 16S рРНК V4 – V5 и ITS1 рДНК проводили с использованием 454 Genome Sequencer FLX Titanium System (Roche Diagnostics Ltd) в Центре пищевых исследований Teagasc, Moorepark, согласно 454 протоколам.

Анализ данных пиросеквенирования

сырых последовательностей были обрезаны и отфильтрованы с использованием набора инструментов Qiime Suite [45]; любые считывания, не отвечающие критериям качества минимальной оценки качества 25 и длины последовательности короче 150 бит / с для считываний ампликона 16S и 200 бит / с для считываний ампликона ITS, отбрасывались.Максимальный предел гомополимеров был увеличен до 10 для ITS-ампликонов, поскольку известно, что ITS-последовательности содержат длинные гомополимерные серии. Урезанные последовательности fasta оценивали с помощью анализа BLAST по базе данных SILVA (версия 100) для считываний 16S [46]. Специфическая база данных ITS-1, ITSoneDB, использовалась для BLAST всех последовательностей ITS [47]. Выходные данные BLAST анализировались с использованием MEGAN [48] с битовой оценкой 86, использовавшейся для данных рибосомной последовательности 16S, и битовой оценкой 35 использовалась для данных ITS-последовательности. Набор программ QIIME использовался для расчета альфа-разнообразия, включая богатство Chao1, разнообразие Шеннона, индекс Симпсона, филогенетическое разнообразие и наблюдаемые виды [45].Глубину секвенирования оценивали с помощью анализа разрежения. QIIME также использовался для создания взвешенных матриц расстояний UniFrac, невзвешенных UniFrac и Брея-Кертиса. Графики главного координатного анализа, основанные на этих матрицах расстояний, были созданы с помощью Qiime и визуализированы с помощью King [49]. Статистически значимые различия между комбинированными зернами кефира и комбинированным ферментированным молоком определяли с помощью непараметрического теста Манна-Уитни с использованием статистического пакета Minitab ® .Прочтения были депонированы в базе данных SRA под инвентарным номером ERP002650.

Результаты

Бактериальная популяция кефирного молока более стабильна и менее разнообразна, чем в соответствующих зернах

Фильтрация пост-качества, осталось 106 235 и 136 815 отсчетов для 23 зерен и соответствующих 23 пробы молока, соответственно, что составляет в среднем 4619 отсчетов для каждой пробы зерна и 5 949 отсчетов на пробу молока.

Были рассчитаны значения

Chao1 (отражающие OTU / видовое богатство), индексы Шеннона и Симпсона (для определения видового разнообразия), а также числа филогенетического разнообразия и наблюдаемых видов (Таблица S2).Кривые разрежения, рассчитанные при 97% сходстве, приближаются параллельно оси x для всех образцов, что указывает на то, что было получено достаточное количество считываний для адекватной оценки популяции (Рисунок S1). Анализ прямоугольной диаграммы показывает, что популяция бактерий в кефирном молоке, как правило, менее разнообразна, чем в кефирных зернах (рис. S2), где среднее значение (черная полоса) для молока было ниже по всем показателям, за исключением критерия Шеннона. индекс. Единственное существенное различие между зерном и молоком заключалось в филогенетическом разнообразии ( p <0.001).

Графики

главного координатного анализа были созданы на основе невзвешенной матрицы расстояний UniFrac (рис. 1AB), единственной древовидной метрики. Из этого анализа было очевидно, что не было кластеризации среди популяций кефира из разных стран (рисунок 1AB), и это коррелировало с другими матрицами расстояний (данные не показаны). Анализ Прокруста показал, что ординации кефира и кефирных зерен не связаны друг с другом ( M ² = 0.924, p = 0,644, рисунок 2A). Сходство между сообществами кефирного зерна не было таким же, как сходство между сообществами кефира.

Рис. 1. Графики главного координатного анализа (PCoA), основанные на невзвешенных матрицах расстояний UniFrac, показывают разнообразие в популяциях бактерий из зерен кефира (A) и кефирного ферментированного молока (B), а также грибных зерен (C) и молока (D) .

Зеленый = ирландский кефир, Апельсин = бельгийский кефир, Светло-коричневый = испанский кефир, Красный = немецкий кефир, Серый = американский кефир, Розовый = итальянский кефир и Фиолетовый = британский кефир.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0069371.g001

Рис. 2. Прокрустовое изображение невзвешенных дистанционных матриц UniFrac подчеркивает разнообразие бактериального компонента 16S (A) и грибкового компонента (B) различных кефиров. образцы.

Два разных типа образцов связаны полосой (белый цвет представляет флору зерна; красный цвет представляет флору молока). Направление каждой оси произвольно.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0069371.g002

Альфа-разнообразие грибковых популяций в кефирном молоке и зернах различается, но бета-разнообразие кефирных зерен больше, чем у молока

Фильтрация пост-качества. Всего было сгенерировано 118 879 и 118 976 считываний, соответствующих 23 зернам и соответствующим 23 популяциям молока, соответственно. Это соответствует среднему числу считываний 5 167 и 5 173 на зерно и образец молока соответственно.

Значения альфа-разнообразия показали, что кефирные зерна и молоко отличаются низким природным разнообразием (Таблица S3).Анализ прямоугольной диаграммы индексов Chao1, наблюдаемых видов и филогенетического разнообразия показывает, что разнообразие больше в кефирном молоке, чем в зернах (Рисунок S3). Однако статистическая разница между ними ограничивалась филогенетическим разнообразием (p <0,001). Кривые разрежения приближаются параллельно оси абсцисс для всех образцов, что свидетельствует о достаточной глубине секвенирования (рис. S4).

Для измерения бета-разнообразия графики главного координатного анализа были сгенерированы на основе невзвешенных матриц расстояний UniFrac (рис. 1CD), но кластеризации не было.Анализ Прокруста двух PCoA снова показывает, что сходства между кефирными зернами и кефирным молоком не были одинаковыми в отношении популяций грибов ( M ² = 0,855, p = 0,139, рис. 2B).

