разобрать слово по составу НАЧИНАЕТ

Загадки.Не идёт, не скачет,А плывёт и плачет.​

1. Укажите варианты ответов, в которых во всех словах одного ряда пропущенабезударная чередующаяся гласная корня. Запишите номера ответов. 1) к…мфортн … ый, иск…ренить, отр…сль 2) зан…мать, угр…жать, р…скошный 3) разг…рается, изл…гать, бл…стать 4) фест…валь, зар…сли, пл…вчиха 5) водор…сли, зар…внять (канаву), подп…рающий 2. Укажите варианты ответов, в которых во всех словах одного ряда пропущена безударная непроверяемая гласная корня. Запишите номера ответов. 1) инт…ллeкт, к…ллизия, л…ндшaфт 2) м…тaфopa, об…лиcк, н…cтaльгия 3) п…paгpaф, сap…фaн, оп…саться 4) рев…зор, прот…кол, зам…реть 5) марм…лад, в…трина, ф…нтaн 3. Укажите варианты ответов, в которых во всех словах одного ряда пропущена безударная непроверяемая гласная корня. Запишите номера ответов. 1) б…калея, в…негрет, к…валерия 2) прид…рутся, вск…чить, приг…реть 3) инц…дент, г..ризонт, д…спансер 4) прив…легия, к_рнавал, экв_валент 5) к_рантин, ед…ница, кл…вета 4.

Укажите варианты ответов, в которых во всех словах одного ряда пропущена одна и та же буква. Запишите номера ответов. 1) чере..чур, бе…платно, ра…цвести 2) пр…бывать (в городе), пр…лечь, пр…возмочь 3) меж…нститутский, без…скусный, дез…нформация 4) меж…ядерный, пан…японский, пред…юбилейный 5) о…дать, о…таять, на…резать 5. Укажите варианты ответов, в которых во всех словах одного ряда пропущена одна и та же буква. Запишите номера ответов. 1) ра…граничить, не…держанный, бе…болезненный 2) сверх…емкий, сверх…чувствительный, раз…езд 3) с…митировать, от…грать, пред…стория 4) пр…вередливый, пр…оритет, пр…чудливый 5) в…оружиться, д…гнать, п…ставить

Помогите ребята пожалуйста с этим заданием!

Помагите пожалуйста!

Преодолев подъем, Даша спустилась к морю 4 Вода по-прежне-му была прозрачной. Сквозь нее в глубине можно было рассмот-реть растения подводного мира. В … зарослях водорослей проноси-лись непуганые стайки рыбешек, молниеносно исчезавших из виду.Слева она увидела огромный камень, обвешанный водорослями.

Вдоль берега тянулось углубление, заполненное водой. Қаза-лось,это была та же ямка, в которой девочка когда-то нашла ка-мень удивительной формы.«Впервые оказавшись здесь, Даша, покачивая ручонками, снача-ла опустила одну, затем другую ногу и на цыпочках вошла в воду.Не заходя вглубь, нагнувшись над отшлифованными морским при-боем камнями, в течение нескольких секунд в ничем не нарушае-мой тишине она наблюдала за хорошо видимой подводной жизнью.Тут-то она и заметила его. Бледно-голубой камень с прожилками,будто искусно нарисованными художником, поразил ее. (116 слов)Сказать о постановке запятой.Сделать все разборы где стоят чыфры вылить причасные и диипричасные обороты ​

Из подчинительной связи УПРАВЛЕНИЕ образуйте СОГЛАСОВАНИЕ. Впишите правильный ответ строчными буквами яхта с парусом — ______

Из подчинительной связи СОГЛАСОВАНИЕ образуйте УПРАВЛЕНИЕ. Впишите правильный ответ строчными буквами деревянная ложка — ______

Из подчинительной связи ПРИМЫКАНИЕ образуйте УПРАВЛЕНИЕ. Впишите правильный ответ строчными буквами трудно говорить — ______

Сделайте пожалуйста ↓ Впишите правильный ответ (одно слово или сочетание слов), чтобы закончить данное утверждение. Члены предложения делятся на _____ … _ ,которые выражены словами определённых частей речи.

Выберите все предложения с вводными словами (знаки препинания не расставлены). Ответ запишите в виде числа (номер предложения) ↓ 1)Старший лейтенант к … азалось совсем забыл о транспорте. 2)А может быть и то: поэта обыкновенный ждал удел. 3)С одной стороны полковник был человеком решительным неразговорчивым суровым на вид с другой стороны ему свойственна была исключительная мягкость в обращении с подчиненными. 4)Быть может он для блага мира иль хоть для славы был рожден. 5)Красивое безбородое лицо мужика извозчика казалось печальным и хмурым. 6)Онегин я тогда моложе я лучше кажется была. 7)С одной стороны безмолвствовали горы с другой стороны шумело разбиваясь о камни море. 8)Порою мне казалось что я погружаюсь в некую глубину.

9)Правда глаза колет. 10)Правда в этом месте дорога круто сворачивала в противоположную сторону а перед ним во всю ширь степи лежала снежная пелена. 11)В полной темноте видно было плохо. 12)Здесь видно была раньше кладовая.

Разбор слова по составу. 2 класс — Республикалық білім порталы

Краткосрочное планирование открытого урока по русскому языку
Сквозная тема: Моя школа.
Школа: начальная школа сад №31
Дата:. ФИО учителя: Байдуллаева Ж
Класс: 2 « _» класс. Количество присутствующих: —
отсутствующих: —
Лексическая тема: История школьных вещей.

Тема урока: Разбор слова по составу. (Повторение).
Цели обучения, которые достигаются на данном уроке (ссылка на учебную программу):
2.1.1.1 определять с помощью учителя опорные слова, фиксировать их; отвечать на закрытые вопросы.
2.2.3.1 формулировать вопросы с опорой на ключевые слова, отвечать на вопросы по содержанию прочитанного
2.3.8.2 определять значимые части слова, выделять корень в слове и подбирать однокоренные слова.
Развитие
навыков: 1.1 Понимание содержания информации/ сообщения
2.3 Формулирование вопросов и ответов
3.8 Соблюдение грамматических норм.
Критерии успеха (Предполагаемый результат): Все учащиеся смогут:
Повторить значимые части слова.
Большинство учащихся смогут:
Определять опорные слова и отвечать на закрытые вопросы самостоятельно.
Находить информацию по двум источникам.
Выделять значимые части слова.
Подбирать однокоренные слова.
Подбирать слова к схемам.
Некоторые учащиеся смогут:.
Составить и разыграть ситуации общения.
Записать рекомендации учащимся.
Языковая
цель Основные термины и словосочетания:
Состав слова, части слова, приставка, корень, суффикс, окончание, одноко-
ренные слова, родственные слова, вопрос, текст, стихо-
творение, предложение, упражнение, ответ.
Используемый язык для диалога/письма на уроке:
Вопросы для обсуждения:
Какое значение может иметь слово “состав”?
-А как вы думаете,что же такое Словообразование?
Что вы знаете о происхождении линейки?
Привитие
ценностей Ценности, основанные на национальной идее «Мәңгілік ел»: казахстанский патриотизм и гражданская ответственность; уважение; сотрудничество; труд и творчество; открытость; образование в течение всей жизни.
Межпредметные
связи – литература
– самопознание
– трудовое обучение
Навыки
использования ИКТ На данном уроке учащиеся не используют ИКТ
Предварительные
знания Звуки и буквы, гласные и согласные звуки, печатные и рукописные буквы,
алфавитные названия букв, слог, язык – средство человеческого общения,
высказывание, текст, языковые и неязыковые средства общения, устная и
письменная речь, предложение, прописная буква в начале предложения и в
именах собственных, сила голоса и темп речи, алфавитный порядок слов,
перенос слов, ударные и безударные гласные, мягкий знак на конце и в се-
редине слов, твердые и мягкие согласные, правописание жи-ши, ча-ща, чу-
щу, чк, чн, нщ, рщ, шн, звонкие и глухие согласные, звук [й], разделитель-
ный Ь, состав слова, окончание, корень, приставка, суффикс, родственные
и однокоренные слова.
Ход урока
Этапы урока, t Запланированная деятельность на уроке
Ресурсы

Начало урока
0-4 Создание положительного эмоционального настроя

Громко прозвенел звонок,
Начинается урок.
Наши ушки на макушке,
Глазки широко открыты,
Слушаем, запоминаем,
Ни минутки не теряем!
— Я рада видеть всех вас на уроке. Давайте, друзья, улыбнемся друг другу! Улыбки подарим гостям! К уроку готовы? Я рада! Желаю успехов всем нам!

5-10 мин Актуализация знаний. Целеполагание.
Цель: ввод ситуации для открытия и постановки целей
урока.
(П, И)
На доске: Р, С, М, Л, О, С, Ц, Т, А, Н, Х, В, Щ
Учитель просит учащихся убрать не парные согласные и прочитать главное слово нашего урока.
Какое значение может иметь слово “состав”?
1. Железнодорожный состав.
2. Состав – структура, строение.
Но мы на уроке русского языка. Состав чего мы можем изучать?
Тема нашего урока – состав слова. (Учитель открывает тему урока на доске)
Какие задачи поставим перед собой и будем решать на уроке?

Ученик: Повторим все, что знаем о частях слова.
Постановка задач:
-Скажите, это урок новых знаний или урок повторения?
• Что вы должены знать ?
• Алгоритм разбора слов по составу.
• Как находить корень, суффикс, приставку слова.
• Что вы должены уметь?
• Разбирать слова по составу.
Критерии успеха Учащиеся с помощью учителя формулируют тему урока.

Середина урока
11-20 мин

21-22 мин Работа по теме урока.
Цель: выполнение практических заданий.
(К, И) Минутка чистописания
Ученики пишут запись слова «состав» с соблюдением высоты,ширины и наклона прописных и строчных букв,их соединений.
Учитель:
— Сегодня у нас необыкновенный урок. Это будет урок — приключение, полное неожиданностей. Мы отправимся в путешествие к планетам знаний в галактику Словообразования.
-А как вы думаете,что же такое Словообразование?

-Что он изучает?
— Из чего же состоят слова?(из корней,приставок,суффиксов,окончаний)
-Слова сделаны из своего « строительного материала»,»строительные блоки» для слов называются МОРФЕМАМИ.
Дети берутся за руки .
В космосе так здорово!
Звёзды и планеты
В чёрной невесомости
Медленно плывут!
В космосе так здорово!
Острые ракеты
На огромной скорости
Мчатся там и тут!

1 планета –планета Корней
В гости к — Корней Корнеевичу.
— Как вы думаете, с какая морфема живет на этой планете? ( появляется Корень с заданиями)
Корней Корнеевич предлагает конверт с заданиями и вопросами
1)- Что такое корень? Как правильно выделить в слове корень?
2)– Посмотрите на эти необычные деревья. Какие слова могли бы «вырасти» на них? (На доске изображены деревья, в корнях которых даны слова лес, сад,ход,рыба,дом.) Ребята работают в группах..

— Напишите эти слова. (Две группы работают на задней стороне доски) Сколько веток «выросло» на вашем дереве? Давайте проверим ребят у доски
. (Д, К) Пальчиковая физминутка.
На моей руке пять пальцев,
Пять хватальцев, пять держальцев.
Чтоб строгать и чтоб пилить,
Чтобы брать и чтоб дарить.
Их не трудно сосчитать:
Раз, два, три, четыре, пять.
(Сплести пальцы рук, соединить ладони и стиснуть их как можно сильнее.
Потом опустить руки и слегка потрясти ими.)
Работа по учебнику.
(К, И) Упр. 15.
Ученики находят лишнее слово (линь) и объясняют
свой выбор; выписывают однокоренные слова; выделяют корень.

— Молодцы, ребята! Вы так хорошо справились с заданием. А нам пора двигаться дальше.
Тетрадь
Запись буквы Сс
Запись слова «состав»

Изображение деревьев

Учебник

23-26 мин
Дети берутся за руки ,читают стих о космосе
Планета Приставок.

В гости к приставке . (появляется Приставка с заданиями в конверте )
— Расскажите, что вы знаете о приставке как части слова?
Выполнение заданий в парах С взаимопроверкой

Работа по теме урока
Цель: выполнение практических заданий.
Работа с учебником
(Г) упр 17. учащиеся подбирают слова к схемам.
— Молодцы, ребята! Вы так хорошо справились с заданием. А нам пора двигаться дальше.

Конверт с заданиями

Задания для
парных работ
карточки.

Учебник

26-35 мин Планета Суффиксов.(появляется Суффикс с конвертом заданий)
— Расскажите, что вы знаете о суффиксах. Какую «стро¬ительную» работу они выполняют? (Образуют новые слова: придают словам различные смысловые оттенки. )
(П.И.)

(Д, К) Физминутка для глаз. Буратино
Предложить детям закрыть глаза и посмотреть на кончик своего носа. Учитель медленно считает до 8. Дети должны представить, что их носик начинает расти, они продолжают с закрытыми глазами следить за кончиком носа. Затем, не открывая глаз, с обратным счетом от 8 до 1, ребята следят за уменьшением.
(Дети закрывают глаза ладонями, держат их так до тех
пор, пока не почувствуют глазами тепло от рук.)
Раз, два, три, четыре, пять – можно глазки открывать!

— Отлично! Вы так хорошо справились с заданием. А нам пора двигаться дальше на планету Окончаний.

Планета Окончаний. Встреча с Окончанием
-Расскажите что вы знаете об окончаниях?

Задание:
-Догадайся , какие окончания пропущены.Выдели окончания.
ХИТРЫЕ САНКИ

Мои санк едут сам ,
Без мотор , без кон ,
То и дел мои санк
Убегают от мен .

(П) Учащиеся выбирают правильный порядок разбора
слов по составу. Упр. 21.
Объясняют, почему нужно выполнять разбор слова по порядку. ,
(И) Подобрать к соответствующей схеме слово и записать в тетради.
Прощаются с Окончанием, благодарят за интересные задания, возвращаются в класс.

Самостоятельная работа на карточках

Физминутка

Тетрадь

Учебник
Критерии успеха Учащиеся составляют новые слова из частей данных слов;
записывают их и разбирают по составу .
(К, И) Учащиеся рассказывают по схеме о частях слова.
Конец урока
36-37 мин
-Я поздравляю вас с окончанием путешествия.Вы проявили себя знающими и любознательными путешественниками,хорошо работали на уроке.
— А теперь подведём итог нашего урока.
— Над чем мы сегодня работали? Что повторяли сегодня на уроке?
— Чтобы разобрать слово по составу, нужно выделить,?
— Что понравилось на уроке?
38-40 Цель: оценка уровня усвоения навыка по теме.
Итог урока. Рефлексия.
Итог урока
На доску вывешиваются маршрут полёта по галактике.
— если вам все понравилось давайте украсим нашу галактику звездами,так как скоро 16 декабря день Независимости РК вся наша страна будет праздновать этот знаменательный день,так пусть же и на нашей вселенной тоже будет отражатся праздничная атмосфера.
— Если вам все было по плечу на уроке выберите зелёную звезду.
— Если вам было все понятно выберите голубую звездочку
— А если вам на уроке было немного трудно ,то выберите красную звёздочку.

Звездочки.
Критерии успеха
Дифференциация
Оценивание
Здоровье и соблюдение техники безопасности
Способные учащиеся строят свои высказывания, а менее способным учитель оказывает поддержку,задавая наводящие вопросы Формативное оценивание.

— Взаимооценивание при работе в паре, группе, классом.
— Результаты наблюдения учителем качества ответов учащихся на уроке.
Определение уровня усвоения навыка по теме . Физминутка для глаз. Буратино
Предложить детям закрыть глаза и посмотреть на кончик своего носа. Учитель медленно считает до 8. Дети должны представить, что их носик начинает расти, они продолжают с закрытыми глазами следить за кончиком носа. Затем, не открывая глаз, с обратным счетом от 8 до 1, ребята следят за уменьшением.
(Дети закрывают глаза ладонями, держат их так до тех
пор, пока не почувствуют глазами тепло от рук. )
Раз, два, три, четыре, пять – можно глазки открывать!