В кефирных зернах и связанном с ними кефирном молоке преобладает относительно небольшое количество бактериальных родов

В кефирном зерне обнаружено четыре бактериальных типа. Это были Actinobacteria, Bacteroidetes, Firmicutes и Proteobacteria.Из них Bacteroidetes не были идентифицированы среди молочных бактерий и были обнаружены только в 9 зернах. Как в зерне, так и в молоке, двумя доминирующими типами были Firmicutes и Proteobacteria. Действительно, большинство образцов зерна содержали большинство (> 50%) Firmicutes, за исключением Ir6, который содержал 69,14% Proteobacteria. В зернах Ca1, Ir9 или UK3 протеобактерии не обнаружены. Среди образцов молока Ir1, Ir5, Ir10, US1 и Ir8 также были необычными, поскольку содержали бактериальную популяцию с преобладанием Proteobacteria, которая в случае Ir8 достигала 90.4%. В молоке, соответствующем Fr1 и UK3, протеобактерии отсутствовали. Не было очевидного последовательного перехода (увеличения или уменьшения) популяций протеобактерий с кефирного зерна на кефирное молоко (Таблица S4; Таблица S5). Бактерии, соответствующие филуму Actinobacteria, были обнаружены только в двух зернах: Ir9 (5,87%) и UK2 (0,24%). Относительно высокий процент актинобактерий в Ir9 может объяснить, почему соответствующее кефирное молоко было единственным образцом, в котором были обнаружены актинобактерии (0,26%). Среди всего зерна было значительно большее количество неназначенных типов, чем среди всего молока ( p <0.001).

На уровне семейств очевидно большее бактериальное разнообразие (с точки зрения количества различных семейств) в зерне. Только пять семейств бактерий были обнаружены в молоке, тогда как двенадцать были идентифицированы в пробах зерна (таблицы S4 – S5). Зерна преимущественно состояли из Lactobacillaceae , что составляло> 50% популяций во всех, кроме зерна Ir6. Другим крупным семейством были протеобактерии Acetobacteraceae .Среди других обнаруженных семейств были Streptococcaceae (19 зерен), Leuconostocaceae (4 зерна), Lachnospiraceae (16 зерен), Ruminococcaceae (8 зерен), Bifidobacteriaceins (2 ), Propionibacteriaceae (2 зерна), Bacteroidaceae (2 зерна), Enterococcaceae (1 зерно) и Rikenellaceae (1 зерно) (Таблица S4). Среди других семейств Streptococcaceae были обнаружены в 19 из 23 зерен с наибольшей долей, обнаруженной в UK2 (5.12%). Leuconostocaceae были обнаружены только в четырех образцах зерна (Bel1, 0,31%; Fr1, 0,13%; UK1, 0,29%; UK2, 0,51%). Lachnospiraceae были обнаружены в 16 зернах, от наибольшего содержания в Ir9 (0,51%) до самого низкого в US2 (0,09%). Ruminococcaceae были обнаружены в 8 образцах, от 8,21% в Bel1 до 0,08% в UK2. Bifidobacteriaceae присутствовали только в 2 зернах (0,81% в Ir9 и 0,10% в UK2), как и Clostridiaceae (Ger1, 0.39% и US2, 0,12%), Propionibacteriaceae (Ir9, 4,94% и UK2, 0,13%) и Bacteroidaceae (UK2 и UK3, 0,08%). Enterococcaceae (Ir9, 0,22%) и Rikenellaceae (US2, 0,07%) присутствовали только в одном зерне каждый. В популяциях бактерий в молоке преобладали Streptococcaceae , которые были обнаружены в большей пропорции в кефирном молоке, чем в зернах ( p <0,001), и составляли доминирующую популяцию (> 50%) в 13 образцах.Ir3, Ir8 и US1 были заметными исключениями, поскольку содержали 10,16%, 2,87% и 10,91% Streptococcaceae , соответственно. Вместо него Ir3 имеет самые высокие доли Lactobacillaceae при 60,51%, тогда как Ir8 и US1 имеют две самые высокие доли Acetobacteraceae с 90,41% и 77,06% соответственно. Однако в целом доли Lactobacillaceae в молоке были значительно ниже, чем в соответствующих зернах ( p <0.001). Общая средняя доля Acetobacteraceae существенно не изменилась от зерна к соответствующему молоку, несмотря на то, что значительное увеличение было очевидным в одних и тех же случаях (то есть вышеупомянутых Ir8 и US1, а также Ir1 и Ir5). Пропорции Leuconostocaceae были обнаружены во всех образцах кефирного молока (в отличие от всего 4 образцов зерна), что отражает значительное общее увеличение ( p <0,001). Propionibacterineae был обнаружен в одном образце молока Ir9 при 0.22%, что меньше 4,94% в соответствующем зерне. Доля неназначенных считываний была <1% почти во всем зерне и молоке, за исключением 1,02% в зерне Ca1 (Таблица S4; Таблица S5).

Картина распределения на уровне родов очень похожа на ту, которая наблюдается на уровне семьи, при этом один род часто соответствует всем прочтениям, относящимся к этому семейству (рис. 3). Lactobacillus ( p <0,001) - доминирующий род в зерне с долей Lactococcus и Leuconostoc , что значительно выше в кефирном молоке ( p <0.001). И снова различия в пропорциях и распределении Acetobacter (из семейства Acetobacteraceae ) в зерне и молоке были численными, но не статистическими.

Секвенирование ITS дает подробное представление о грибковом составе кефирных зерен и связанного с ними молока, ферментированного кефиром

Единственный грибной тип, присвоенный зерну, — это Ascomycota, самый крупный тип грибного царства. Также было показано, что аскомикота преобладает в кефирном молоке: от 100% в Ger1 до минимума 89.38% в Ir10 (Таблица S6; Таблица S7). Basidiomycota, другой тип, принадлежащий к подконтролю Дикарии, был обнаружен в 9 образцах молока с относительно низким числом считываний. 9 образцов молока также содержали следы некультивируемых грибов. Более низкое разнообразие зерна снова очевидно на уровне семейства, где все образцы, кроме одного (Sp1), содержат> 99% Saccharomycetaceae . Общая средняя доля Saccharomycetaceae значительно ниже в молоке ( p <0.001), но по-прежнему соответствуют> 99% считываний в 16 из 23 выборок. Грибковый состав кефирного молока Sp1 был необычным, поскольку содержал 34,27% Pichiaceae . Напротив, следующая по величине доля Pichiaceae составила 0,48% (в молоке UK3). Другими семействами грибов, обнаруженными как в кефирном молоке, так и в зернах, были Davidiellaceae и Trichocomaceae . Herpotrichiellaceae , Teratosphaeriaceae , Valsaceae , Debaryomycetaceae , Phaffomycetaceae , Malasseziaceae , Bondarzewiaceae , Dermataceae , Pezizaceae , Ganodermataceae , Tricholomataceae , тремелломицеты .Кроме того, Wallemiomycetes были обнаружены только в молоке, тогда как Dothioraceae были обнаружены только в зернах.

Самый распространенный вид грибов как в кефирном молоке, так и в зерновых — Kazachstania (Рисунок 4). Этот род обнаружен во всех образцах, кроме зерна кефира Ger1. Учитывая, что соответствующее молоко содержало Kazachstania в пропорции 5,68%, вполне вероятно, что это зерно действительно содержало Kazachstania на уровнях ниже предела обнаружения для данного исследования.Доли Kazachstania были> 50% в 11 зернах и в 13 видах молока и были самыми высокими в зернах Ir2 и US1 (99,40% и 99,25% соответственно) и молоке Ir2 и US3 (99,20% и 98,07%. , соответственно). Напротив, доли зерна Bel1 и UK3 (0,24% и 0,39% соответственно) и молока UK2 и US5 были низкими (0,44% и 0,89% соответственно). Наумовозима был вторым по распространенности родом грибов, он присутствовал в 16 зернах и 10 образцах молока, что составляет 13.Считывает 09% всего зерна и 9,98% всего молока. Пропорции Наумовозима варьировались от доминирующего в Ir9 (96,02%, зерно; 81,87%, молоко) и Ir4 (57,56%, зерно; 59,41%, молоко) до субдоминантного в Ger2 (2,46%, зерно; 0%, молоко) и US1 (0,18%, зерно; 1,81%, молоко), среди других. Примечательно, что хотя Наумовозима не был обнаружен в зерне Fr1, этот род стал доминирующим в полученном кефирном молоке (59,3%), что снова указывает на присутствие Наумовозима в зерне ниже порога обнаружения.Третьим наиболее часто определяемым родом был Kluyveromyces , который был обнаружен в 17 зерновых и 18 молочных продуктах, что составляет 7,6% и 7,32% от общего количества прочтений зерна и молока соответственно. Хотя Kluyveromyces присутствовал в молоке Bel1 в количестве 50,16%, этот род чаще присутствовал в субдоминантных пропорциях с обнаруженным низким содержанием Ir1 в молоке 0,05%. На уровне рода многие чтения, соответствующие Saccharomycetaceae , не могли быть надежно отнесены.Это соответствовало> 50% считываний, соответствующих зернам Bel1, Fr1, Ger1, Ger2, It1, UK1, UK3, UK4 и UK5 и молоку Ger1, It1, UK2 и US5. Вероятно, это результат такого высокого сходства между ITS-последовательностями, что их нельзя надежно разделить и отнести. Несмотря на численные различия в пропорциях различных родов грибов, присутствующих в кефирных зернах и молоке, единственное существенное различие связано с более высокой долей Dekkera в молоке, чем в зернах ( p = 0.004). Кефирное молоко также содержало большее количество различных родов, часто в следовых количествах, которые не были обнаружены в соответствующих зернах. В их число входят Zygosaccharomyces , Wallemia , Eurotium , Microdochium , Cryptococcus , Teratosphaeria , Debaromyces , Cyberlindnera 9019, Nexerazia 9019, Nera Ganoderma , Mycena и Dioszegia . Penicillium и Aureobasidium были обнаружены только в одном случае, то есть в кефирном зерне Sp1 (0,13%) и зерне UK3 (0,09%) соответственно.

В отличие от считываний 16S, которые подвержены высокому уровню гомологии последовательностей, считывания ITS были достаточно разнородны, чтобы можно было отнести их к уровню вида. В таблице 1 показано общее количество идентифицированных различных видов и была ли ранее связь с кефиром. Профиль популяции на уровне вида полностью отражает профиль на уровне рода.Самый распространенный вид, Kazachstania unispora , присутствовал в 20 зернах и во всем молоке. Все чтения из родов Kluyveromyces и Naumovozyma были отнесены к видам Kluyveromyces marxianus и Naumovozyma castelli соответственно (Таблица S6; Таблица S7). Хотя род Saccharomyces был идентифицирован в небольших количествах в ряде злаков и молока, только те, которые содержатся в Ir5, были отнесены на уровне вида (к Saccharomyces cerevisiae ).

Обсуждение

Это исследование представляет собой наиболее полное на сегодняшний день исследование микробной популяции кефира (как зерна, так и молока). Этому анализу способствовало высокопроизводительное секвенирование 16S рРНК (бактерии) и, впервые, ампликонов ITS (грибов), полученных из значительно большей коллекции образцов, чем использовалось до сих пор. Количество прочтений хорошо сравнивается с предыдущими исследованиями, например, Dobson et ​​al . сгенерировали в совокупности 17 416 V4 16S рРНК (4883 чтения для внутреннего зерна, 3455 чтения для внешнего зерна и 9 078 чтения для молочного ферментата; [30]), в то время как Leite et ​​al .сгенерировал в общей сложности 14 314 чтения 16S рДНК (2641, 2690 и 8 983 чтения для трех секвенированных зерен, соответственно [31]). В каждом индексе значения альфа-разнообразия отражали естественное низкое разнообразие и однородность между образцами кефира по сравнению с другими анализами окружающей среды, а модели разрежения соответствовали результатам предыдущих исследований кефира [30], [31].