Урок русского языка по теме «Разбор по составу глаголов». 4-й класс

Задачи:

• Формировать умение разбирать по составу слова, принадлежащие к разным частям речи.
• Познакомить с суффиксами глагола, которые не входят в основу слова.
• Закреплять умение разбирать глаголы по составу.

Оборудование:

• Учебники: М.Л.Каленчук, Н.А.Чуракова, Т.А.Байкова Русский язык 4 класс, 3 часть; М.Л.Каленчук, Н.А.Чуракова, О.В.Малаховская Русский язык 4 класс, 2 часть/Изд-во Академкнига/Учебник.
• Тетрадь с печатной основой: Т.А.Байкова Русский язык 4 класс, 2 часть.
• Заготовки опорных таблиц «Порядок разбора глагола» http://files.school-collection.edu.ru/dlrstore/1294a0b7-487d-4a39-b436-a28836c47aab/%5BNS-RUS_4-16%5D_%5BTQ_039%5D.swf (Приложение 1).
• Презентация «Разбор по составу глаголов» (Приложение 2)

Ход урока

I. Организационный момент.

II. Актуализация знаний учащихся о частях речи, о составе слов.

1. Картинный диктант (капуста, морковь, картофель), (можно использовать галерею интерактивной доски, если есть возможность).

– Запишите слова в столбик (1 человек у доски).

– Поставьте ударение, подчеркните букву, которую нужно запомнить.

2. Классификация слов.

– Что общего у этих слов? (ударение падает на первый слог, относятся к группе ОВОЩИ, часть речи – существительное).

– Разберите их по составу. Что можно сказать о составе? (состав слов одинаковый)

– Какая схема соответствует составу этих слов? (1 человек чертит схему на доске: )

– Какие постоянные признаки можем определить у существительных? (род, склонение) Укажите их.(1 человек у доски).

Какое слово может быть лишним? Почему? (картофель – мужского род; морковь начинается с буквы М, запоминаем букву О; капуста – нет в написании Ь).

– Чем различаются слова? (склонением)

3. Словообразование прилагательных.

– От данных слов образуйте прилагательные и запишите их рядом с существительными. (у доски работу продолжает другой ребёнок)

На доске:

Капуста  капустный
Морковь – морковный
Картофель – картофельный

– Разберите их по составу. С помощью какой части слова образовались прилагательные? (с помощью суффикса)

– Что называется суффиксом?

– Кто сможет назвать, как называется данный способ образования слов? (суффиксальный)

– Покажите стрелкой, какое слово дало жизнь другому.

На доске:

Капуста —> капустный
Морковь —> морковный
Картофель —> картофельный

III. Проблемная ситуация.

– Как вы думаете, эти слова к какой части речи относятся?

На доске:

– Как вы догадались? (по суффиксам и окончаниям) Что называется глаголом?

IV. Постановка учебной задачи.

– С какой частью речи мы будем работать на уроке? (ответы детей)

– Глядя на схемы, определите, чему будем учиться на уроке? (разбирать глаголы по составу)

V. Сообщение темы урока.

Разбор по составу глаголов (Приложение 2, слайд 2)

VI. Работа над новым материалом.

а) проблемная ситуация

Чтение интриги учебника 3 часть стр. 60

б) работа с правилами и заполнение таблицы (работа с учебником 3 часть стр.60-61)

– С чего начинаем разбор глаголов? (слайд 3) (выделить суффиксы -СЯ, -СЬ, если они есть)

1. Выделить -СЯ, -СЬ. (слайд 4)

– Что должны определить дальше? (Определить, в какой форме стоит глагол)

2. Определить, в какой форме стоит глагол.(слайд 5)

– Читаем первый пункт правила и заполняем таблицу.(слайды 6, 7)

– Вспомните сами, что выделяем дальше во всех глагольных формах? (основу) (слайд8)

– Читаем второй и третий пункт правила. Закончите заполнение таблицы сами. (проверка – слайды 9, 10)

в) проблемная ситуация

– Можете ли вы определить, в какой форме стоят глаголы?(возвращение к записи со схемами на доске)

– Найдите ошибки в разборе.(исправляют ошибки у доски)

г) подбор глаголов к схеме и разбор по составу

– Пользуясь словарём, подберите слова к схемам. Каким словарём нам удобно пользоваться?(обратным)

– В словаре есть подсказка, глагольные суффиксы маркированы синим цветом.

– Все слова в словарях в какой форме? (в начальной форме)

– Значит, к каким схемам сможем подобрать слова? (к 1, 3, 4)

– Запишите слова к этим схемам, разберите их по составу.(у доски могут работать от 1 до 2 человек в зависимости от места на доске и от способностей учащихся; остальные ученики могут работать в парах )

– К пятой схеме Маша подобрала слово читали и разобрала его вот так:

– Согласны ли вы? Почему?

д) работа с учебником

– Чтобы ответить на этот вопрос, откройте учебник на странице 62 и прочитаем, какой разговор происходил на уроке в селе Мирном.

Запись в тетрадь: (слайд 11)

читаю
читать
читал

е) чтение правила на стр.62 учебника

– Так почему Маша разобрала так? (суффикс – Л – в основу не входит)

YII. Закрепление изученного материала

а) Упражнение 54 на стр. 61 учебника (работа выполняется по цепочке с комментированием у доски)

б) Самостоятельная работа (можно взять текст из упр.181 на стр. 180 учебника)

– Из данного текста выпишите глаголы, разберите их по составу.(слайд 12 )

– Кто справится с работой раньше, запишите первое предложение, разберите его по членам предложения. Укажите части речи.

VIII. Домашнее задание

– Дома выполнить упр.28 на стр. 31-32 тетради, карточку-опору наклеить на картон.

IX. Обобщение

– Чему учились на уроке?

– Что узнали нового? (слайд 13)

– Поднимите руку тот, кто понял, как нужно разбирать глаголы по составу.

X. Итог урока

– Кто доволен своей работой, поаплодируйте себе.(варианты рефлексии могут быть разные) (слайд 14)

Контрольные работы по русскому языку 4 класс

Стартовая контрольная работа по русскому языку 4 класс

Диктант.

Скучная картина.

Пришла ненастная осенняя пора. Леса редеют и пустеют. Там стоит тишина. Только тяжелая мокрая ворона садится на голую ветку и кричит. Галки летают стаями. Частый дождик мочит землю. Она выглядит уныло под темным серым небом.

Потянулись с севера на юг длинные караваны гусей, уток, журавлей. Летят они цепью или клином.

Грамматические задания

Разобрать предложение5 по членам, указать части речи

1в. – 1 предложение;

2в. – 6 предложение

Разобрать по составу слова

1в. – осенняя, ветка, улетают

2в.- летние, дождик, выглядит

Записать однокоренные слова с корнем

1в. – дом

2в. – свет.

Текущая контрольная работа № 1

по теме «Морфологический разбор имени существительного».

Диктант.

Ягодные адреса.

Ягоды растут по разным адресам. Красная душистая земляника созревает на лесной опушке или солнечном пригорке. Черника зреет у корней лохматой ели. Сладкая малина растет на вырубке или в овраге. Кислая осенняя ягода клюква поспевает на болоте. Тоненькие стебельки протянулись по моховому ковру. На каждой ниточке лежат ягодки, словно бусы. Бруснику надо искать в ельнике. Эта поздняя осенняя ягода растет на низком кусте с плотными блестящими листочками.

Задания.

Разобрать предложение по членам:

1 в. – 1 предложение.

2 в. – 3 предложение.

Сделать морфологический разбор имени существительного:

1 в. – по адресам.

2 в. – у корней.

Разобрать слова по составу:

1 в. – лесной, пригорке, сладкая.

2 в. – осенняя, вырубке, тоненькие.

В последнем предложении найти имена прилагательные, выделить в них окончания.

Итоговая контрольная работа № 2

по итогам 1 четверти.

Диктант.

Поспевают овощи.

Дни стоят ненастные. Ночи стали холодными. По утрам бывают лёгкие морозцы. Овощи могут замёрзнуть. Спелые овощи люди начали снимать с полей и огородов.

Убрали огурцы. Потом очередь за луком. Выдернули морковку, редьку, петрушку. Остаётся на полях капуста.

В октябре копают картофель. Просушили и увезли с полей. Положили в погреб. Пусть лежит там в темноте. Отобранные клубни оставляют на семена.

Грамматические задания:

Подчеркнуть однородные члены предложения.

Сделать синтаксический разбор предложения:

1в. – 3 предложение;

2в. – последнее предложение.

Произвести разбор слова по составу

1в. – холодными, морковку, выдернули;

2в. – лёгкие, морозцы, просушил.

Диктант

по теме «Глагол как часть речи»

Помоги другу!

На улице лютый мороз. Метель заметает дорожки. Ты сидишь в тепле и готовишь уроки. Вдруг слышишь в стекло тоненький стук. За оконной рамой ты видишь птичку. Синичка ходит по снежку. Через стекло на тебя смотрят глазки-бусинки. Птица просит о помощи. Бедняжка сильно голодает.

Кто поможет синичке выжить в зимнюю пору?

Ты открываешь форточку, бросаешь горстку зерна. Потом отрезаешь сало и привязываешь кусочки за окном. Птичка отплатит тебе добром. В твоем огороде не будет вредителей. Ты встретишь весну с радостной песней птиц.

Задания:

В тексте подчеркнуть глаголы.

Разобрать предложение по членам:

1в. – 5предложение;

2в. – 13предложение.

Разобрать слова по составу:

1в. – дорожки, тоненький, готовишь;

2в. – синичка, радостной, видишь.

Текущий диктант

По теме «Спряжение глаголов»

Диктант.

В апреле.

Апрельское солнце светит ярко. Тает последний снег. Первые стрелочки зеленой травки прорезают весеннюю землю. Мягкий ветерок гонит, торопит облака. На гибких ветвях берез появилась нежная листва.

Все в природе дышит, начинает расти.

Уже оттаял муравейник под старой сосной. Вот по пашне ходит усталый после дальней дороги грач.

Ты шагаешь к реке. Ты убегаешь на опушку леса. Смотришь в небо, как летят с далекого юга журавли, лебеди, гуси. Они держат путь в родные места. Скоро мы услышим песни прилетевших с юга птиц.

Грамматические задания:

1в. – в 1 абзаце указать лицо и спряжение глаголов, выделить окончания;

2в. – в последнем абзаце указать лицо и спряжение глаголов, выделить окончания.

Разобрать предложение по членам:

1в – 1 предложение;

2в – 10 предложение.

Разобрать слова по составу:

1в – апрельское, стрелочки, убегаешь.

2в – муравейник, весеннюю, услышим.

Текущий диктант

По теме «Правописание глаголов»

Диктант.

Река стала.

Было чудесное утро. Мороз сковал реку. К речке побежали мальчишки со всей деревни. Ребята подняли радостный крик. Для проверки льда бросали камни и палки. Лёд был крепкий.

Трое ребят стали бегать по самой середине речки. Лёд был скользкий. Один мальчик упал. На него упали другие. Лёд не выдержал тяжести. Дети очутились в воде. Они цеплялись за тонкий лёд. Скоро совсем выбились из сил.

Вдруг появился мужчина. Он пополз по льду и толкал впереди себя длинную доску. Ребята ухватились за край доски. Это было спасение.

Грамматические задания.

Разобрать предложение по членам, над каждым членом указать часть речи:

1в – 4 предложение;

2в – предпоследнее предложение.

Написать глаголы-исключения

У глаголов определи вид, наклонение, время, лицо, число, род

1в – выдержал;

2в – сковал.

Диктант

По теме «Правописание глаголов»

Окраска животных.

Животных защищает цвет. Зимой заяц-беляк вместо бурого стал белым. Катит по снежной дорожке комочек. Не видит его в белом поле лисица.

Рябчик весь рябой. На спинке полоска. Прижался к земельке. Не заметишь в листве.

На тигриной шкуре нарисованы длинные полосы. Летом хищника не увидишь в тростнике.

Морского конька трудно разглядеть среди зелени травы. Он меняет цвет. Осветит луч солнца морскую траву. Конек позеленеет. Зайдет солнце за горизонт. Вода в море потемнеет. И конек потемнел. Зацепился за травинку. Волны качают его взад и вперед.

Грамматические задания.

В последнем абзаце у глаголов выделить окончания, определить спряжение.

Разобрать предложение по членам:

1в. – 3 предложение;

2в. — 10 предложение.

Разобрать слова по составу:

1в. – тигриной, полосочка, потемнеет.

2в – снежной, травинку, увидишь.

Текущий диктант

по теме «Наречие».

Диктант.

Зайчик.

Маленького зайца сильно потрепали вороны. У зайчишки была сломана лапка. Она болталась.

Мы принесли беднягу домой. Заяц бился в руках и вырывался.

Папа достал бинт и завязал ножку. Мы посадили зайчика в ящик. Мама положила туда сена, морковку. Она поставила мисочку с водой.

Зайка прожил у нас целый месяц. Мы ухаживали за зверьком. Ножка зажила. Зайчик стал выпрыгивать из ящика.

Тут и зима пришла. Выпал пушистый снег под цвет зайкиной шубки. Теперь его можно было выпускать в лес. Так мы и сделали.

Грамматические задания:

Разобрать предложения по членам, указать части речи:

1в – 1 предложение;

2в – 10 предложение.

Найти в тексте наречия и подчеркнуть их как члены предложения.

Разобрать слова по составу:

1в – маленького, зайчишки, принесли.

2в – пушистый, мисочку, сделали.

Итоговый диктант по итогам 3 четверти.

Диктант.

Удивительное дерево.

В Сибири растёт кедр. Он достигает в высоту сорока метров. Это ценное хвойное дерево. Из него делают посуду, мебель.

В посуде из древесины кедра неделями не киснет молоко. В прекрасной мебели из кедра не заводятся вредные насекомые.

Сколько шишек созревает к осени на кедре! Люди мешками собирают кедровые шишки. Из них добывают орешки. Крепкие шишки трут на особой тёрке. При этом орехи остаются целыми. Их отделяют от шелухи. В урожайный год в кедровнике поспевают тонны орехов. Из них делают полезное масло.

Грамматическое задание.

Разобрать предложение по членам, определить части речи.

1в – 8 предложение;

1в – 10 предложение.

Выписать однокоренные слова с корнем кедр-;

Разобрать слова по составу:

1в – кедровые, орешки, урожайный;

2в — прекрасной, ценное, хвойное.

Просклонять по падежам слова:

1в – посуда;

2в – мебель.

Итоговый контрольный диктант за 1 полугодие.

Диктант.

Снежинки.

Снежинки родились в снежной тучке. Полетели они к земле белой стаей.

В деревнях и селах им обрадовались. Ведь снег бережёт от стужи всходы озимых хлебов. Можно быстро мчать по гладкому санному пути.

В городе против снежинок повели борьбу. Счищали снег лопатами, мели метлой, увозили на машине. На улице чернел асфальт. Ясно, что на трамвае, легковой машине, на автобусе трудно ездить по снежной дороге.

Зато и в городах, и в деревнях детвора лепила из снега снеговиков, снежинок, снегурок.

Грамматические задания.

От глаголов образовать формы прошедшего, настоящего и будущего времени:

1в – мчать –

2в – ездить — ;

Разобрать предложение по членам, определить части речи:

1в – 2 предложение;

2в – 1 предложение.

Разобрать слова по составу:

1в – снежинки, гладкому, повели;

2в – снеговиков, санному, лепила.

Записать однокоренные слова с корнем снег – (снеж-)

Адрес публикации: https://www.prodlenka.org/metodicheskie-razrabotki/177627-kontrolnye-raboty-po-russkomu-jazyku-4-klass

Как разобрать русского рокера по составу

«На первом уроке у меня дрожал листочек в руках»

— Вы помните ваш первый урок? Как заходите в класс, и у вас коленки дрожат?

— Разумеется, дрожало всё, не только коленки. Дрожал листочек в руках, причем такой крупной дрожью, что я делала им какие-то паралитические движения, чтобы этого не было видно. Меня потом пародировали в каком-то классе: я сворачивала листочек с конспектом, который, разумеется, выучила наизусть, ходила и размахивала им, потому что если я руку остановлю, то она будет трястись слишком уж очевидно. Я махала листами, что я с ними только не делала – это какие-то танцы были! До сих пор выпускники приходят и дразнят меня, показывают, как я тогда отплясывала с распечатками…

 

— А думали тогда про то, как бы так извернуться, чтобы детям было интересно? Сейчас без этого в современной школе, кажется, невозможно.