Профиль

16S рРНК показал, что бактериальная популяция тестируемого кефирного молока состоит из актинобактерий, фирмикутов и протеобактерий, причем в зерне также обнаруживаются бактерии Bacteroidetes.В зернах кефира преобладали Lactobacillaceae / Lactobacillus , что свидетельствует о том, что эта закономерность, которая ранее была отмечена в исследованиях на основе высокопроизводительного секвенирования гораздо меньшего количества кефиров [3], [30], является последовательной. Напротив, в кефирном молоке преобладают Streptococcaceae . В частности, преобладают лактококки, так как другие роды из этого семейства не обнаружены. Это контрастирует с подмножеством предыдущих исследований, в которых было идентифицировано видов Streptococcus [3], [31], [50].Следующими по распространенности LAB были Leuconostoc sp .; Leuconostoc были связаны с кефиром в ряде предыдущих случаев [9], [19], [51], [52], но представленные здесь данные впервые показывают, что пропорции этого рода значительно увеличиваются в молока по сравнению с зерном, где они могут значительно повлиять на сенсорный профиль кефиров. Acetobacteraceae (род Acetobacter ) также были идентифицированы как основные компоненты бактериальной популяции многих зерен, несмотря на то, что они были идентифицированы в некоторых [19], [53], но не во всех предыдущих исследованиях кефира.Однако, учитывая, что кефирное молоко, в котором бактерии уксусной кислоты присутствовали только на очень низких уровнях (например, Bel1, Ir2, UK1) или не были обнаружены (например, Fr1, UK3), подверглось успешной ферментации, что определялось снижением pH и молоком. коагуляция через 24–48 часов (данные не показаны), возможно, что уксуснокислые бактерии не являются строго обязательными для процесса ферментации, а скорее вносят свой вклад каким-то другим образом. Наши дальнейшие исследования будут сосредоточены на выяснении точного вклада конкретных групп населения в консистенцию кефирного молока.Тот факт, что Lachnospiraceae и Ruminococcaceae присутствуют в нескольких зернах, но не обнаруживаются в образцах молока, означает плохую способность к размножению в молочной среде. Бифидобактерии были обнаружены только в двух зернах (Ir9, 0,81% и UK2, 0,10%). Эти результаты в сочетании с предыдущими исследованиями показывают, что бифидобактерии составляют лишь незначительную часть консорциума кефирных зерен. Кроме того, его плохая стойкость в кефирном молоке предполагает, что его нужно будет добавлять в инкапсулированной или другой подобной форме, если кефир будет использоваться в качестве носителя для добавок Bifidobacterium [54].Высокопроизводительное секвенирование также эффективно выявило присутствие ряда других редких популяций в зернах кефира, которые составляли <1% от общей популяции большинства кефиров. Из них Faecalibacterium , Allistipes , Rickenellaceae , Allobaculum и Enterococcus ранее не были идентифицированы в кефире и обычно связаны с популяциями кишечных микробов. Напротив, Pseudomonas spp., Идентифицированные в зернах других высокопроизводительных усилий по секвенированию в следовых количествах, не были идентифицированы в этих кефирах [30], [31].

После исследования применения нескольких баз данных, специфичных для ITS, таких как UNITE (http://unite.ut.ee/index.php), было обнаружено, что ITSoneDB, который состоит из исчерпывающего набора хорошо аннотированных и филогенетически- классифицированные последовательности ITS1, полученные из Genbank и расположенные на дереве таксономии NCBI, дали наилучшие уровни распределения [47]. Состав популяции связанных с кефиром дрожжей был предметом некоторого внимания [2], [55], которому не помогли трудности, связанные с номенклатурой и опорой на исследования, основанные на культуре. Saccharomycetaceae имеют плохо определенную групповую морфологию, и такая основа для классификации может привести к ненадежному отделению видов от близких родственников. Кроме того, многие дрожжи Ascomycota и Basidiomycota обладают половым (телеоморфным) и бесполым (анаморфным) состояниями размножения, что иногда приводит к классификации видов под двумя названиями. Было предложено, чтобы в 2013 г. грибы назывались только их телеоморфными названиями, за исключением смягчающих обстоятельств [56], и поэтому здесь был использован этот подход.Изучение литературы показывает, что ранее было показано, что Candida kefyr составляет до 90% популяции дрожжей в кефирном молоке [57] и обычно выделяется из кефира [4], [57], [58]. Несмотря на значительное присутствие в базе данных ITS, в этом исследовании не было обнаружено Candida . Примечательно, однако, что ряд считываний, которые демонстрировали сходство с C. kefyr , вместо этого были отнесены к соответствующему телеоморфу, Kluyveromyces marxianus , в силу более высокого процента сходства. Kluyveromyces marxianus ранее ассоциировался с кефиром [10], [12], [16].