— Я пришла работать на пятом курсе. Единственный вопрос, который передо мной тогда стоял: как я выйду перед группой из тридцати детей? Это была дикая паника, поэтому как их заинтересовать, какие методики применять, – я не помнила вообще ничего. Меня этому учили четыре года, у меня была методика преподавания литературы и русского, которые я прогуливала, потому что это было невыносимо скучно. Мы писали конспекты уроков и анализы учебников, причем учебники, разумеется, устарели, а конспекты уроков списывались с готовых конспектов.

У меня работает в лицее мама, но у нас не принято в семье, чтобы я спрашивала, как мне преподавать. Материал собирала сама по сетям и по учебникам, которые внушали мне доверие, до сих пор так работаю. Я беру учебник и вынимаю из него самое-самое неизбежное, что необходимо для экзаменов или составляет школьный стандарт. Дальше я начинаю делать так, чтобы интересно было мне.

Вот приходят ребята, которые учатся не у меня, и спрашивают: «Что вы проходите по литературе?» – «Мы проходим О.Генри». Они говорят «понятно», уходят и через неделю приходят с книжкой О.Генри. Я говорю: «О, вы тоже проходите О.Генри?» «Нет, мы проходим «Снегурочку»… Им нужен какой-то дополнительный список.

Я тоже должна была уже пройти «Снегурочку», но мне скучно, поэтому ей достается минимум времени, а остальное я трачу на О.Генри, Э.А.По, Конан Дойля. Единственное, чем я могу заинтересовать, ― взять что-то, что интересно мне.

— А вы в голове схемы выстраивали «Сейчас я зайду и скажу вот это»? «А если они сделают так, то я скажу вот это»?

— Обязательно. Правда, эти планы и схемы очень редко произносятся так, как написаны… Но я стараюсь. Например, я считала, что мне нужно зайти и напугать детей сразу и сильно. Вот так я заходила, и на первом уроке в каждом из восьмых классов на 45 минут читала лекцию о том, за что я буду карать безбожно. Я очень была убедительна в этой роли, по-моему. И до сих пор, пожалуй, этой «методикой» пользуюсь.

— За что карать предполагалось?

— Нет книжки на уроке. Мы проходим какое-то произведение, текста нет – не готов к уроку, до свидания. Или сочинение списано. Это не «два», потому что «два» ―это ты попробовал, но у тебя совсем не получилось. Когда ты даже не пробуешь, это «единица», которая не исправляется. Я проверяла на Антиплагиате сочинения, и какие-то особенно кучерявые фразы забивала в поисковик и действительно очень много плохих оценок выставляла, поэтому в девятом мне было полегче. Они перестали пользоваться чем бы то ни было, как своим.

А на русском языке я обычно стращаю… даже не знаю… Главная провинность — неуважение к языку.

«Читер – это тот, кто играет не по правилам»

— Что стоит за этими словами – «неуважение к языку»?

— Когда слова употребляются не в том контексте, в котором они должны звучать, или когда со словами не аккуратны. Например, если человек говорит, что ему наврали, хотя ему не врали. Или когда он употребляет слово «предательство», а такого и близко не было. Я в таких случаях начинаю злиться и читать лекцию о том, как важно выбирать слова. Еще я злюсь, когда кто-то говорит, что в языке надо так-то и больше никак. Язык – это живое существо, которое проходит путь эволюции, как любое другое. Уместно, не уместно – да, вопрос контекста – да, но в языке нет такого, чтобы что-то было нельзя. Я зык сам решает, что ему можно. Например, учить ребенка, что правильно только аэропорты, а аэропорта нельзя – это дикая узость. Надо обязательно оговариваться, что речь о литературной норме. А есть социолект, профессиональный сленг, где уже «нельзя» будет аэропорты, а то засмеют ведь.

— А молодежный сленг – это неуважение?

— Нет. В языке масса пластов. Не употреблять сленг? Я сама употребляю сленг. Язык ― это мешанина. Например, я очень люблю слово «читер», мне кажется, оно многое выражает. А ещё люблю слово «спойлер», потому что у него масса контекстов.

— Что такое «читер»?

— Это слово обозначает человека, который находит лазейку в правилах и умудряется выкрутиться на грани нарушения и выполнения закона. Читер – тот, который играет не совсем по правилам (или совсем не по правилам), но ему это сходит с рук. Вообще читер – это слово с негативным смысловым оттенком. Читерить плохо. Наверное, изначально это геймерский сленг.

Например, я говорю, что, согласно правилу, в таких-то случаях пишется слитно, а в таких-то ― раздельно, и случаев раздельного написания меньше. Здесь можно считерить – выучить только раздельное, а все остальное будет писаться слитно.

— Так вы на уроке и говорите «можно считерить», и вас все понимают?

— Да, разумеется, потому что они на этом сленге общаются. Или когда кто-нибудь делает домашнее задание и вместо одного предложения на каждое слово пишет одно предложение на три слова. Я попросила минимальный контекст дать для каждого слова – и у всех получилось десять предложений. А кто-то написал шесть, но все десять слов в нем сыграли. Я говорю: «Классно!» Это читерство, но очень удачное, и оно абсолютно допустимо.

— А есть слова, которые вы при детях не употребляете и не разрешаете им так говорить?

— Мне кажется, есть дешевые, попсовые слова. Например, сейчас разговорным стало «пипец». Это почти обсценная лексика. Дети его начинают произносить с надоедающей и раздражающей частотой, и я делаю замечания: «Фильтруйте, пожалуйста, фильтруйте речь». Если рядом со школой стоит подросток, в речи которого кроме мата, есть только одно цензурное слово, то он глуп, потому что не знает, как использовать язык. Разумеется, я останавливаюсь и делаю замечания, иногда весьма резкие. Могу сказать сленгом: «Где вы вообще находитесь? Не кажется ли вам, что стоит фильтровать базар в школе?»

«В группе должен быть махач и мордобой»

— Бывает, что старшие преподаватели приходят к вам на урок, а потом готовы сжечь на костре за какие-то нестандартные приемы преподавания?

— В первые два года ко мне ходили, хотя директор лицея Татьяна Петровна, как я понимаю, старалась меня ограждать, зная, что я дикий параноик и паникёр. И однажды на урок литературы пришли два преподавателя. Наталья Юрьевна, председатель методического объединения филологов лицея, и математик Татьяна Павловна, она была тогда завучем. Помню, что мной была категорически недовольна Татьяна Павловна и категорически довольна Наталья Юрьевна. Первая говорила, что разговаривать на такой мешанине сложных терминов, разговорного сленга и чуть ли не жаргона нельзя, что она не понимает, как можно мешать литературную речь непонятно с чем. А вторая сказала, что это – фишка преподавателя, и именно поэтому дети и любят уроки литературы. Я не знаю, кто из них правее.

Любой опытный пожилой учитель может воскликнуть: «Ну как же так?» Я могу, например, объяснить фразеологизм рядом синонимичных выражений, одно из которых будет из высокого штиля XVIII века, другой ― из советского языка, а дальше пойдет что-нибудь дворовое или профессиональносленговое. Мне кажется, что именно в способности грамотно и эффективно мешать языковые пласты заключается знание языка и владение им, но кого-то это действительно смущает.

— От чего еще опытный пожилой учитель может получить сердечный приступ, зайдя к вам в класс?

— Я думаю, что кого-то может возмутить мое спустя рукава отношение к дисциплине. Иногда у меня в аудитории может быть очень громко. И меня это устраивает, потому что мне кажется, что именно в этот момент я могу себе позволить действительно высокий уровень шума. Хотя в другое время я требую такой тишины, чтобы было слышно, как скрипят ручки.

-Высокий уровень шума – это на деле как выглядит?

— Бывает, сначала дети поднимали руки, но потом пошла оживлённая дискуссия, они готовы друг друга закидать не знаю чем, ради того, чтобы точнее определить лексическое значение слова. Мне кажется, если дети испытывают такие дикие эмоции по поводу вшивого лексического значения слова, я имею право позволить им этот дебош. А потом успокоить и сказать, как есть на самом деле.

Недавно группа 6.4 чуть не порвала друг другу глотки за олимпиадные задания по русскому языку.  Притом, что задание было непостижимое для шестого класса. По цитате из Есенина надо было определить «географическое происхождение» поэта.

И мне в ответ березка:
«О любопытный друг,
Сегодня ночью звездной
Здесь слезы лил пастух».

Разумеется, все рассказывали, что пастух и березки – это провинция, не город, следовательно, деревня. А составители хотели, чтобы ребенок понял, что «друг-пастух» — это рифма, значит, произносится не друг, а «друх», то есть это южнославянский диалект, Рязанская губерния.

— Почему рвали глотки?

— Они очень быстро упёрлись в «берёзки» и «пастуха» и не могли сдвинуться с места. «Прочтите текст, – говорю я, – Кто сможет вслух прочесть четверостишие?» И они его читают, я им: «Вы читаете неправильно». Они решили, что проблема в интонировании пунктуации, и кричат: «Я!» – «Нет, я!» И начинается спор из-за того, как правильно интонировать. «Вы читаете неправильно. Кто сможет вслух прочесть стишок?» И одного мальчика вдруг осеняет, что там же нет рифмы. «Как сделать, чтобы была рифма?» И они догадываются, и тогда вопль сразу из нескольких ртов, разумеется, они поднимают руку, но вместе с рукой вырывается нечто… Как назвать этот звук и описать его, я не знаю – агонизирующее такое нечто: «А-а-а!»

Аналогично было в группе 6.1, в которой не могли понять, чего я хочу. Я пошла с другой стороны: «Ребята, от вас требуют географического происхождения, да?» – «Да.» – «На уроке русского языка, да?» – «Да». Я говорю: «Это что надо изучать, чтобы совместить русский язык и географию?» И несколько ребят: «Диалектологию же!». Господи! И этот инсайт, разумеется, не дает возможности поднять руку и сказать, потому что ты выплескиваешь это почти бессознательно.

— Это невозможно, да.

— Это невозможно проконтролировать. Я считаю, что так должно быть время от времени. В группе должен быть мордобой и такой заразный азарт. Главное, я знаю ответ, пытаюсь на него вывести, некоторые догадываются, к чему я веду. И они бегут к ответу быстрее, чем все остальные, начинается просто махач какой-то. Мне кажется, что иногда это просто необходимо.

— При этом, наверное, просыпаются даже самые медлительные?

— Разумеется. Там уже все версии идут в дело. Уже начинают в меня швыряться детьми, которые не могут никогда и ничего, а здесь подняли руку, я кричу: «Ну же! Ну, дайте мне версию!» – Они вопят: «Вася, давай версию! Давай ее! Она у тебя, ну же, ну!» Если такого азарта не будет, а будет муштра, будет ли результат? Наверное, но в разы меньший при больших затратах  со стороны учителя. Я буду стараться держать группу, все будут сидеть вертикально с прямой спинкой, я буду заставлять задвигать стульчики, но мне это будет стоить диких сил, а результата почти не будет.

— Бардак, шум, радость, азарт –  что с вами происходит в этот момент?

— Я, наверное, человек очень эмоциональный. Меня тоже начинает штырить совершенно не по-детски. Я тоже начинаю кричать и махать руками, и кидаться от команды к команде, и от человека к человеку. Если человек не договаривает какой-то малости, вот он остановился в сантиметре от правильного ответа, я начинаю делать странные жесты руками. Жесты, мимика, клоунада, пантомима, все что угодно, но, в общем, да, я, наверное, гиперэмоциональна и испытываю ощущение восторга и вдохновения.

«Спасибо за Цоя и БГ»

— Зачем вы разбираете стихи рокеров с детьми?

— Я слушаю эту музыку. Из общедоступной поэзии есть классика, а есть альтернатива —  русский рок. Есть поэзия без музыки – это Бродский, это Шестаков, это Пушкин, это классика, весь Серебряный век и почти весь Золотой. Почти весь, потому что из-за разницы в языках он очень многим недоступен, Серебряный часто детям ближе.

Но есть поэзия, которая положена на музыку, и подростку гораздо проще ее воспринимать. А мне – объяснять, потому что я могу рассказать о музыкальности или объяснить пафос, эмоциональный накал с точки зрения звука.  Здесь я могу включить запись и показать, что и голосом, и музыкой передается то, что мы в тексте можем словами передать – мне так удобнее. А еще, может быть, это пошло из-за того, что я гораздо больше работала со старшими, а они часто слушают то же, что и я.

— Кого из рокеров вы разбираете по составу?

— Борис Гребенщиков, Саша Васильев. Со старшими — Башлачева. Младшим рано и слишком страшно, наверное. Цоя просто в хвост и в гриву! Потому что там и стихотворение построено просто, и предложения короткие. В прошлом году, помнится, мне было очень удобно на Цое давать сложные предложения.

Дом стоит, свет горит
Из окна видна даль,
Так откуда взялась печаль?

Вперед – бессоюзные предложения разбираем.

Так как я очень люблю Гребенщикова, то он у меня часто всплывает, когда нужно предложение по схеме в пример привести. У старших вызывает уважение ритмизованный пример, просто потому что это красиво. А маленьким нравится «Сплин», они его слушают.

— Шестиклассники?

— Из 6.4 как раз девчонки повернуты на «Сплине». Из 6.2 и девчонки, и мальчишки послушивают. Я не знаю, почему именно Саша Васильев, а не Цой, что было бы логичнее.

— Девочки и «Сплин», мне кажется, это как раз логично.

— Депрессия, тоска, романтика?

— Да. А не было такого, что приходят к вам родители и говорят: «Что происходит, вообще, вы чем занимаетесь? Рокеры какие-то!»

— Ни один не приходил. Я уверена, больше чем на 200%, что у кого-то из родителей есть мысль: «А где про осень и листочки?». Но поскольку никто не подходил, предполагаю, что большинство не против. На почте у меня масса благодарностей от родителей.

— Что пишут?

— Пишут: «Спасибо за Цоя и БГ». Буквально недавно читала такое: «Спасибо за более глубокий уровень». «Спасибо за то, что тексты не примитивные и не одинаковые».

«Уважаемая и любимая Королева Гильотина»

— Как они вас называют, кроме АГ?

— Обычно да, сокращают до инициалов. АГ. Есть еще Королева Гильотина. Это пошло с прошлогоднего правила о написании иноязычных слов вроде «бульон», «павильон», «миньон». Прямо в лицо не говорят, но могут в письме написать: «Уважаемая и любимая Королева Гильотина! Тра-та-та». Это метафора, художественный прием, мне нравится. И обращения повторяют заодно.

— А еще как?

— АГ все же. Но если обращение в официальном письме, то оно должно быть конвертировано в Анну Геннадьевну. После Булгакова была Аннушка, но это прозвище недолго продержалось. Оно мне, наверное, не подходит. Я сыронизировала по этому поводу: «Ребята, аккуратнее, сейчас как масло разолью». Они пару раз пошутили, но оно не прижилось, поскольку совсем чужое.

— Вы используете гаджеты в учебном процессе? Как относитесь к тому, что дети погружены в них?

— Я не разрешаю на уроке пользоваться гаджетами, принципиально, ни на русском, ни на литературе. Я разрешаю фотографировать материал, чтобы отправить его куда-то, например, отсутствующим. Зато я приветствую использование онлайн словарей, ресурсов типа «Грамота.ру». Словари символики и геральдики у нас на литературе все время висят в открытых вкладках, это наша «настольная книга». Но к гаджетам у меня отношение неоднозначное. Понятно, что это зависимость, что это привычка вроде курения. И она влияет на восприятие очень серьезно.