Доминантными дрожжами, обнаруженными в этом исследовании, были Kazachstania , состоящие из Kazachstania barnetti и Kazachstania unispora. К . unispora ранее был известен как Saccharomyces unipsorus [59], который был идентифицирован в кефире [10], [12], [14], [15], [16] и был связан с другими ферментированными напитками [60] ], [61].Похоже, что K. unispora особенно хорошо адаптирована к среде молочного животноводства, поскольку это наиболее распространенный вид, превосходящий конкурирующие виды, включая K. barnetti . Это первый случай, когда K. barnetti , обнаруженный в зерне, но не в молоке, был обнаружен в кефирной среде. Naumovozyma — это род, который очень похож на Saccharomyces и Kazachstania , и идентифицированный здесь вид, Naumovozyma castellii , был переклассифицирован из Saccharomyces castellii в прошлом [62].Хотя ранее он не был связан с кефиром, единственным другим видом в этом роде был Naumovozyma dairenensis (ранее Saccharomyces dairenensis ) [63]. В отличие от значительного присутствия вышеупомянутых видов грибов, относительное отсутствие Saccharomyces сначала поражает, учитывая его историческую связь с кефиром. Это, скорее всего, отражает реклассификацию Наумовозы и Казахстан .Несмотря на это, примечательно, что предыдущие исследования показали, что Saccharomyces cerevisiae довольно часто встречается в кефире [3], [16], [52], тогда как здесь этот род был обнаружен всего в трех зернах и трех видах молока и в следовых количествах. . Возможно, что этот род не так широко распространен, как предполагали предыдущие данные, или, возможно, был неправильно отнесен к предыдущим исследованиям. В качестве альтернативы, Saccharomyces может чаще встречаться в кефирах из географических регионов, не включенных в это исследование.Происхождение зерна также могло иметь значение для идентификации Pichia kudriavzevii (ранее известного как Issatchenkia orientalis ) на уровнях, которые были атипично высокими по сравнению с другими образцами в испанском кефире (зерно, 0,57% ; молоко 34,27%). Примечательно, что Латорре-Гарсия и др. идентифицировали Issatchenkia orientalis как один из наиболее репрезентативных видов испанского кефира [12] и до недавнего времени [16] его не находили среди кефирных зерен или молока других производителей.Что касается других видов, было также примечательно, что Torulaspora delbreuckii не был обнаружен в этом исследовании, несмотря на то, что как он [10], [11], так и его анаморфная форма, Candida colliculosa , ранее были обнаружены в кефире. [8]. Также было много случаев, когда мы идентифицировали виды, ранее не обнаруженные в кефирном молоке, например, когда Dekkera anomala (анаморф: Brettanomyces anomalus ) был выделен из кефира [8], Dekkera bruxellensis (anamorphtanomyces bruxellensis (anamorphtanomyces bruxellensis ) ) до сих пор не выделялся из кефира (но был обнаружен в традиционном ферментированном монгольском и зимбабвийском молоке [64], [65]).Другие виды, которые ранее не были обнаружены, но присутствовали в меньшей численности, и несколько (часто только один) проб молока (ов) включали Cryptococcus sp. Vega 039, Zygosaccharomyces lentus , Penicillium sp. Vega 347 , Wallemia СЦББИ , Ganoderma Lucidum , Cyberlindnera jadinii , Eurotium amstelodami , корневая губка , Peziza сатрезШз , Teratosphaeria knoxdaviesii , Dioszegia Hungarica и Malassezia pachydermatis . Cryptococcus и Zygosaccharomyces были обнаружены в кефире раньше [4], но это первая идентификация соответствующего вида, Cryptococcus sp. Vega 039 и Z. lentus . Cryptococcus — это широко распространенные базидиомикотические дрожжи, которые ранее были идентифицированы в кефире, который был заморожен и рекультивирован. Этот момент отмечен как молоко, ассоциированное с Cryptococcus , описанное в текущем исследовании, полученное из двух зерен кефира, Ir8 и Ir9, которые были рекультивированы из хранилища -80 ° C. Z. lentus считается организмом, вызывающим порчу пищевых продуктов, связанным с напитками с низким pH, и может расти при низких температурах [66]. C. jadinii используется в пищевых добавках для животных и человека и является хорошим источником витаминов, минералов, белков и незаменимых аминокислот [67]. Несмотря на то, что он не был выделен из кефира, его использовали для увеличения производства одноклеточного белка с помощью кефира [68]. Кроме того, E. amstelodami часто выделяют из хлебопекарных продуктов [69]. H. annosum , P. campestris , T. knoxdaviesii и D. hungarica — все они считаются экологическими грибами. H. annosum является возбудителем корневой и стыковой гнили сосен [70], Peziza связан с ростом сапрофитного грибка на гнилой древесине [71], Teratosphaeria были описаны как возбудители эвкалипта [72] ] и D. hungarica населяют арбускулярные микоризные грибы [73]. M. pachydermatis , обнаруженный в Ir9, является известным патогеном, который угрожает новорожденным и связан с домашними собаками [74]. Наконец, в нескольких образцах (Bel1, Fr1, Ger1, Ger2, It1 и UK1-5) многие чтения, ассоциированные с Saccharomycetaceae , не могли быть отнесены к родовому уровню и были обозначены как «другие» (рис. 4). Ожидается, что по мере депонирования большего количества грибковых последовательностей виды, соответствующие этим считываниям, могут быть обнаружены. Графики PCoA, визуализирующие микрофлору кефира, не показывают какой-либо явной кластеризации между различными кефирами, показывая разнообразие между популяциями кефира независимо от их источника.

Тот факт, что натуральный кефир способен содержать несколько организмов, связанных со здоровьем, предполагает, что теоретически его можно изменить, чтобы включить предварительно установленные и сертифицированные штаммы пробиотиков с минимальным сенсорным воздействием. Действительно, окончательное применение кефира может быть в качестве потенциальной системы доставки жизнеспособных организмов, способствующих укреплению здоровья, в кишечник [75]. Однако тот факт, что зерно еще не было произведено из чистой культуры [76], предполагает, что еще многое предстоит понять в отношении динамики популяции кефирных зерен.

В заключение, исследование представляет собой наиболее полное на сегодняшний день исследование микробного состава кефирных зерен и молока. В нем представлена ​​важная информация, которая может облегчить восстановление зерен кефира для создания специально подобранных зерен кефира и молока, в то время как дальнейшее исследование определенных идентифицированных компонентов может выявить их вклад в структуру зерен кефира и полезный для здоровья аспект связанных напитков.

Благодарности

Авторы хотели бы поблагодарить Еву Росберг-Коди и Фиону Криспи за техническую помощь в высокопроизводительном секвенировании.

Вклад авторов

Задумал и спроектировал эксперименты: AJM CH RPR PDC. Проведены эксперименты: AJM. Проанализированы данные: AJM OO. Предоставленные реагенты / материалы / инструменты анализа: AJM OO. Написал статью: AJM.

Ссылки

1. 1. La Riviere JW, Kooiman P (1967) Кефиран, новый полисахарид, производимый в кефирном зерне Lactobacillus brevis. Archiv fur Mikrobiologie 59: 269–278.
2. 2. Фарнворт Э. (2005) Кефир — сложный пробиотик.Бюллетень пищевой науки и технологий 2: 1–17.
3. 3. Симова Е., Бешкова Д., Ангелов А., Христозова Т., Френгова Г. и др. (2002) Молочнокислые бактерии и дрожжи в кефирных зернах и кефире из них. Журнал промышленной микробиологии и биотехнологии 28: 1–6.
4. 4. Witthuhn RC, Schoeman T, Britz TJ (2005) Характеристика микробной популяции на разных этапах производства кефира и выращивания кефирной зерновой массы. Международный молочный журнал 15: 383–389.
5. 5. Chen HC, Wang SY, Chen MJ (2008) Микробиологическое исследование молочнокислых бактерий в зернах кефира с помощью культурально-зависимых и независимых от культуры методов. Пищевая микробиология 25: 492–501.
6. 6. Кесмен З., Качмаз Н. (2011) Определение молочной микрофлоры кефирных зерен и кефирного напитка с использованием культурально-зависимых и культурально-независимых методов. Журнал пищевой науки 76: M276–283.
7. 7. Гузель-Сейдим З.Б., Кок-Тас Т., Грин А.К., Сейдим А.С. (2011) Обзор: функциональные свойства кефира.Критические обзоры в области пищевой науки и питания 51: 261–268.
8. 8. Wyder MT, Spillmann H, Puhan Z (1997) Исследование дрожжевой флоры в молочных продуктах: тематическое исследование кефира. Пищевая технология и биотехнология 35: 299–304.
9. 9. Lin CW, Chen HL, Liu JR (1999) Идентификация и характеристика молочнокислых бактерий и дрожжей, выделенных из кефирных зерен на Тайване. Австралийский журнал молочных технологий 54: 14–18.
10. 10. Loretan T, Mostert JF, Viljoen BC (2003) Микробная флора, связанная с южноафриканским домашним кефиром.Южноафриканский научный журнал 99: 92–94.
11. 11. Angulo L, Lopez E, Lema C (1993) Микрофлора, присутствующая в кефирных зернах Галисийского региона (северо-запад Испании. Журнал исследований молочных продуктов 60: 263–267.
12. 12. Latorre-Garcia L, del Castillo-Agudo L, Polaina J (2007) Таксономическая классификация дрожжей, выделенных из кефира, на основе последовательности их генов рибосомной РНК. Всемирный журнал микробиологии и биотехнологии 23: 785–791.
13. 13.Pintado ME, DaSilva JAL, Fernandes PB, Malcata FX, Hogg TA (1996) Микробиологические и реологические исследования португальских зерен кефира. Международный журнал пищевой науки и технологий 31: 15–26.
14. 14. Zhou JZ, Liu XL, Jiang HH, Dong MS (2009) Анализ микрофлоры в зернах тибетского кефира с использованием денатурирующего градиентного гель-электрофореза. Пищевая микробиология 26: 770–775.
15. 15. Magalhaes KT, Pereira GVD, Campos CR, Dragone G, Schwan RF (2011) Бразильский кефир: структура, микробные сообщества и химический состав.Бразильский журнал микробиологии 42: 693–702.
16. 16. Гао Дж, Гу Ф., Абделла Н.Х., Руан Х., Хе Дж. (2012) Исследование культивируемой микрофлоры в зернах тибетского кефира из разных районов Китая. Журнал пищевой науки 77: M425–433.
17. 17. Квак Х.С., Парк С.К., Ким Д.С. (1996) Биостабилизация кефира с помощью дрожжей, не ферментирующих лактозу. Журнал молочной науки 79: 937–942.
18. 18. Реа М.К., Леннартссон Т., Диллон П., Дринан Ф.Д., Ревилл В.Дж. и др.(1996) Ирландские кефироподобные зерна: их структура, микробный состав и кинетика ферментации. Журнал прикладной бактериологии 81: 83–94.
19. 19. Гарроте Г.Л., Абрахам А.Г., Де Антони Г.Л. (2001) Химическая и микробиологическая характеристика кефирных зерен. Журнал молочных исследований 68: 639–652.
20. 20. Tas TK, Ekinci FY, Guzel-Seydim ZB (2012) Идентификация микробной флоры в зернах кефира, произведенных в Турции, с помощью ПЦР. Международный журнал молочных технологий 65: 126–131.
21. 21. Wang SY, Chen HC, Liu JR, Lin YC, Chen MJ (2008) Идентификация дрожжей и оценка их распределения в тайваньских заквасках с кефиром и вили. Журнал молочной науки 91: 3798–3805.
22. 22. Garbers IM, Britz TJ, Witthuhn RC (2004) Электрофоретическая типизация денатурирующего градиентного геля на основе ПЦР и идентификация микробного консорциума, присутствующего в зернах кефира. Всемирный журнал микробиологии и биотехнологии 20: 687–693.
23. 23.Куигли Л., О’Салливан О., Бересфорд Т.П., Росс Р.П., Фицджеральд Г.Ф. и др. (2012) Высокопроизводительное секвенирование для обнаружения субпопуляций бактерий, ранее не связанных с домашними сырами. Прикладная и экологическая микробиология 78: 5717–5723.
24. 24. Масуд В., Такамия М., Вогенсен Ф.К., Лиллеванг С., Абу аль-Суд В. и др. (2011) Характеристика бактериальных популяций в датских сырых молочных сырах, приготовленных из различных заквасок, с помощью денатурирующего градиентного гель-электрофореза и пиросеквенирования.Международный молочный журнал 21: 142–148.
25. 25. Коянаги Т., Киёхара М., Мацуи Х., Ямамото К., Кондо Т. и др. (2011) Пиросеквенирование микробного разнообразия «наредзуси», архетипа современных японских суши. Письма по прикладной микробиологии 53: 635–640.
26. 26. Roh SW, Kim KH, Nam YD, Chang HW, Park EJ и др. (2010) Исследование разнообразия архей и бактерий в ферментированных морепродуктах с использованием пиросеквенирования со штрих-кодом. Журнал ISME 4: 1–16.
27. 27. Пак EJ, Chun J, Cha CJ, Park WS, Jeon CO и др. (2012) Анализ бактериального сообщества во время ферментации десяти репрезентативных видов кимчи с пиросеквенированием со штрих-кодом. Пищевая микробиология 30: 197–204.
28. 28. Сакамото Н., Танака С., Сономото К., Накаяма Дж. (2011) Исследование бактериального сообщества на основе пиросеквенирования 16S рРНК в нукадоко, засолке из ферментированных рисовых отрубей. Международный журнал пищевой микробиологии 144: 352–359.