В последние лет 10-15 человеческое восприятие стало принципиально отличаться от того, что было несколько десятилетий назад. Информация не хранится в памяти активно, она рассеивается, поступает в голову и тут же оттуда уходит. С одной стороны, есть защитная реакция организма – мы не можем все воспринять, мы защищаемся. С другой, среди отфильтрованной информации может быть то, что нам очень нужно, а мы этого не вспомним никогда в жизни — оно ушло, как промотанная новостная лента. Мы учимся не задерживаться ни  на фактах, ни на эмоциях: мы читаем про трагедию в московском метро, следом новость о новом сериале, следом ― о годовщине теракта, тут же ― о новых памперсах, а сбоку уже ждёт милое видео с котиком. После этой информационной эпилепсии не запомнишь ни трагедию в метро, ни памперсов. Это плохо. Но, так как сделать с этим ничего невозможно, это технологический прогресс, он есть, у него есть плюсы, у него есть минусы, поэтому как-то нужно пытаться приспособиться.

— И как вы приспосабливаетесь?

— У меня есть очень много возможностей на самом деле. Это мне очень на руку. Например, я могу не ставить два за отсутствие домашней работы, а принять ее день в день удаленно по электронной почте. Когда ребенок говорит мне, что он забыл тетрадь – я могу не думать, врет он мне сейчас или не врет, потому что «до без минуты завтра» у него есть возможность прислать мне домашнее задание на почту. Оно было задано на сегодня – сегодня ты должен его прислать, и двойки не будет. И ребенок может его просто дома сфотографировать, а может прибежать домой в мыле и быстро его сделать. Конечно, лучше, если он его сделал и забыл. Но если он прибежал и сделал, ну, и молодец – он его сдал в этот день, и я не поставлю два балла.

— Вы используете для общения с детьми соцсети, мессенджеры?

— Разумеется, общение идет в соцсетях обязательно. Например, домашнее задание уже не в дневнике, а на нашем лицейском ресурсе. Туда я могу выложить презентацию, видео, иллюстрацию – и мне это удобно. А еще я могу отослать к визуальному образу: чтобы объяснить официальный стиль – просто повесить на экран менеджера в костюме. А вместо разговорного стиля я могу показать изображение свободного стиля одежды. И это будет гораздо более быстрое, понятное, доступное объяснение для всех и для меня, в том числе. Мне проще показать, чем долго-долго объяснять.

Например, на литературе я объясняла разницу между сентиментализмом и романтизмом – и там, и там примат чувств, превалирование эмоций  над рацио; и там, и там, как правило, любовные линии; и там, и там природа – наше всё. И как развести эти направления? Я показывала американскую мелодраматическую комедию и романтический триллер, ужастик. И они поняли, почему сентиментализм очень быстро себя изжил, и сменился романтизмом, который предложил больше тем для обсуждения. После слащавой комедии и романтического готического триллера понятно, как развести эти направления по цветовой гамме, по настроению, по концентрации «розовых сопель».

Плюс соцсети – это, конечно, удобно. Например, у меня в группе, где я классный руководитель, есть комитет самоуправления, в нем существует должность онлайн-информатора. Если вдруг у нас падает УЛИСС (ресурс с домашними заданиями), есть человек, который должен срочно выйти на связь с преподавателями – по электронной почте, по мобильному телефону, узнать домашнее задание и быстро выложить его ВКонтакте. Если кто-нибудь после этого не выполнит домашнюю работу, то, разумеется, получает в лоб не учитель, не ресурс, не абстрактный техник, а человек, который не сделал. Мы живем в век технологий. Мне кажется, это помогает воспитать чувство ответственности, личной и групповой.

Учитель в социальных сетях

— Учитель в соцсетях – это вообще вопрос дискуссионный. Есть ли границы его открытости перед детьми, родителями, другими учителями?

— Наверное, я скучно живу?

— Я посмотрела ВКонтакте вашу страницу, довольно весело.

— Мне не кажется, что из моей жизни, вконтактовской, что-то стоит скрывать от детей. Ему нельзя знать, что учитель – живой человек? Ему нельзя знать, что учитель занимается танцами? Почему? Наоборот, он должен это знать, потому что учитель – такой же человек, как он, и он имеет право на такую же ошибку, как и ты, и он имеет право на такую же неорганизованность, как и ты. И ты имеешь право на такую же неорганизованность, как учитель. И учитель имеет право устать, быть радостным или грустным, лечь спать в пять часов утра.

И ребенок имеет право на следующий день прийти и сказать: «Анна Геннадьевна, что же вы не спали сегодня?» И Анна Геннадьевна имеет право, положа руку на сердце, сказать: «Что делать, весь день прокрастинировала, и до пяти часов утра проверяла ваши тетради». Вы видите, да, честно, оно так и есть.

Есть границы и субординация, но они не зависят от того, выхожу я в сеть или не выхожу. Они зависят от уважения, от пиетета, который испытывает или не испытывает конкретный человек к конкретному человеку. Я могу не быть одного возраста/статуса с человеком, но я испытываю уважение к личности, которое не дает мне права обидеть, нахамить, бестактно высказать претензию.

— А чем должен или не должен делиться учитель в соцсетях?

— У меня, конечно, все время стоит флажок внутренний, что «дети читают». Но в конце концов я прихожу к мысли, что читают люди, а не дети. А в первую очередь себя читаю я. Дело не в том, что мне стыдно перед детьми, а дело в том, что есть какие-то рамки адекватности, их я не имею права перейти. Наверное, я просто не делю людей на детей и взрослых.

— Многие взрослые с трудом уже понимают язык детей в соцсетях. У вас таких трудностей нет?

— Это то, что раньше было дворовым сленгом, теперь стало сетевым. Это власть языка. Для меня этот язык самый эффективный. Он строится на намеренном искажении правил грамматики.

Одно дело – грамотность и образованность, а другое – то, как человек общается в сети. Когда ребенок пишет мне без знаков препинания и неправильно, я исправляю, потому что он пишет учителю русского языка, он вообще пишет учителю – пиши грамотно. Это пройденный материал ― будь любезен обособить вводное слово. Если я вхожу в группу к своим 6.2 и вижу на стене объявление, в котором чего-то там не хватает, я делаю замечание прямо в комментарии: «Поправьте здесь так-то и так-то». Они поправляют. Если дети переписываются между собой, сливая и сокращая слова, мне кажется, это их личное дело. Я не имею права вмешиваться в то, как ребенок общается со своими друзьями. Он все равно не перестанет общаться именно так, просто не будет показывать мне – ну, и в чем радость?

Сленг поэтому и появляется, что какая-то группа людей хочет говорить на своем языке. Это в каком-то смысле протестная, изоляционная форма. У развитых и образованных людей это проходит, они начинают разговаривать и писать нормально. Если за сленг ругать, наказывать, запрещать так говорить, это не поможет переболеть, наоборот, вызовет встречную волну протеста, когда ребенок захочет еще больше такого самовыражения.

-А как учитель должен реагировать, если ему неприятно?

Мне кажется, можно выразить свое мнение по этому поводу. Например, я знаю одну девочку, которая так пишет. Меня это раздражает, мне кажется, что это неумно, я ей говорила об этом несколько раз. В диалогах со мной она так не пишет. Я не говорила, что запрещаю, я сказала: «Меня это раздражает, и если вы вообще можете уследить за руками и за языком, будьте любезны мне писать и со мной общаться по-русски». Да, она действительно пишет с мягкими знаками, там такая интонация сюсюканья появляется, ужасно неприятная, бесючая страшно. Сливаются слова. Причем она очень грамотная, и когда надо, она пишет очень чисто. Это возрастная штука. Таких возрастных закидонов масса, она переболеет, как и другие. Моя задача как классного руководителя – попытаться максимально сгладить пубертат, а дальше это пройдет. Если это не пройдет, то, извините, это недоразвитость.

«Нам плохо, одиноко, мы скучаем»

— Помимо дружественных учителей в лицее есть не менее дружественный кот, говорят, он свободно заходит в классы во время урока.

— Это хранитель лицея. В 91-ом году, когда открылся лицей информационных технологий, в здании на Ломоносовском появился рыжий кот. Он жил 20 лет в лицее, его звали Макс, он был гигантских размеров, очень харизматичный. Потом появилась традиция, что в лицее всегда должен присутствовать рыжий кот, теперь их два: Ерофей в здании старшей школы и Фунтик ― в средней. Без них нельзя. Как жить без хранителя традиций?

С урока я обычно прошу его удалиться. Говорю: «Месье, будьте любезны», – и так ногой под попу вежливо-вежливо. Поэтому ко мне больше кот не заходит на уроки. После уроков, да, на моем столе он часто дрыхнет. Детям, конечно, это нравится, потому что это самобытно, это традиция, это уютно и по-домашнему.

— По сравнению с большинством школ ЛИТ1533 – это такой оазис?

— Да, да, по сравнению с большинством московских и российских школ, это действительно оазис, хотя, безусловно, здесь есть очень разные дети. Есть дети очень умные, взрослые и развитые, а есть дети, которые развиты интеллектуально, но при этом аутичные. Важно, что и такие в лицее выживают, доучиваются до конца, заканчивают его и даже социализируются. В обычной школе таких часто травят.

Несколько лет назад на наш ежегодный туристический слет ездил мальчик с кислородным баллоном в рюкзаке. Вы представляете себе, что это? Он выступал от звена, танцевал, а у него за спиной ― у единственного ― был рюкзак, в котором лежал баллон, и прицеплена маска кислородная. И группе, в которую он попал, пришлось обыгрывать это дело, потому что он не мог активно плясать, и он у них был черепашкой или броненосцем, он с этим зеленым рюкзаком солировал, получился образ.

Авторитет учителя и дистанция между учителем и учеником здесь держится не на муштре, а на доверии, уважении, эмпатии взаимной. Например, я говорю группе: «Ребята, я не успела проверить ваши диктанты», а они отвечают мне: «Ну, вы хоть поспали?».

Это показательно! Потому что им важны оценки за диктант, но в данный момент я скуксилась, сказала «извините», и для них важнее спросить не «когда будет?», а, «вы хоть не умерли?», потому что раз я не успела проверить, значит, был какой-то локальный армагеддон.

-Интересно, почему так получается, здесь особая система воспитания, что ли?

— Я не знаю. Но здесь часто дети приходят и говорят мне, например: «Сегодня Ирина Борисовна была расстроена». Я говорю: «Чем?» – «Мы побоялись спросить. Вы же знаете, когда Ирина Борисовна расстроена, лучше лишних вопросов не задавать. Но нам показалось, у нее что-то произошло». Это же показатель того, что дети не только получают знания, они еще и учатся отслеживать какие-то личные моменты. Я училась в обычной школе, и я помню этот праздник жизни, когда нам говорили, что Марьиванна заболела. Мы просто чуть ли не хлопушки доставали, причем даже не ждали, пока тот преподаватель, который объявляет, выйдет из класса, потому что нам было наплевать.

А здесь, когда я заболеваю, флешмоб случается на почте. Кто-то просто пишет от себя: «Анна Геннадьевна, нам без вас плохо, мы скучаем, выздоравливайте». В прошлом году группа 6.4  организовала флешмоб. Они формулировали какое-то общее сообщение, причем в виде фонетической транскрипции.

— Это как?

— Например, пожелание, чтобы не было кашля: они рисовали фонетическую транскрипцию по всем правилам (мы только фонетику закончили), с редуцированными звуками, ерами и ерями. Фонетическое «штоп небълъ кашл’ь». Они сочиняли эту транскрипцию, как она должна выглядеть без ошибок, сильные ребята проверяли, чтобы у всех было правильно, потом ее писали каждый своей рукой, фотографировали и присылали картинку. И отправляли они все это, например, в 21:05 – 21:15. Мне в течение 10 минут приходило штук 30 писем.

В этом году флешмобов не было, но обязательно появляется кто-то, человек 10-15, которые пишут, когда болеешь: «Нам плохо, мы скучаем, нам одиноко. У нас сегодня заменял такой-то преподаватель, он сказал вот так-то. Так можно говорить? Выходите, мы не знаем, у кого спросить, как можно говорить». Это живое общение.

«В пень этот чаек! Кому нужно все это!»

— Бывает, что вы плачете?

— От отчаяния, да, регулярно. Двоечные диктанты, 25 раз одно и то же.

— Слезы из-за диктантов?

— Если это из раза в раз, то да. Или если это массово не сделанная домашняя работа. Это ощущение профессионального фиаско сразу. А еще с литературой так бывает часто. Например, мы разбираем долго произведение, и это так интересно, так подробно, так красиво, так умно и сложно, и я убила на это столько сил своих и их, и я задаю сочинение, и получаю беспомощные работы – это может быть просто вечер рыданий. Периодически я утешаю маму, у которой такие же вечера по поводу старших. А потом меняемся, и она утешает меня. «Зачем мы месяц «Снежную королеву» мусолили, если они?.. А-а-а!» – «Ну, что тут сделаешь? Ну, давай чайку». – «В пень этот чаек! Кому нужно все это! Увольняюсь завтра!»

— Не ожидала, что учителя так переживают.

— Нет, это очень серьезно. Потом это зависит от того, насколько лично учитель воспринимает свою работу. Для меня работа ― это личное, ценное, принципиально важное, и все эти армагеддоны на уроках, разумеется, заканчиваются срывами дома. Это очень тяжело, и таблеточки всякие, нервы успокаивающие, принимаю, конечно, регулярно.

— Уже? Сколько вам лет?

— 26. А как мне выживать? А когда весна начнется, без витаминов и таблеточек никак.

— А тогда, может, бросить все это?

— Я на самом деле думала. Я думала как-то, когда вела пятые классы весь год, что надо тикать отселе быстрее.   Но я не могу пока увидеть и найти, в какой еще профессиональной области у меня будет такая возможность для самовыражения, самореализации, как с детьми. Потому что пока ― я не знаю, что будет дальше ― и со старшими, и со младшими у меня довольно большой процент взаимопонимания.

Фотографии Сергея Щедрина и из личного архива

Во второй части беседы с преподавателем Анной Яневой читайте: как научить дружить современных детей и какие упражнения для этого использовать, можно ли старшеклассникам носить учителя на руках в прямом смысле, почему дети не понимают значения фразеологизмов и насколько сильно им не хватает объятий. 

Определение разборки Merriam-Webster

dis · as · sem ·ble | \ ˌDis-ə-ˈsem-bəl \

разобрали; разборка; разбирает

Разобрать синонимы, разобрать антонимы | Тезаурус Мерриам-Вебстера

1 разобрать

• пришлось разобрать телевизор для замены проводки

2 уйти в разные стороны и перестать существовать как тело или единое целое

• класс медленно разобрать , многие ждут, чтобы задать инструктору несколько вопросов

См. Определение словаря

Молекулярные выражения Фотогалерея: Митоз

Наблюдение митоза с помощью флуоресцентной микроскопии — Цифровая визуализация с помощью флуоресцентной микроскопии становится мощным инструментом, помогающим ученым понять сложный процесс митоза как на структурном, так и на функциональном уровне.

Митоз — это механизм, который позволяет ядрам клеток расщепляться и обеспечивать каждую дочернюю клетку полным набором хромосом во время клеточного деления. Это, в сочетании с цитокинезом (деление цитоплазмы), происходит у всех многоклеточных растений и животных, обеспечивая рост организма. В этой части фотогалереи мы проиллюстрируем различные этапы митоза кончиков корней лука, которые относительно легко зафиксировать на всех этапах.Мы приносим свои извинения за низкое качество микрофотографий в этом разделе, но он был построен с использованием предварительно подготовленных (окрашенных и закрепленных) микропрепаратов, которые мы приобрели коммерчески. В будущем мы надеемся получить изображения более высокого качества.

Камера отдыха

Нормальная покоящаяся клетка существует в состоянии, называемом интерфазой , в котором хроматин недифференцирован в сильно окрашенном ядре, как показано выше.Перед тем, как клетка вступит в фазу митоза, она сначала проходит фазу синтеза или S , где каждая хромосома дублируется и состоит из двух сестринских хроматид , соединенных определенной последовательностью ДНК, известной как центромеры . Центромеры имеют решающее значение для сегрегации дочерних хроматид во время митоза. Первая фаза митоза известна как профаза , где ядерный хроматин начинает организовываться и конденсируется в толстые нити, которые в конечном итоге становятся хромосомами.Во время профазы цитоскелет (состоящий из цитоплазматических микротрубочек) начинает разбираться, и основной компонент митотического аппарата, митотическое веретено начинает формироваться вне ядра на противоположных концах клетки. На микрофотографии ниже показана начальная конденсация хромосом в начале профазы (ранняя профаза), когда ядрышко еще не повреждено.