29. 29.Humblot C, Guyot JP (2009) Пиросеквенирование ампликонов меченого гена 16S рРНК для быстрой расшифровки микробиомов ферментированных пищевых продуктов, таких как суспензии жемчужного проса. Прикладная и экологическая микробиология 75: 4354–4361.
30. 30. Добсон А., О’Салливан О., Коттер П.Д., Росс П., Хилл С. (2011) Высокопроизводительный анализ бактериального состава кефира и связанного с ним кефирного зерна на основе последовательностей. Письма о женской микробиологии 320: 56–62.
31. 31. Leite AM, Mayo B, Rachid CT, Peixoto RS, Silva JT, et al.(2012) Оценка микробного разнообразия зерен бразильского кефира с помощью ПЦР-DGGE и анализа пиросеквенирования. Пищевая микробиология 31: 215–221.
32. 32. Parvez S, Malik KA, Ah Kang S, Kim HY (2006) Пробиотики и их ферментированные пищевые продукты полезны для здоровья. Журнал прикладной микробиологии 100: 1171–1185.
33. 33. Czerucka D, Piche T, Rampal P (2007) Дрожжи как пробиотики — Saccharomyces boulardii. Пищевая фармакология и терапия 26: 767–778.
34. 34. Desreumaux P, Neut C, Cazaubiel M, Matthieu P, Fanny P и др. (2011) Saccharomyces Cerevisiae CNCM I-3856 уменьшает дискомфорт при пищеварении и боль в животе у субъектов с синдромом раздраженного кишечника: рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое клиническое испытание. Гастроэнтерология 140: S50 – S50.
35. 35. Foligne B, Dewulf J, Vandekerckove P, Pignede G, Pot B (2010) Пробиотические дрожжи: противовоспалительный потенциал различных непатогенных штаммов при экспериментальном колите у мышей.Всемирный гастроэнтерологический журнал: WJG 16: 2134–2145.
36. 36. Этьен-Месмин Л., Ливрелли В., Приват М., Дени С., Кардо Дж. М. и др. (2011) Влияние нового пробиотического штамма Saccharomyces cerevisiae на выживаемость Escherichia coli O157: H7 в динамической модели желудочно-кишечного тракта. Прикладная и экологическая микробиология 77: 1127–1131.
37. 37. You SJ, Cho JK, Ha CG, Kim CH, Heo KC (2006) Пробиотические свойства кефира Candida, выделенного из кефира. Журнал зоотехники 84: 310–310.
38. 38. Kumura H, Tanoue Y, Tsukahara M, Tanaka T, Shimazaki K (2004) Скрининг штаммов молочных дрожжей для применения пробиотиков. Журнал молочной науки 87: 4050–4056.
39. 39. Listemann H, Schulz KD, Wasmuth R, Begemann F, Meigel W (1998) Эзофагит, вызванный Candida kefyr. Микозы 41: 343–344.
40. 40. Куигли Л., О’Салливан О., Бересфорд Т.П., Росс Р.П., Фицджеральд Г.Ф. и др. (2012) Сравнение методов, используемых для извлечения бактериальной ДНК из сырого молока и сырого молочного сыра.Журнал прикладной микробиологии 113: 96–105.
41. 41. Lundberg KS, Shoemaker DD, Adams MWW, Short JM, Sorge JA, et al. (1991) Высокоточная амплификация с использованием термостабильной ДНК-полимеразы, выделенной из Pyrococcus-Furiosus. Gene 108: 1–6.
42. 42. Клаэссон М.Дж., Ван К., О’Салливан О., Грин-Диниз Р., Коул Дж. Р. и др. (2010) Сравнение двух технологий секвенирования следующего поколения для определения очень сложного состава микробиоты с использованием тандемных вариабельных участков гена 16S рРНК.Исследование нуклеиновых кислот 38: e200.
43. 43. Коул Дж. Р., Ван К., Карденас Э., Фиш Дж., Чай Б. и др. (2009) Проект базы данных рибосом: улучшенное выравнивание и новые инструменты для анализа рРНК. Исследование нуклеиновых кислот 37: D141–145.
44. 44. Буи М., Райх М., Мюрат С., Морин Э., Нильссон Р. Х. и др. (2009) 454 Пиросеквенирование лесных почв выявило неожиданно высокое разнообразие грибов. Новый фитолог 184: 449–456.
45. 45. Caporaso JG, Kuczynski J, Stombaugh J, Bittinger K, Bushman FD, et al.(2010) QIIME позволяет анализировать данные секвенирования сообщества с высокой пропускной способностью. Природные методы 7: 335–336.
46. 46. Pruesse E, Quast C, Knittel K, Fuchs BM, Ludwig W и др. (2007) SILVA: всеобъемлющий онлайн-ресурс для проверенных и согласованных данных о последовательностях рибосомных РНК, совместимых с ARB. Исследование нуклеиновых кислот 35: 7188–7196.
47. 47. Сантамария М., Фоссо Б., Консильо А, Де Каро Дж., Грилло Дж. И др. (2012) Справочные базы данных для таксономической классификации в метагеномике.Брифинги по биоинформатике 13: 682–695.
48. 48. Huson DH, Auch AF, Qi J, Schuster SC (2007) MEGAN анализ метагеномных данных. Исследование генома 17: 377–386.
49. 49. Chen VB, Davis IW, Richardson DC (2009) KING (Kinemage, Next Generation): универсальная интерактивная программа молекулярной и научной визуализации. Белковая наука: публикация Protein Society 18: 2403–2409.
50. 50. Юксекдаг З.Н., Беятли Ю., Аслим Б. (2004) Определение некоторых характеристик кокковидных форм молочнокислых бактерий, выделенных из турецких кефиров с натуральным пробиотиком.Lebensmittel-Wissenschaft Und-Technologie-Food Science and Technology 37: 663–667.
51. 51. Mainville I, Robert N, Lee B, Farnworth ER (2006) Полифазная характеристика молочнокислых бактерий в кефире. Систематическая и прикладная микробиология 29: 59–68.
52. 52. Motaghi M, Mazaheri M, Moazami N, Farkhondeh A, Fooladi MH и др. (1997) Производство кефира в Иране. Всемирный журнал микробиологии и биотехнологии 13: 579–581.
53. 53. Мигель МГДП, Кардосо П.Г., Лаго Л.Д., Шван Р.Ф. (2010) Разнообразие бактерий, присутствующих в зернах молочного кефира, с использованием методов, зависимых от культуры, и независимых от культуры.Food Research International 43: 1523–1528.
54. 54. Gonzalez-Sanchez F, Azaola A, Gutierrez-Lopez GF, Hernandez-Sanchez H (2010) Жизнеспособность микрокапсулированных Bifidobacterium animalis ssp lactis BB12 в кефире при хранении в холодильнике. Международный журнал молочных технологий 63: 431–436.