Ранняя профаза

Поздняя профаза или прометафаза начинается с разрушения ядерной оболочки, которая распадается на небольшие мембранные пузырьки, которые очень напоминают эндоплазматический ретикулум и имеют тенденцию оставаться видимыми вокруг митотического веретена.В течение этого периода хромосомы продолжают конденсироваться и постепенно укорачиваются и утолщаются, пока полностью не сформируются единицы, которые будут подвергаться митозу. Ядрышко также исчезает в этот период. Микротрубочки митотического веретена теперь могут свободно входить в ядерную область, и на каждой центромере начинается образование специализированных белковых комплексов, называемых кинетохорами . Эти комплексы прикрепляются к некоторым микротрубочкам веретена, которые затем обозначаются как микротрубочки кинетохор .Другие микротрубочки в веретене (не прикрепленные к центромерам) называются полярными микротрубочками , и они помогают формировать и поддерживать структуру веретена вместе с астральными микротрубочками , которые остаются вне веретена.

Поздняя профаза

Следующая идентифицируемая фаза называется метафазой , где хромосомы, прикрепленные к микротрубочкам кинетохор, начинают выравниваться в одной плоскости (метафазная пластинка ) на полпути между полюсами веретена.Микротрубочки кинетохор оказывают давление на хромосомы, и весь комплекс веретено-хромосома теперь готов к следующему событию. На микрофотографии ниже показаны хромосомы клеток кончика корня лука в метафазе, готовые к разделению. Кинетохора и полярные микротрубочки отчетливо видны и расходятся от концов клетки, оставляя хромосомы в середине комплекса.

Метафаза

Это создает основу для разделения хромосом на следующей стадии митоза: анафаза .Почти сразу после того, как метафазные хромосомы выровнены на метафазной пластинке, две половины каждой хромосомы разъединяются устройством веретена и мигрируют к противоположным полюсам веретена. Микротрубочки кинетохор укорачиваются по мере того, как хромосомы тянутся к полюсам, в то время как полярные микротрубочки удлиняются, чтобы способствовать разделению. Микрофотография ниже иллюстрирует раннюю стадию анафазы, когда хромосомы только что полностью разделяются. В этом комплексе хорошо видны микротрубочки.

Ранняя анафаза

Анафазы обычно это быстрый процесс, который длится всего несколько минут. Когда хромосомы полностью мигрируют к полюсам веретена, микротрубочки кинетохор начинают исчезать, хотя полярные микротрубочки продолжают удлиняться. Это соединение между поздней анафазой и ранней телофазой , последней стадией деления хромосомы. На микрофотографии ниже показано расположение хромосом в поздней анафазе.Полярные микротрубочки представляют собой четко сформированную сеть, и в цитоплазме между двумя полюсами веретена инициирован синтез новой клеточной мембраны.

Поздняя анафаза

В телофазе дочерние хромосомы достигают полюсов веретена и в конечном итоге перераспределяются в хроматин. Процесс цитокинеза , где цитоплазма делится путем расщепления, также начинается где-то в поздней анафазе и продолжается в течение телофазы.После полного разделения хромосом и их вытеснения к полюсам веретена ядерная мембрана начинает преобразовываться вокруг каждой группы хромосом на противоположных концах клетки. Ядрышки также снова появляются в том, что в конечном итоге станет двумя новыми ядрами клетки. На микрофотографии ниже запечатлена клетка в поздней телофазе, где новая мембрана начинает делить клетку, но ядра еще не полностью реформированы и цитокинез еще не завершен.

Телофаза

Когда телофаза завершается и формируется новая клеточная мембрана (или стенка в случае кончиков корней лука), ядра почти созревают до премитотического состояния.Заключительными этапами являются завершение полного формирования мембраны между каждой из новых дочерних клеток, в результате чего образуются две отдельные новые клетки. На микрофотографии ниже показаны две новообразованные клетки, которые только что завершили процесс митоза.

Дочерние клетки

Мы постоянно ищем хорошие образцы для микрофотографии. Если у вас есть биологические образцы, которые могут быть приемлемыми кандидатами для исследования под микроскопом, свяжитесь с нами, используя приведенные ниже ссылки.

Биология | Бесплатный полнотекстовый | Анафаза A: разборка микротрубочек перемещает хромосомы к полюсам веретена

1. Введение и различие между анафазой «А» и «В»

В своей классической книге 1961 года о делении клеток Дэниел Мазиа назвал анафазу актом движения хромосом, который придает митозу значение [1] (стр. 95). Термин анафаза был впервые введен более 130 лет назад [2]. Ко времени Мазии это стало относиться — как и сегодня — к фазе митоза, когда сестринские хроматиды перемещаются друг от друга к противоположным сторонам клетки.Начало анафазы — одно из самых резких событий митоза, что делает его цитологически полезным в качестве ориентира для определения времени других митотических событий. Это также один из самых поразительно красивых примеров клеточного движения. Анафаза состоит как минимум из двух отдельных процессов, традиционно называемых «анафазой А» и «анафазой В». Анафаза А — это движение хромосом к полюсам веретена за счет укорочения соединительных волокон; этому посвящена данная глава (рис. 1). Анафаза B, которая рассматривается в следующей главе Scholey et al.[3], это разделение двух полюсов друг от друга за счет удлинения шпинделя. Различие между анафазой A и B — больше, чем простое описательное удобство. Эти два процесса происходят одновременно во многих типах клеток; но они механически различны, факт, который был оценен задолго до того, как были поняты лежащие в основе механизмы [4]. Анафаза A может быть далее разделена, по крайней мере, на два механистически различных подпроцесса, как обсуждается ниже.

Эта глава начинается с описания движений хромосом во время анафазы, которые изучаются более века.Тем не менее, стоит подытожить классические выводы, которые поддерживают наше текущее понимание и иногда принимаются как должное. Далее следует описание динамики микротрубочек внутри веретена, еще одного столпа нашего современного взгляда на анафазу. Остальная часть главы посвящена обсуждению генерации силы, которая также происходит на более ранних этапах митоза, но наиболее очевидна во время анафазы. Где и как генерируются силы, управляющие анафазой А? Какую роль играют моторные белки на основе микротрубочек и сами микротрубочки? Представлены доказательства того, что микротрубочки преобразуют химическую энергию в механическую работу.Акцентируется внимание на механистических концепциях, а не на конкретных молекулах, в надежде, что обсуждение будет доступным и интересным даже для читателей, менее знакомых с митозом.

2. Центромеры и кинетохоры обычно управляют анафазными движениями, в то время как хромосомные руки следуют за

Идея о том, что хромосомы перемещаются во время анафазы A и других фаз также под действием сил, действующих на них на кинетохорах, настолько хорошо известна, что наблюдения, на которых она основана почти не упоминаются.Конденсированные митотические хромосомы видны при светлопольной микроскопии, особенно при использовании фазового или дифференциального интерференционного контраста. Таким образом, как резюмируется в главе 1 этого тома [5], они наблюдаются более века. В некоторых типах клеток митотические хромосомы относительно длинные, и их первичные сужения — их центромеры — также различимы. Поскольку эти центромерные сужения обычно возникают во время митотических движений хромосом (Рис. 1), ясно, что они являются основными местами, где сила передается хромосомам.Именно поэтому они и получили название кинетохоры («места движения») [6]. Кинетохоры в анафазе имеют тенденцию двигаться прямыми путями к полюсам веретена, тогда как хромосомные плечи, следуя кинетохорам, раскачиваются и прослеживают более сложные пути. Размышляя об этих «тряпичных» движениях, Мазия сравнила роль хромосом в митозе с «ролью трупа на похоронах: они служат поводом для судебных разбирательств, но не принимают в них активного участия» [1] (стр. 212). Общее правило, согласно которому кинетохоры руководят, а следуют хромосомные ветви, применяется ко многим типам клеток, включая позвоночные [7] и дрожжевые [8], но есть исключения, такие как эндосперм растений [9] и журавль. сперматоциты мух [10], куда иногда ведут руки.Эти альтернативные случаи напоминают нам, что силы также действуют непосредственно на плечи хромосом, хотя первичные движущие силы для анафазы обычно проявляются в кинетохорах. Хромосомные плечи в некоторых хорошо изученных типах митотических клеток (например, в легких Newt [7]) постоянно отталкиваются от полюсов веретена. Эти антиполюсные силы получили название «полярных ветров» (или «полярных сил выброса» [11]). Они должны преодолеваться кинетохорами, чтобы управлять анафазным движением к полюсу, и они объясняют, почему хромосомные плечи обычно направлены от полюсов в этих клетках.Для других типов клеток, в которых руки хромосом иногда приводят в движение, полярные ветры могут дуть к полюсам веретена, а не от них [9,10]. Эндосперм растений представляет собой интересный случай, когда хромосомные плечи сначала испытывают силы, направленные к полюсу, до метафазы, а затем позже, после начала анафазы, ситуация меняется на противоположную, и руки испытывают силы, направленные от полюса (Рис. 2) [9]. В сперматоцитах журавлей, однако, направленные к полюсу силы, по-видимому, действуют на хромосомные плечи даже во время анафазы, обеспечивая дополнительную силу, которая помогает, а не противодействует кинетохорам [10].

3. Движение к полюсу во время анафазы A в основном, но не полностью однонаправлено.

Движение кинетохор к полюсу в анафазе в основном однонаправленное, но не всегда. Изменения направления, подобные колебаниям, наблюдаемым ранее в прометафазе и метафазе, могут продолжаться в анафазе, но смещение к полюсу обычно сохраняется [12] (Рисунок 3). Это двунаправленное возвратно-поступательное движение получило название «направленная нестабильность». Это имеет поразительное сходство с внутренней «динамической нестабильностью» филаментов микротрубочек, которые стохастически переключаются между периодами укорочения и роста [13,14], и предполагает тесную связь между движениями хромосом и динамикой микротрубочек, как обсуждается ниже.Хотя анафаза начинается внезапно, движения хромосом в анафазе не полностью синхронны. Кинетохора, движущаяся к полюсу в анафазе, может изменить направление, временно перемещаясь в противоположном направлении, в то время как ее сверстники продолжают свой марш к полюсу. Соседние хромосомы в клетке также могут двигаться близко друг к другу в противоположных направлениях, например, когда анафаза возникает преждевременно, до образования правильной метафазной пластинки (например, см. [1] (стр. 288) и [15]). Хромосома также может ошибочно прикрепиться к веретену, при этом одна из ее кинетохор одновременно присоединяется к микротрубочкам, исходящим от обоих полюсов.Эти «меротельно» прикрепленные хромосомы отстают от своих должным образом («амфителически») прикрепленных сверстников во время анафазы [16]. Вместе эти наблюдения демонстрируют, что кинетохоры перемещаются индивидуально, а не как группа. (Аналогичным образом механизм коррекции митотических ошибок действует на уровне отдельных кинетохор, как описано в главе этого тома Грищуком и Лэмпсоном [17].) Возможно, наиболее прямые доказательства, подтверждающие примат кинетохор для движущихся хромосом, получены из исследований УФ-абляции. , начавшаяся еще в 1950-х годах [18].Если кинетохоры одной хромосомы повреждены УФ-облучением, оставшиеся хромосомные плечи дрейфуют, а не следуют за своими необлученными сверстниками [7,18,19]. Напротив, хромосома, чья рука была удалена, следует нормальным паттернам движений.

4. Движение хромосомы к полюсу связано с укорочением соединяющих микротрубочек

Современные теории о движении хромосом начали возникать с пониманием структуры веретена, полученным с помощью электронной микроскопии.Существует несколько различных категорий филаментов микротрубочек с четко определенной полярностью (как подробно обсуждается в главе 1 этого тома [5]). Наиболее важными для анафазы А являются микротрубочки, прикрепленные к кинетохоре, у которых один конец, их быстрорастущий «положительный» конец, расположен на кинетохоре, а их «минусовые» концы выступают в направлении полюса. В веретенах среднего и большего размера множество микротрубочек оканчиваются вместе на каждой кинетохоре, и они связаны вместе, образуя кинетохорное волокно. Некоторые, но не обязательно все микротрубочки в кинетохорном волокне простираются полностью до полюса веретена [20].В крошечных веретенах почкующихся дрожжей ситуация проще: всего одна микротрубочка связывает каждую кинетохору с полюсом [21]. Достижения в биохимии тубулина и флуоресцентной микроскопии живых клеток предоставили захватывающий вид на динамику микротрубочек в живых веретенах. [22,23,24,25]. Покадровые видеозаписи крупных клеток млекопитающих с флуоресцентными метками на их кинетохорах и микротрубочках показывают, что движение кинетохор связано с ростом или укорочением волокон микротрубочек, к которым они прикреплены [25].Во время анафазы А волокна, связанные с кинетохорами, укорачиваются, не становясь заметно толще. Это укорочение кинетохорных волокон, по-видимому, притягивает хромосомы к полюсу. Во многих типах клеток методы маркировки микротрубочек (флуоресцентное фотообесцвечивание, фотоактивация и спекл-микроскопия) показали, что укорочение волокон кинетохор происходит частично за счет потери субъединиц тубулина с прикрепленных к кинетохорам плюсовых концов (рис. 4a, b). Как кинетохора может поддерживать устойчивое, несущее нагрузку прикрепление к кончику микротрубочки, который разбирается под ее захватом, еще плохо изучено.Некоторые модели обсуждаются ниже.

5. Микротрубочки, прикрепленные к кинетохорам, могут «течь» непрерывно к полюсам.

Методы маркировки микротрубочек также показали, что прикрепленные к кинетохорам микротрубочки во многих веретенах устойчиво текут к полюсам (рис. 4b, c). Этот направленный к полюсу «поток» микротрубочек связан с разборкой минус-конца на полюсах или около них [23,31,32,33,34,35,36,37]. Анафаза А в этих клетках, таким образом, представляет собой суперпозицию движения кинетохоры относительно микротрубочек и потока микротрубочек относительно полюсов.Вклад потока в движение кинетохор к полюсу широко варьирует в зависимости от типа клеток (Таблица 1). В митотических клетках человека, например, поток составляет около трети движения от анафазы А хромосомы к полюсу, остальные две трети из которых связаны с разборкой положительного конца [30]. У почкующихся или делящихся дрожжей, по-видимому, нет потока, поэтому анафаза A в этих клетках, вероятно, полностью объясняется разборкой положительного конца [26,27,28,29]. Напротив, поток, по-видимому, является единственным ответственным за анафазу А в клетках растений (табака) [37] и в мейотических сперматоцитах журавлей [10,31].В сперматоцитах журавля-мухи присоединенные к кинетохорам микротрубочки плюс концы собираются, а не разбираются во время анафазы А. Суть в том, что волокна микротрубочек, соединяющие кинетохоры с полюсами, могут разбираться с любого конца или с обоих концов. Вопросы о том, как поддерживаются несущие крепления и как скорости движения согласуются со скоростью разборки филаментов, относятся к обоим концам микротрубочек.

6. Анафаза в некоторых типах клеток не соответствует канонической точке зрения

Современный студент, изучающий митоз, читая классическую литературу, не может не заметить, сколько еще типов клеток было исследовано.Появление генетических и молекулярных подходов позволило получить потрясающий набор инструментов, о которых раньше нельзя было даже представить. Но эти современные инструменты были нацелены на гораздо более ограниченный набор модельных типов клеток. И даже в этом ограниченном наборе есть примеры, не соответствующие канонической точке зрения. Разделение анафазных хромосом в веретенах ацентросомного мейоза I ооцитов C. elegans, по-видимому, не зависит от кинетохор [54]. Вместо этого кажется, что хромосомы выталкиваются сзади микротрубочками, растущими и / или выдвигающимися от экватора.Однвалентные половые хромосомы X Y в веретенах мейоза I перемещаются к одному полюсу, сохраняя прикрепления волокон микротрубочек к обоим полюсам [48]. Волокно на задней стороне удлиняется, а ведущее — укорачивается. Вероятно, больше случаев, не укладывающихся в «нормальную» картину, появится по мере того, как будет секвенировано больше транскриптомов и геномов, а также по мере того, как новые технологии редактирования генома, такие как CRISPR [55], облегчат живую визуализацию меченных флуоресцентной меткой веретен в менее изученных клетках. типы

7.Кинетохоры могут либо активно тянуть полюс, либо пассивно скользить в противоположном направлении

Для истинного, механистического понимания анафазы недостаточно просто описать движения кинетохор, микротрубочек и полюсов относительно друг друга. Нам нужно понять, где и как генерируются движущие силы. Биофизически «генерация силы» (или «производство силы») относится к активным процессам, посредством которых химическая энергия, обычно в форме нуклеотидтрифосфатов, преобразуется в механическую работу, определяемую как сила, действующая на расстоянии.Силы, притягивающие кинетохоры к полюсам веретена, должны создаваться где-то внутри самих кинетохор, внутри полюсов или в соединяющем их материале.

Связь движения кинетохор с разборкой плюс концевых микротрубочек убедительно указывает на то, что интерфейс кинетохора-микротрубочка является местом, где активно генерируется сила. По сравнению с ранними исследованиями абляции, в которых использовались УФ-лампы [18], новые микроскопы, оснащенные лазером, позволили проводить более быстрые и точные абляции, что делает их возможными в некоторых крупных клетках (например.g., легкое тритона или клетки PtK) для микрохирургического разделения центромерного хроматина, соединяющего две сестринские кинетохоры [56], или для избирательного разрушения одной сестры в паре [57]. Если кинетохора, движущаяся к полюсу во время метафазы, микрохирургически освобождается от своей сестры, она продолжает движение к полюсу (Рис. 5a). Однако, если кинетохора, движущаяся в противоположном направлении от полюса, высвобождается, то она резко останавливается (рис. 5a, b), предполагая, что ее движение в противоположном направлении от полюса до операции разделения было пассивной реакцией на генерируемые извне тянущие силы (например.g., к силам, создаваемым его сестрой, движущейся к полюсу) [57]. Эти наблюдения, вместе с хорошо скоординированными колебаниями сестер в невозмущенных клетках [12], предполагают, что производящий силу механизм на кинетохоре может принимать два различных состояния: активное состояние, в котором он генерирует тянущую силу, направленную на полюс, и нейтральное состояние, в котором он остается неподвижным или пассивно скользит в противоположном направлении в ответ на внешние силы. Такое поведение в двух состояниях, с активным вытягиванием с минус-концом и пассивным соскальзыванием с положительным концом, также наблюдается, когда очищенные кинетохоры прикрепляются in vitro к динамическим кончикам микротрубочек ([58]; обсуждается далее ниже).Такое поведение влияет на то, как механизм кинетохоры, генерирующий силу, может работать как до, так и после перехода от метафазы к анафазе.

8. Веретено анафазы генерирует больше силы, чем необходимо для движения хромосомы в анафазе

Может показаться естественным предположить, что силы веретена, обычно генерируемые во время анафазы, когда хромосомы претерпевают свои наиболее очевидные движения, выше, чем во время других фаз митоза. Как заметил Мазиа [1] (стр. 142), «человеческая лень заставляет нас связывать движение с тяжелой работой».В анафазе это предположение оказывается ложным. Однако анафазный шпиндель также способен создавать гораздо большее усилие, чем обычно необходимо. Классические эксперименты с микроиглами, проведенные почти четыре десятилетия назад, по-прежнему обеспечивают одни из лучших и наиболее прямых измерений сил веретена в анафазе. Никлас использовал чрезвычайно тонкие калиброванные стеклянные иглы, чтобы дергать отдельные хромосомы в мейотических сперматоцитах кузнечика и спрашивать, сколько противодействующей силы требуется, чтобы полностью остановить их движение от хромосомы к полюсу.Сила срыва, которую он измерил, оказалась на удивление высокой — 700 пН [59]. Это значение представляет собой кажущийся предел производства силы веретеном анафазы в этих клетках — то есть максимальную силу, направленную к полюсу, которую веретено может оказывать на хромосому, предположительно через ее кинетохоры. Никлас предположил, что эта нагрузка распределяется между подмножеством 15 микротрубочек, прикрепленных к кинетохорам, которые простираются до полюса веретена (из всего ~ 40 микротрубочек, прикрепленных к кинетохорам), что приводит к часто цитируемой оценке 50 пН на микротрубочку [ 59].Это может быть завышенное значение, поскольку истинное значение приближается к 12 пН на микротрубочку, учитывая недавнюю работу, предполагающую, что все микротрубочки, прикрепленные к кинетохорам, даже те, которые не простираются до полюса, закреплены внутри веретена [60 , 61]. Но в любом случае силы во время нормальной невозмущенной анафазы, вероятно, намного, намного ниже. Расчеты вязкого сопротивления показывают, что движение от хромосомы к полюсу обычно осуществляется силами всего лишь 0,1 пН [62]. Упругое изгибание хромосом также предполагает только 0.7 пН [63]. Таким образом, анафазное веретено, по-видимому, может проявлять максимальную направленную к полюсу силу (700 пН), которая превышает нормальную анафазную силу в 1000 или даже 7000 раз.

9. Почему веретено анафазы «чрезмерно сконструировано», чтобы создавать силы, намного превышающие необходимые?

В чем могло заключаться эволюционное преимущество такой чрезвычайно высокой способности генерировать силу? Высокая способность к выработке силы может быть выгодна во время анафазы для разделения хромосом, которые остаются неправильно переплетенными, возможно, помогая стимулировать активность декатенации топоизомераз.Высокая способность генерировать силу также может быть важна на более ранних стадиях митоза, перед анафазой. Во время прометафазы сила на кинетохорах обеспечивает регуляторный сигнал, который способствует селективной стабилизации правильно биориентированных прикреплений хромосомы к веретену. (См. [64,65,66] и главу в этом томе Грищука и Лэмпсона [17].) Сила кинетохоров также может быть важна для подавления сигналов ожидания, генерируемых контрольной точкой сборки шпинделя, которые контролируют вход в анафазу ( как обсуждается в главе этого тома Йоглекаром [67]).Биориентированные кинетохоры, сходящиеся к экватору веретена в прометафазных сперматоцитах, поддерживают промежуточные уровни силы, около 50 пН [68], что намного выше, чем слабые силы, обычно наблюдаемые в анафазе перед анафазой, чтобы гарантировать, что когда анафаза действительно происходит, хромосомы будет правильно сегрегировать. Другими словами, способность веретена производить очень высокие силы во время анафазы может быть побочным продуктом эволюционного давления высоких сил на ранних стадиях митоза. Независимо от его эволюционного значения, высокая способность анафазного веретена генерировать силу имеет значение для лежащего в основе механизма производства силы.

10. Новые методы позволяют оценить силу на основе более широкого разнообразия типов клеток.

Измерения микроигл Никласа были поистине революционными, и их актуальность для текущих исследований митоза сохраняется даже четыре десятилетия спустя. Однако следует отметить, что их общность сомнительна. Сперматоциты кузнечиков особенно подвержены хромосомной микроманипуляции, вероятно, потому, что у них отсутствует прочный кортикальный слой цитоскелетных филаментов, и, таким образом, их внешняя плазматическая мембрана может быть сильно вдавлена ​​микроиглой без прокола или разрыва.(Иглы не прокалывают мембрану во время успешных экспериментов — случайные проколы вызывают утечку цитоплазмы и быструю гибель клеток.) ​​Новые методы необходимы для измерения кинетохорных сил в других типах клеток, которые не поддаются микроманипуляции.

Подходы, основанные на флуоресценции, недавно показали большие перспективы. Отслеживая позиционные колебания флуоресцентных центромерных зондов, кинетохорные силы во время метафазы у почкующихся дрожжей были недавно оценены в 4-6 pN [69].Эта оценка хорошо согласуется с измерением прометафазы Никласа в 50 пН, учитывая, что нагрузка на кинетохору кузнечика, вероятно, разделяется множеством прикрепленных микротрубочек: Никлас оценил 7 микротрубочек, прикрепленных к кинетохорам во время прометафазы, каждая из которых несет нагрузку 7 пН [68], тогда как каждая кинетохора у почкующихся дрожжей прикрепляет только одну микротрубочку [21], несущую от 4 до 6 пН. Калиброванные датчики силы флуоресценции, вставленные в кинетохору Drosophila, предполагают несколько более высокие нагрузки во время метафазы в этом организме, от 130 до 680 пН на кинетохору или от 12 до 62 пН на микротрубочку (предполагая, что нагрузка распределяется между 11 микротрубочками) [70].Таким образом, силы, поддерживаемые соединениями кинетохора-микротрубочка во время нормальной прометафазы и метафазы, могут варьироваться от 4 до ~ 60 пН, в зависимости от организма. Каким образом эти пре-анафазные силы, измеренные у дрожжей и дрозофилы, сравниваются с максимальной способностью генерировать силу их веретен, неизвестно, однако, поскольку максимальная сила была измерена только в сперматоцитах кузнечика. Другой потенциальный подход для измерения кинетохорных сил в живых клетках — это применить лазерный треппинг. Калиброванные лазерные ловушки широко используются для измерения сил, производимых очищенными моторами миозина, кинезина и динеина in vitro [71], а в последнее время для изучения изолированных кинетохор и субкомплексов кинетохор, связанных с кончиками микротрубочек in vitro (как обсуждается ниже).В ограниченном числе случаев лазерные ловушки также применялись в живых клетках для измерения сил, генерируемых in vivo во время транспортировки небольших (и обычно сферических) внутриклеточных грузов кинезиновыми и динеиновыми моторами в немитотических клетках [72,73, 74,75]. Поскольку стандартные методы калибровки ловушек не могут применяться in vivo, эти исследования основывались на внешних калибровках, выполненных после выделения захваченных органелл (например, липидных капель) из клеток [72,73,75], или они использовали усиленные методы калибровки, которые учитывают вязкоупругое поведение цитоплазматической жидкости [74,76].Фотоповреждения, вызванные ловушками, которых легко избежать in vitro путем удаления растворенного кислорода [77], становится серьезной проблемой всякий раз, когда лазерные ловушки применяются в клетках, растущих в аэробных условиях [78]. Недавнее исследование с применением лазерных ловушек в мейотических сперматоцитах журавлей и плоских червей Mesostoma [79] предполагает, что силы, необходимые для остановки движения хромосомы к полюсу в этих клетках, могут быть примерно в 100 раз ниже, чем 700 пН, измеренные ранее у кузнечиков. сперматоциты [59]. Однако ни стандартные, ни улучшенные методы калибровки ловушек не использовались, а движения хромосом ослаблялись даже после выключения лазерной ловушки, что свидетельствует о необратимом фотоповреждении, а не об остановке, вызванном силой.

11. Соединение кончиков: одна из наиболее консервативных особенностей митоза и одна из самых загадочных

Движение хромосом к полюсу, связанное с укорочением плюс-кончиков микротрубочек, является одной из наиболее консервативных особенностей митоза. Это также одно из самых загадочных. Каким образом кинетохора (или полюс веретена) может сохранять устойчивый и несущий силу захват на конце быстро разбирающейся микротрубочки? Любой предлагаемый механизм анафазы A должен объяснять это «концевое соединение».Общий механизм также должен быть в состоянии объяснить другие наблюдения, обсужденные выше, такие как возможность временных инверсий направленности кинетохор, переключение между активным направленным к полюсу и пассивным антиполярным состояниями, а также уровни силы на кинетохорах.

12. Обычные двигатели обнаруживаются на кинетохорах, но не могут быть основной основой для соединения кончиков. семенная идентификация CENP-A, -B и -C [83]).Поскольку моторные ферменты, приводимые в действие АТФ, сами по себе способны перемещаться по сторонам филаментов микротрубочек, легко представить, что они могут представлять собой молекулярную основу для производства активной силы на кинетохорах. Направленные к минус-концам двигатели, закрепленные на кинетохоре, могут достигать кончика микротрубочек, перемещаясь по сторонам филамента и тем самым перетаскивая хромосому к полюсу (Рис. 6). Дополнительные ферменты, модифицирующие микротрубочки (деполимеразы микротрубочек или разделяющие ферменты), могут объяснить, как двигательное движение связано с разборкой положительного конца.Каким-то образом активность этих дизассемблеров микротрубочек должна быть скоординирована с моторными ферментами. Имеются убедительные доказательства того, что кинетохор-ассоциированный динеин вносит вклад в анафазу А в определенных типах клеток. Нулевые мутации в генах zw10 или стержня, компонентов комплекса RZZ, который связывает динеин с кинетохорами, вызывают резкое замедление движения анафазы А от хромосомы к полюсу в сперматоцитах дрозофилы [84]. Острое ингибирование динеина с помощью микроинъекции избытка p 50 «динамитин» (компонент динеин-активирующего комплекса, динактина) или анти-динеиновых антител аналогичным образом замедляет межполюсные скорости анафазы А на ~ 75% у эмбрионов дрозофилы [85 ].Однако основанное на микроинъекции ингибирование dynein в клетках млекопитающих (PtK1) вызывает гораздо менее драматическое, ~ 33% замедление движения анафазы A [86]. Хромосомы обычно сохраняют свои прикрепления к динамическим плюсовым концам микротрубочек [86], указывая тем самым, что кинетохор-ассоциированный динеин незаменим для концевого сцепления в этих клетках. Таким образом, хотя обычные моторные белки действительно играют много жизненно важных ролей во время митоза (особенно для сборки веретена, перемещений прометафазных хромосом и анафазы B, как обсуждается в главах этого тома Капуром [87], Гошимой и Ямадой [88] и Шоли), и другие.[3]), они, по-видимому, не являются основной основой для сопряжения наконечников. Незаменимость моторной активности для концевого сцепления в живых клетках наиболее убедительно продемонстрирована исследованиями делящихся дрожжей, где движения кинетохор в направлении полюса в сочетании с разборкой микротрубочек можно непосредственно наблюдать даже после удаления всех локализованных в кинетохорах минус-направленных моторов [89]. . Сходным образом, у почкующихся дрожжей, связанные с разборкой движения кинетохор могут продолжаться в отсутствие направленных на минус концевых моторов кинетохор [90].В более общем смысле, делеция различных моторов, связанных с кинетохорами, не отсоединяет кинетохоры от веретена [89,91,92,93,94]. Эти наблюдения не обязательно исключают роль двигателей в соединении наконечников, но они действительно выступают против простых моделей, в которых соединение наконечников основано в основном на одном типе обычного двигателя.

13. Кинетохоры также содержат немоторные элементы, связывающиеся с микротрубочками

Наше понимание биохимического состава и архитектуры кинетохор сильно выросло за последнее десятилетие (как это обсуждается в главе этого тома Musacchio и Desai [95]).Молекулярные детали здесь повторяться не будут, но появляется новая точка зрения, согласно которой интерфейс кинетохора-микротрубочка включает в себя массив немоторных, связывающих микротрубочки белков в дополнение к обычным моторам, упомянутым выше. Самым главным среди этих немоторных связующих микротрубочек является комплекс Ndc80 (Ndc80c), фибриллярный гетеротетрамер с одним концом, который связывает микротрубочки, а другой конец, который стабильно закрепляется в ядре кинетохоры [96,97,98,99,100]. Ndc80c локализуется во внешнем слое кинетохор, куда встраиваются кончики микротрубочек, и его истощение вызывает широко распространенную неспособность прикрепления кинетохор к микротрубочкам [101,102,103], указывая тем самым на прямую роль в сцеплении кончиков.Ndc80c широко сохраняется. Его фибриллярная структура содержит точки шарнира, что позволяет ему изгибаться или складываться [104,105,106]. Измерения флуоресценции позволяют предположить, что относительное содержание Ndc80c (и других ядерных субкомплексов) в отдельных кинетохорах зависит от количества прикрепленных микротрубочек. Кинетохоры у почкующихся дрожжей, которые связывают только одну микротрубочку, по оценкам содержат от 8 до 20 копий Ndc80c [107,108]. Более крупные кинетохоры, которые связывают больше микротрубочек, имеют соответственно больше Ndc80c [109,110,111].Это масштабирование предполагает модульность. Кинетохоры человека и других «высших» эукариот могут состоять из больших параллельных массивов дискретных сайтов связывания микротрубочек, каждый из которых напоминает одну кинетохору почкующихся дрожжей [112]. Другой элемент кинетохоры, связывающий микротрубочки, специфичный для грибов, является гетеро- декамерный комплекс Dam1 (Dam1c) [113,114,115]. Dam1c локализуется в кинетохорах Ndc80c-зависимым образом и вносит основной вклад в прикрепление кинетохор к микротрубочкам у дрожжей [102,116].Очищенный Dam1c спонтанно собирается в шестнадцатичленные, окружающие микротрубочки кольца [117,118], которые могут функционировать как скользящие воротнички (как обсуждается ниже) [119,120]. Среднее количество комплексов Dam1 на кинетохору достаточно для образования приблизительно одного кольца [107] или, возможно, двух [108] на прикрепленную микротрубочку. За пределами грибов, комплекс Ska, как предполагается, обеспечивает функционально подобную активность [121, 122], возможно, посредством олигомеризации, хотя, по-видимому, он не формирует кольца, окружающие микротрубочки [122].