55. 55. Lopitz-Otsoa F, Rementeria A, Elguezabal N, Garaizar J (2006) Кефир: симбиотическое сообщество дрожжей-бактерий с предполагаемыми здоровыми способностями. Revista iberoamericana de micologia 23: 67–74.
56. 56. Хоксворт Д.Л. (2011) Новый рассвет для присвоения названий грибам: влияние решений, принятых в Мельбурне в июле 2011 г., на будущую публикацию и регулирование названий грибов. Гриб IMA: глобальный микологический журнал 2: 155–162.
57. 57. Kwon CS, Park MY, Cho JS, Choi ST, Chang DS (2003) Идентификация эффективных микроорганизмов из кефирного ферментированного молока. Пищевая наука и биотехнология 12: 476–479.
58. 58. Энгель Г., Круш Ю., Тойбер М. (1986) Микробиологический состав кефира.1. Дрожжи. Milchwissenschaft-Milk Science International 41: 418–421.
59. 59. Курцман К.П. (2003) Филогенетическое определение Saccharomyces, Kluyveromyces и других представителей Saccharomycetaceae, а также предложение новых родов Lachancea, Nakaseomyces, Naumovia, Vanderwaltozyma и Zygotorulaspora. Исследование дрожжей FEMS 4: 233–245.
60. 60. Montanari G, Zambonelli C, Grazia L, Kamesheva GK, Shigaeva MK (1996) Saccharomyces unisporus как основной микроорганизм спиртового брожения традиционного кумыса.Журнал молочных исследований 63: 327–331.
61. 61. Las Heras-Vazquez FJ, Mingorance-Cazorla L, Clemente-Jimenez JM, Rodriguez-Vico F (2003) Идентификация видов дрожжей из апельсиновых фруктов и сока с помощью RFLP и анализ последовательности гена 5.8S рРНК и двух внутренних транскрибируемых спейсеров. Исследование дрожжей FEMS 3: 3–9.
62. 62. Kurtzman CP, Robnett CJ (2003) Филогенетические отношения между дрожжами «комплекса Saccharomyces», определенные на основе анализа мультигенных последовательностей.Исследование дрожжей FEMS 3: 417–432.
63. 63. Мартини А.В., Курцман С.П. (1988) Связь дезоксирибонуклеиновой кислоты между видами Saccharomyces-Sensu-Lato. Микология 80: 241–243.
64. 64. Gadaga TH, Mutukumira AN, Narvhus JA (2001) Рост и взаимодействие дрожжей и молочнокислых бактерий, выделенных из зимбабвийского естественно ферментированного молока в UHT-молоке. Международный журнал пищевой микробиологии 68: 21–32.
65. 65. Миямото М., Сето Ю., Накадзима Х., Буренджаргал С., Гомбоджав А. и др.(2010) Анализ денатурирующего градиентного гель-электрофореза молочнокислых бактерий и дрожжей в традиционном монгольском ферментированном молоке. Исследования пищевых продуктов и технологий 16: 319–326.
66. 66. Стали Х, Джеймс С.А., Робертс И.Н., Стратфорд М. (1999) Zygosaccharomyces lentus: новые существенные осмофильные, устойчивые к консервантам порчи дрожжей, способные расти при низкой температуре. Журнал прикладной микробиологии 87: 520–527.
67. 67. Ли Б.К., Ким Дж.К. (2001) Производство биомассы Candida utilis на патоке в различных типах культур.Инженерия аквакультуры 25: 111–124.
68. 68. Кутинас А.А., Атанасиадис И., Бекатороу А., Иэкономопулу М., Блекас Г. (2005) Технология кефирных дрожжей: расширение производства SCP с использованием молочной сыворотки. Биотехнология и биоинженерия 89: 788–796.
69. 69. Абеллана М., Бенеди Дж., Санчис В., Рамос А.Дж. (1999) Влияние активности воды и температуры на прорастание и рост изолятов Eurotium amstelodami, E-chevalieri и E. herbariorum из хлебобулочных изделий. Журнал прикладной микробиологии 87: 371–380.
70. 70. Asiegbu FO, Adomas A, Stenlid J (2005) Корневая и стыковая гниль хвойных, вызванная Heterobasidion annosum (Fr.) Bref. s.l. Молекулярная патология растений 6: 395–409.
71. 71. Hansen K, LoBuglio KF, Pfister DH (2005) Эволюционные взаимоотношения рода Peziza и Pezizaceae чашеобразных грибов, выведенные из нескольких ядерных генов: RPB2, бета-тубулина и рДНК LSU. Молекулярная филогенетика и эволюция 36: 1–23.
72. 72. Hunter GC, Crous PW, Carnegie AJ, Wingfield MJ (2009) Teratosphaeria nubilosa, серьезный возбудитель болезни листьев Eucalyptus spp.в родных и интродуцированных областях. Молекулярная патология растений 10: 1–14.
73. 73. Renker C, Blanke V, Borstler B, Heinrichs J, Buscot F (2004) Разнообразие дрожжей Cryptococcus и Dioszegia (Basidiomycota), населяющих корни или споры арбускулярной микоризы. Исследование дрожжей FEMS 4: 597–603.
74. 74. Чанг Х.Дж., Миллер Х.Л., Уоткинс Н., Ардуино М.Дж., Эшфорд Д.А. и др. (1998) Эпидемия Malassezia pachydermatis в отделении интенсивной терапии, связанная с колонизацией домашних собак медицинских работников.Медицинский журнал Новой Англии 338: 706–711.
75. 75. Иванова Г., Момчилова М., Румян Н., Атанасова А., Георгиева Н. (2012) Влияние добавки дрожжей Saccharomyces boulardii на вкусовые и ароматические свойства кефира. Журнал Университета химической технологии и металлургии 47: 59–62.
76. 76. Chen TH, Wang SY, Chen KN, Liu JR, Chen MJ (2009) Микробиологические и химические свойства кефира, произведенного захваченными микроорганизмами, изолированными из зерен кефира.Журнал молочной науки 92: 3002–3013.
77. 77. Chen MJ, Liu JR, Lin CW, Yeh YT (2005) Изучение микробных и химических свойств кефира из козьего молока, полученного путем инокуляции зерен тайваньского кефира. Азиатско-Австралазийский журнал наук о животных 18: 711–715.

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.

---

Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

• В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить, хотите ли вы принимать файлы cookie.
• Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
• Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
• Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
• Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

---

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.

---

Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.