14. К комплексному обзору устройства концевой заделки кинетохоры

Биохимическая сложность кинетохоры представляет собой серьезную проблему для понимания того, как она функционирует. Существует множество различных белков, связывающих микротрубочки, в том числе моторные и немоторные белки, обсуждаемые выше, а также дополнительные компоненты. К сожалению, наше текущее понимание слишком рудиментарно, чтобы определить отдельные роли для всех из них. Современные модели для соединения наконечников (а также для других функций кинетохор, например.g., сигнализация контрольных точек и исправление ошибок) подчеркивают немоторные связывающие микротрубочки, особенно Ndc80c и, у дрожжей, Dam1c. Заякоренные в кинетохоре моторные белки также, скорее всего, будут важны. В принципе, двигатели кинетохор могут участвовать в соединении кончиков через их обычную ходьбу под действием АТФ по сторонам микротрубочек или, альтернативно, они могут участвовать способом, независимым от обычной подвижности при ходьбе [123,124,125,126,127]. То есть двигатели кинетохор могут функционировать в соединении кончиков по существу как фибриллы, которые временно связываются и отсоединяются от микротрубочек, подобно немоторным связывающим микротрубочки фибриллам, Ndc80c.Другой класс молекул, которые, вероятно, вносят вклад, — это связующие на концах микротрубочки, такие как молекулы семейства TOG (сверхэкспрессируемый опухолью ген). Белки семейства TOG (Stu2 у почкующихся дрожжей, XMAP215 у Xenopus и chTOG у людей) локализуются в кинетохорах [102,128,129,130,131,132,133,134] и вносят непосредственный вклад в концевое соединение in vitro [135,136]. Фенотипы нокдауна для этих плюс-концевых связывающих веществ и для моторов кинетохор часто являются сложными, предполагая их роли во множестве различных аспектов митоза и затрудняющих конкретную оценку их ролей в сцеплении кончиков кинетохор in vivo.

Интересная возможность состоит в том, что различные связывающие микротрубочки вещества на кинетохорах могут взаимодействовать с разными структурными особенностями на кончике микротрубочек. Напр., Некоторые могут связывать прямые тубулины в стенке микротрубочек, в то время как другие могут предпочесть изогнутые протофиламенты, отслаивающиеся от стенки, а третьи могут даже связывать продольные грани димеров тубулина, экспонируемые уникальным образом на крайних концевых субъединицах. Требуется дополнительная работа, чтобы проверить эту идею. Особенно полезной была бы лучшая структурная информация о релевантных связующих микротрубочках и более сложные биофизические методы для оценки важности специфических контактов микротрубочек и специфических конформаций тубулина в сцеплении кончиков кинетохор.

Между тем, с целью обсуждения потенциальных биофизических механизмов связывания кончиков, в настоящее время кажется достаточным рассматривать кинетохору просто как набор гибких связывающих микротрубочки фибрилл, дополненных у дрожжей (и, возможно, других организмов) дополнительными микротрубочками. -связи, которые потенциально могут олигомеризоваться в кольца, окружающие микротрубочки. Эта точка зрения подтверждается конфигурацией изолированных дрожжевых кинетохорных частиц, наблюдаемых на электронных микрофотографиях, которые показывают от 5 до 7 связывающих микротрубочки фибрилл, связанных с центральным узлом и иногда связанных с кольцом, окружающим микротрубочки [137].Это также согласуется с электронно-томографической визуализацией границ раздела кинетохора-микротрубочка in vivo во множестве типов клеток [138, 139].

15. Микротрубочки могут быть двигателями, которые управляют движением хромосом в направлении полюсов во время анафазы A

Движение кинетохор, связанное с концом, подразумевает производство силы на границе раздела кинетохора-микротрубочка. Если обычная двигательная активность необязательна, по крайней мере, для некоторых организмов, то как преобразовывается энергия, чтобы управлять этой подвижностью? Микротрубочки, вероятно, служат двигателями.

Это старая концепция, согласно которой анафаза А может запускаться непосредственно путем разборки волокон веретена. Наблюдения Иноуэ с использованием поляризационной микроскопии показали не только то, что веретено состоит из двулучепреломляющих волокон, но также и то, что движение хромосомы к полюсу может быть вызвано искусственным растворением двулучепреломляющего материала, например, с использованием обработки холодом [140]. Энтузиазм по поводу механизма, управляемого волокнами, возможно, временно ослаб после открытия моторных белков на кинетохорах [140].Однако он, по-видимому, восстановил тягу, когда улучшения в биохимической обработке тубулина позволили in vitro восстановить движение, вызванное разборкой микротрубочек [123,141], без двигательной активности, приводимой в действие АТФ [126] (обзор [140]). Дальнейшее подтверждение пришло из открытий, что немоторные связывающие микротрубочки внутри кинетохоров жизненно важны для прикрепления кинетохор к веретену in vivo и что они могут восстанавливать сцепление кончиков in vitro. Микротрубочки — это белковые полимеры, состоящие из тысяч αβ-тубулинов, упакованных вместе в продольные ряды, называемые «протофиламентами», которые соединяются латерально, образуя миниатюрную трубку [142].В присутствии GTP микротрубочки спонтанно самоорганизуются и они стохастически переключаются между периодами устойчивого роста и быстрого сокращения, поведение, называемое «динамической нестабильностью» [13,14]. Динамическая нестабильность обеспечивается гидролизом GTP внутри αβ-тубулина. Рост происходит за счет добавления GTP-содержащих тубулинов на кончики филаментов. Сборка запускает гидролиз и высвобождение фосфата, поэтому тело микротрубочки состоит в основном из GDP-тубулина с «крышками» GTP-тубулина на растущих концах [143].GDP-тубулин по своей природе изогнут, но внутри микротрубочки он удерживается прямым — и, следовательно, механически напряженным — связями, которые он формирует со своими соседями по решетке [144]. GTP-тубулин может быть по своей природе более прямым, чем GDP-тубулин [145], хотя недавняя работа ставит под сомнение это представление [146]. В любом случае ясно, что некоторая энергия от гидролиза GTP сохраняется внутри решетки GDP [147,148], частично в форме кривизны-деформации [143], и что эта накопленная энергия делает микротрубочки нестабильными без защитных концевых заглушек.Отрыв GTP-cap на растущем конце вызывает немедленную разборку [149]. Во время разборки протофиламенты сначала изгибаются наружу от кончика филамента, высвобождая свою деформацию кривизны, а затем распадаются [144]. Энергия, выделяющаяся при разборке наконечника, потенциально может быть использована для движения анафазы А от хромосомы к полюсу.

16. Очищенные кинетохоры и субкомплексы — отличные соединители кончиков.

Прямое доказательство того, что энергия действительно может быть использована при разборке микротрубочек, получено в анализах подвижности in vitro с использованием очищенных субкомплексов кинетохор или изолированных кинетохорных частиц для восстановления движения, вызванного разборкой.С помощью покадровой флуоресцентной микроскопии можно увидеть, что олигомерные сборки рекомбинантных флуоресцентно-меченных Ndc80c [150] или Dam1c [120,151,152] отслеживаются с укорачивающимися кончиками микротрубочек. Присоединение комплексов к микрошарикам позволяет манипулировать ими с помощью лазерной ловушки и показывает, что они могут отслеживать, даже когда противодействующая сила применяется непрерывно (рис. 7). В самых ранних анализах с лазерной ловушкой такого типа использовались концевые соединители, сделанные только из рекомбинантного Dam1c или Ndc80c, которые отслеживали один или два пиконьютона [119, 150].Эффективность связывания улучшилась за счет включения дополнительных элементов кинетохор, связывающих микротрубочки [153,154], с использованием нативных кинетохорных частиц, выделенных из дрожжей [58], и с использованием гибких связок для связывания субкомплексов с шариками [155]. Дальнейшие улучшения кажутся вероятными, особенно в связи с тем, что продолжающиеся достижения в биохимии кинетохор позволяют воссоздавать все более полные и стабильные сборки кинетохор [156,157,158]. Однако эффективность, достигаемая в анализах соединения наконечника лазерной ловушки, уже обеспечивает достаточно хорошее соответствие физиологическим условиям.Частицы кинетохор нативных почкующихся дрожжей остаются прикрепленными к динамическим кончикам микротрубочек в среднем в течение 50 минут, при этом непрерывно поддерживая напряжение 5 пН [58,135]. Эти статистические данные выгодно отличаются от общей продолжительности митоза почкующихся дрожжей, которая обычно составляет 69]. Противодействующие силы до 29 пН необходимы, чтобы остановить движение концевых соединителей, вызванное разборкой, сделанных из рекомбинантного Dam1c, связанного с шариками посредством длинных тросов [155]. Эта сила срыва выгодно отличается от предполагаемой максимальной направленной к полюсу силы, производимой на прикрепленную к кинетохоре микротрубочку во время анафазы A, которая составляет от 12 до 50 pN (как обсуждалось выше) [68].

17. Модель конформационной волны для движения, управляемого разборкой

Два класса моделей предлагаются для объяснения движения кинетохор, управляемого разборкой, конформационной волны и смещенной диффузии (рис. 8). Согласно модели конформационных волн, кинетохора буквально перемещается по волне скручивающихся протофиламентов, которая распространяется вниз по микротрубочке, когда она разбирается. Чтобы управлять движением, протофиламенты, как предполагается, натягиваются непосредственно на кинетохору, когда они изгибаются наружу из разборного наконечника [141].Доказательства, подтверждающие эту модель, убедительны, но не окончательны [159]. Олигомерные кольца Dam1c кажутся идеальными структурами для удержания завитков протофиламентов [117,118,160,161], и Dam1c действительно вносит основной вклад в стабильность и прочность сцепления кинетохор-микротрубочки in vitro [58,162], действуя как фактор процессивности для усиления основанного на Ndc80c сцепление [154,163]. Вклад Dam1c в концевое соединение максимален, когда он гибко закреплен [155] и когда свободный Dam1c также присутствует в растворе [152,162], предположительно потому, что эти условия облегчают олигомеризацию Dam1c в кольцо, окружающее микротрубочки.Частичный субкомплекс Dam1, который специфически дефицитен по олигомеризации, образует концевые прикрепления, которые намного менее стабильны, чем те, которые образуются полным комплексом дикого типа [162]. Однако прямые доказательства того, что усиление концевого сцепления, обеспечиваемое олигомерами Dam1c, зависит от скручивающихся протофиламентов, отсутствуют. Полные кольца, окружающие микротрубочки, не являются строго необходимыми для соединения кончиков на основе Dam1c [151,152]. В принципе, кольца Dam1c могут функционировать за счет смещенной диффузии (как обсуждается в [159,164]).Кольца Dam1c не встречаются вне грибов, но их отсутствие не обязательно исключает механизм конформационных волн. Другие молекулы и структуры могут использовать скручивающиеся протофиламенты. У людей и других эукариот, например, комплекс Ska может действовать как стабилизатор прикрепления аналогично Dam1c [121,122,165]. Комплекс Ska, по-видимому, не формирует олигомерные кольца, окружающие микротрубочки, но подобно Dam1c он может отслеживать с помощью разборных кончиков [166]. Комплекс Ska также димеризуется и может образовывать боковые мостики между соседними комплексами Ndc80 [122].Эти боковые мостики могут зацепить протофиламенты для завивки. Электронные томограммы с высоким разрешением показывают протофиламенты, изгибающиеся наружу от концов прикрепленных к кинетохорам (и не кинетохор) микротрубочек в веретенах млекопитающих (PtK1) [138, 167]. Иногда можно различить фибриллы, исходящие из кинетохор и соединяющиеся с завитками протофиламентов [138], что указывает на присутствие фибриллярного белка с преимущественным сродством к изогнутым протофиламентам. В соответствии с этой возможностью, кинетохорный белок Cenp-F содержит N-концевую область связывания микротрубочек, которая связывается преимущественно с кольцевыми и завитковидными олигомерами тубулина (образованными в присутствии доластатина-10 и винбластина, соответственно) [168].Бусинки, украшенные N-концевыми частями Cenp-F, могут отслеживаться с разборкой кончиков микротрубочек против сил 3 pN [168], указывая тем самым, что его активность по связыванию локонов может вносить значительный вклад в сцепление кончиков.

18. Модель предвзятой диффузии для движения, управляемого разборкой

Движение кинетохор, управляемое разборкой, также, вероятно, частично зависит от смещенной диффузии, механизма, впервые предложенного на чисто теоретических основаниях Хиллом [169]. С этой точки зрения множественные связывающие микротрубочки элементы внутри кинетохоры образуют диффузное прикрепление к кончику микротрубочки (Рис. 8b).Тепловым движениям, которые приводят к большему количеству связывающих элементов в пределах досягаемости наконечника, способствует энергия связывания этих элементов с микротрубочкой. И наоборот, тепловые движения от наконечника нежелательны, потому что они уменьшают количество связывающих элементов, которые могут достичь наконечника, и, таким образом, они требуют некоторой энергии связи для преодоления. Хилл теоретически показал, что этого смещения достаточно, чтобы обеспечить постоянное отслеживание с помощью демонтирующего кончика микротрубочек, даже против внешней нагрузки. Термально управляемая диффузия вдоль решетки микротрубочек является общим свойством многих индивидуальных кинетохорных белков и субкомплексов.На уровне одиночных молекул и небольших олигомеров Ndc80c [150], Dam1c [151], Ska complex [166] и Cenp-F [168] быстро связываются и расщепляются с микротрубочками и, будучи связанными, быстро диффундируют по решетке. . Когда они связаны далеко от кончика микротрубочек и в отсутствие внешней нагрузки, их диффузионное движение является случайным (вероятность движения в любом направлении случайна) [150, 151, 166, 168]. Когда они сталкиваются с разборным наконечником, смещение в их диффузии может наблюдаться непосредственно [150].Такое поведение поразительно хорошо согласуется со смещенным механизмом диффузии. Определенные структурные особенности субкомплексов кинетохор также кажутся идеальными для смещенной диффузии. Ndc80c [104], Dam1c [164], Ska complex [122] и Cenp-F [170], по-видимому, связывают микротрубочки через гибкие домены, которые могут позволить некоторым нести нагрузку, в то время как другие расщепляются и повторно связываются в новых местах, позволяя кинетохора для перемещения или переориентации на микротрубочке без отделения. Диффузия вдоль решетки микротрубочек пренебрежимо медленная для больших сборок Dam1c [152] и для целых нативных частиц кинетохор [58], но эти наблюдения не исключают смещенную диффузию как механизм концевого соединения этими сборками.Не ожидается, что большие соединители, которые содержат большое количество связывающих микротрубочки веществ, будут заметно диффундировать вдоль решетки, но они, тем не менее, могут надежно отслеживать с помощью разборного наконечника посредством чистой смещенной диффузии [150, 169]. В этих случаях происходит надежное отслеживание иглы, несмотря на низкую подвижность решетки, поскольку диффузионная подвижность увеличивается, когда острие начинает демонтироваться из-под соединителя. Это, в свою очередь, способствует движению в направлении решетки и образованию новых связей, что приводит к устойчивому состоянию, в котором скорость образования новых связей уравновешивается потерями из-за разборки.

19. Движение, связанное с узлом наконечника

Восстановленные соединители наконечников, изготовленные из различных комбинаций субкомплексов кинетохор [119,154] и из нативных кинетохорных частиц [58,135,171,172], также могут поддерживать устойчивые, несущие напряжение прикрепления к сборочным наконечникам (например, см. Рисунок 7) . Их движение, связанное со сборкой, in vitro аналогично ситуациям in vivo, когда кинетохоры движутся против полюсов вместе с растущими кончиками микротрубочек, например, во время преанафазных хромосомных колебаний или во время временных инверсий движения анафазы А от хромосомы к полюсу.Восстановленные соединители обычно принимают «нейтральное» состояние, очень похожее на состояние кинетохор, движущихся в противоположном направлении in vivo, требуя внешнего напряжения для отслеживания роста кончика, а не автономного толчка кончика растущего кончика. Сродство между соединителем и микротрубочкой создает трение белка, которое сопротивляется движению вдоль филамента [169] — эффект, который иногда называют «скользящей муфтой» [32]. Принимая во внимание, что скрученные протофиламенты гораздо менее заметны при сборке кончиков in vitro [144], и что механизм конформационных волн основан на скрученных протофиламентах, можно ожидать, что чисто конформационный волновой элемент связи будет отделяться быстрее во время сборки, чем во время разборки.Но верно и обратное: восстановленные соединители обычно гораздо медленнее отделяются от монтажных наконечников [58,135,171]. На основании электронно-томографических исследований кончиков микротрубочек в клетках было высказано предположение, что протофиламенты могут скручиваться как при разборке, так и при сборке кончиков in vivo [138, 139, 173]. Однако многие из прикрепленных к кинетохорам плюсовых концов, исследованных в другом электронном томографическом исследовании, были явно тупыми с прямыми протофиламентами [167]. И в клетках, обработанных нокодазолом для ускорения разборки кончиков, в том же исследовании было обнаружено, что концы микротрубочек, прикрепленные к кинетохорам, преимущественно расширялись, с скручивающимися протофиламентами [167], что подтверждает общее мнение о том, что скручивающиеся протофиламенты ограничиваются в основном разборкой кончиков in vivo, как в пробирка.Листообразные удлинения или тупые структуры, а не завитки, также были описаны при сборке кончиков микротрубочек в экстрактах митотических и интерфазных клеток [174,175,176]. Чисто конформационный волновой элемент связи должен очень быстро отсоединяться от этих тупых концов микротрубочек. Механизм смещенной диффузии имеет меньше структурных ограничений и может поддерживать стабильное прикрепление независимо от структуры кончика микротрубочек.

20. Механизм направленного к полюсу потока может отличаться для микротрубочек, прикрепленных к кинетохорам, и микротрубочек, не являющихся кинетохорами.

Направление потока микротрубочек на полюс вносит вклад в движение анафазы А от хромосомы к полюсу у многих организмов (Таблица 1).На клеточном уровне поток кажется очень близким родственником движению кинетохор относительно плюсовых концов микротрубочек. Поток связан с разборкой обращенных к полюсу минус-концов микротрубочек веретена, точно так же, как движение кинетохор связано с разборкой положительного конца. Поток предполагает создание силы на или около деполимеризующихся минус-концов, так же как движение кинетохор, связанное с разборкой, предполагает создание силы на положительных концах. Скорость обоих процессов зависит от одних и тех же типов регуляторных молекул микротрубочек.Однако неясно, имеют ли они принципиально схожие механизмы. Молекулярная и биофизическая основа направленного к полюсу потока микротрубочек, не являющихся кинетохорами, достаточно хорошо изучена, но этого нельзя сказать о потоке микротрубочек, прикрепленных к кинетохорам. Некоторые некинетохорные микротрубочки, исходящие из противоположных полюсов веретена, переплетаются внутри центрального веретена с образованием антипараллельных пучков — так называемых «межполярных микротрубочек» [3]. Эти связки удерживаются вместе с помощью набора перекрестно-сшивающих белков микротрубочек, включая kinesin-5s, которые являются биполярными (тетрамерными), процессивными, плюс двигатели, направленные на концы [3].Отдельные очищенные молекулы кинезина-5 могут связывать две антипараллельные микротрубочки in vitro и одновременно двигаться к обоим плюс-концам, тем самым вызывая выступание минус-концов наружу [177]. Таким образом, кинезин-5, по-видимому, идеально подходит для выталкивания межполярных микротрубочек наружу и управления их потоком. Но микротрубочки, прикрепленные к кинетохорам, обычно имеют параллельную полярность [178], а не антипараллельны, и, следовательно, их поток не может быть объяснен прямым антипараллельным скользящим действием. Присоединенные к кинетохоре микротрубочки могут латерально ассоциироваться с микротрубочками, не являющимися кинетохорами [20,60], и было высказано предположение, что, возможно, поток микротрубочек кинетохор управляется косвенно, потоком их латерально связанных соседей (например.g., см. [179]). Альтернативно, механизмы, управляющие потоком кинетохор-микротрубочек, могут отличаться от механизмов, управляющих потоком некинетохорных микротрубочек. Фармакологическое ингибирование кинезина-5 резко замедляет поток в веретенах экстракта Xenopus, в которых большинство микротрубочек не связаны с кинетохорами [180, 181]. Но в культивируемых клетках млекопитающих (PtK1), где большая часть микротрубочек прикреплена к кинетохорам, ингибирование кинезина-5 оказывает лишь незначительное влияние на скорость потока [179]. Более того, поток продолжается даже тогда, когда веретена монополярны и, следовательно, лишены антипараллельных микротрубочек [179], указывая тем самым, что ни кинезин-5, ни антипараллельные микротрубочки не требуются для потока в этих клетках.Сходным образом связанные с кинетохорами волокна микротрубочек, которые механически отсоединяются и изолированы от веретен в потоке сперматоцитов кузнечиков при очевидном отсутствии антипараллельных соседних микротрубочек [182]. Т.о., кажется, что поток микротрубочек, прикрепленных к кинетохорам, может управляться другим механизмом, независимым от кинезин-5-зависимого скольжения соседних антипараллельных (межполярных) микротрубочек.

21. Потенциальные биофизические механизмы потока кинетохор-микротрубочек.

Поток обычно зависит от активности дестабилизирующих микротрубочки ферментов, которые концентрируются на полюсах веретена.Ферменты семейства кинезин-13 представляют собой деполимеразы с АТФ, которые катализируют разборку микротрубочек путем удаления субъединиц тубулина с их концов [183,184,185]. Кинезин-13 концентрируется на полюсах в различных типах веретена, например, в митотических клетках дрозофилы [36], клетках человека [186, 187] и экстрактах клеток лягушки [188]. Истощение локализованного на полюсах кинезина-13 дрозофилы, KLP10A, специфически замедляет поток микротрубочек в этом организме и одновременно снижает скорость движения анафазы А от хромосомы к полюсу [36,45,46].Сходным образом, компонент потока анафазы A в митотических клетках человека замедляется за счет совместного истощения локализованного на полюсе и ассоциированного с центромерой кинезина-13, Kif2a и MCAK, соответственно [30]. Ферменты, разделяющие микротрубочки семейства AAA, spastin и fidgetin, также участвуют в потоке микротрубочек, направленном к полюсу, в Drosophila [44,189] и человеческих клетках [52]. Их разделяющая активность может быть важна для создания свободных минус-концов микротрубочек (т.е. не закрытых кольцами γ-тубулина) и тем самым облегчения катализа разборки минус-конца с помощью кинезина-13.В совокупности эти наблюдения показывают, что дестабилизирующая активность микротрубочек на полюсах определяет скорость потока. Но губернатор — это не обязательно мотор. Дестабилизаторы микротрубочек могут или не могут быть напрямую вовлечены в поддержание несущих нагрузок прикреплений между микротрубочками и полюсами веретена или в производство сил, управляющих потоком. В некоторых клетках деполимеризаторы микротрубочек также регулируют скорость движения кинетохор, связанных с разборкой [36,45,53], но они обычно не рассматриваются как первичные продуценты силы.Что же тогда представляет собой двигатель потока? Можно представить конформационную волновую или смещенную диффузионную связь кончика, которая напрямую использует энергию, высвобождаемую при разборке минус-конца, аналогично механизмам, обсужденным выше для подвижности кинетохор. Неизвестно, несут ли полюсы веретена элементы, связывающие микротрубочки со свойствами, необходимыми для поддержки такого соединения кончиков, но некоторые данные свидетельствуют об этом: обнаружено, что локализованный на полюсах кинезин-13 дрозофилы, KLP10A, олигомеризуется в кольца, окружающие микротрубочки [190,191], напоминают кольца Dam1c, участвующие в сцеплении кончиков кинетохор.Другие kinesin-13, такие как Drosophila KLP59C и MCAK человека, которые локализуются в основном около центромер [36,192], могут также образовывать олигомерные кольца вокруг микротрубочек [190], а MCAK может функционировать как кончик-сцепитель in vitro [193]. Вместе эти наблюдения предполагают, что кинезин-13s может функционировать не только как деполимеризаторы, но также как концевые соединители на полюсах веретена и, возможно, также и на кинетохорах. Двигатели, направленные на минус-конец, особенно динеин, также могут участвовать в управлении потоком микротрубочек, направленным к полюсу.Динеин помогает сфокусировать микротрубочки на полюсах в различных типах клеток. Фокусировка полюсов с помощью двигателей, пожалуй, лучше всего понятна в митотических экстрактах яиц Xenopus, где направленное на минус-конец движение олигомеров динеина может сближать минус-концы с образованием звездочек поляризованных микротрубочек независимо от зарождения центросом [194,195]. Динеин также участвует в фокусировке полюсов в Drosophila (S2 [196]) и клетках млекопитающих (CV-1 почки обезьяны [197,198]; PtK2 крысы-кенгуру [60]; RPE1 человека [61]). Фокусировка полюсов с помощью dynein, вероятно, требует олигомеризации [199,200] посредством взаимодействия с каркасными белками, такими как NuMA [195,198], и его важность для сборки и поддержания биполярных веретен широко изучена.Недавняя работа вовлекает dynein в движение к полюсу, в частности, микротрубочек, прикрепленных к кинетохорам. Связки прикрепленных к кинетохорам микротрубочек, которые не доходят до полюса веретена, иногда наблюдаются в нормальных веретенах [61,196], а также могут быть созданы искусственно с помощью лазерной микрохирургии [60,61]. Когда волокно микротрубочек, прикрепленное к одной кинетохоре биориентированной пары, разрывается микрохирургическим путем во время метафазы, отрезанный отрезок волокна и прикрепленный к нему кинетохора первоначально отскакивают к сестринской кинетохоре на неразрезанной стороне, поскольку хроматин, связывающий две сестры, расслабляется.Это расслабление ожидается из-за внезапной потери напряжения. Но в течение нескольких десятков секунд отрезок волокна внезапно толкается к полюсу [60,61]. Если волокно разрывается в ранней анафазе, поведение аналогично: нет очевидной начальной отдачи, предположительно из-за отсутствия когезии сестринского хроматина в анафазе, но отрезок волокна и кинетохора внезапно дергаются к полюсу (рис. 9) [61], просто поскольку они находятся в метафазе. Обращенные к полюсу концы отрезков волокон приводят к этим быстрым движениям к полюсам, по-видимому, за счет латерального соединения с соседними неразрезанными микротрубочками.Флуоресцентная визуализация показывает быстрое привлечение NuMA и динеина на вновь образованные минусовые концы. Предположительно этот динеин управляет движением минус-концов к полюсу вдоль соседних микротрубочек, закрепленных на полюсах (Рис. 10). Эта активность наблюдалась как в пре-анафазных, так и в анафазных клетках, и это показывает, что веретено способно к замечательным актам самовосстановления. Неясно, может ли подобный механизм управлять постоянным потоком прикрепленных к кинетохорам микротрубочек во время анафазы. Идея кажется привлекательной, хотя поток в S2 клетках Drosophila, как было показано, не зависит от динеина [201].Также остаются вопросы о том, как задействуется активность деполимеразы, когда двигатели и минусовые концы достигают полюса.

22. Потеря напряжения сама по себе может быть достаточной для запуска движения от хромосомы к полюсу в анафазе

Изучив возможные механизмы, лежащие в основе движения от хромосомы к полюсу во время анафазы A, интересно вкратце вернуться в конце главы. , к началу анафазы. Анафаза начинается резко. Сцепление между сестринскими хроматидами протеолитически удаляется, по существу, одновременно со всех сестринских пар.Внезапно теряется механическое напряжение на всех кинетохорах. Достаточно ли этой внезапной потери напряжения, чтобы вызвать движение кинетохор к полюсу? Или врожденная активность аппарата анафазы модулируется регуляторными сигналами при переходе от метафазы к анафазе?

Еще со времен Остергрена убедительная гипотеза заключалась в том, что одни и те же механизмы могут объяснять как выравнивание хромосом в метафазе, так и их движение к полюсу в анафазе (например, см. [140,202,203]).Микрохирургические исследования подтверждают эту точку зрения. Когда кинетохора, движущаяся против полюса во время метафазы, останавливается из-за абляции своей сестры (как описано выше), она останавливается только временно, на ~ 20 с, а затем начинает двигаться к полюсу, то есть с обратной анафазной направленностью [57]. ]. Этот переход к движению к полюсу, по-видимому, вызван потерей напряжения, когда хроматида отделяется от своей сестры. Подобное анафазе движение к полюсу может быть запущено в этом случае, потому что микрохирургическое разделение сестер близко имитирует нормальный триггер анафазы, ферментативное удаление сплоченности сестринских хроматид.Обе операции вызывают внезапную потерю натяжения между сестрами. Восстановление концевого соединения in vitro прямо показывает, что регуляторные сигналы не нужны для запуска движения кинетохор, вызванного разборкой. Натяжение, прикладываемое через концевые соединители на основе Dam1c [204] или через нативные дрожжевые кинетохорные частицы [58,135], способствует чистому росту прикрепленных микротрубочек. Напряжение ускоряет сборку наконечника, замедляет разборку, препятствует переключению с роста на укорочение («катастрофы») и способствует возобновлению роста («спасает») [58, 135].Влияние напряжения на частоту катастроф особенно драматично: при умеренных концентрациях свободного тубулина рост оголенного кончика микротрубочек обычно продолжается всего несколько минут до того, как произойдет катастрофа. Ассоциация расслабленной кинетохоры с кончиком увеличивает время непрерывного роста до ~ 8 мин, но катастрофы все еще случаются относительно часто. Однако приложение напряжения 6 пН может увеличить время непрерывного роста в 13 раз, до более чем 100 минут [58]. Таким образом, можно экспериментально вызвать длительный период связанного со сборкой движения кинетохоры, приложив 6 пН напряжения, а затем запустить движение, управляемое разборкой, по желанию, просто снизив натяжение [205].

23. Фосфорегуляторные изменения при переходе от метафазы к анафазе

Хотя простой потери напряжения достаточно для запуска анафазного А-подобного переключателя в направленности кинетохор in vivo [57,140] и in vitro [58,135,205], было бы наивным Предположим, что аппарат анафазы не регулируется во время истинного перехода от метафазы к анафазе in vivo. К настоящему времени ясно, что несколько различных механизмов могут лежать в основе почти каждого аспекта митоза. Тот же самый биохимический сигнальный каскад, который вызывает внезапное протеолитическое разрушение сестринской когезии, также разрушает циклин B, тем самым дезактивируя циклин-зависимую киназу CDK1 и вызывая множество глобальных клеточных изменений, связанных с выходом из митоза.Циклин B и CDK1, как известно, регулируют динамику микротрубочек (например, см. [194, 206]), и предполагается, что потеря циклина B стабилизирует межполярные микротрубочки, способствуя удлинению веретена анафазы B ([207]; как также обсуждается в следующей главе, посвященной). анафаза B [3]). Если микротрубочки, прикрепленные к кинетохорам, были бы подобным образом стабилизированы, эффект на анафазу A был бы антагонистическим, потенциально замедляя движение хромосомы к полюсу за счет замедления разборки как на плюс, так и на минус концах. Однако данные, полученные на почкующихся дрожжах [206] и клетках культуры тканей человека [208], показывают, что дефосфорилирование, связанное с дезактивацией CDK1 (или с активацией его антагонистической фосфатазы, Cdc15), помогает стимулировать, а не противодействовать анафазе A.В клетках человека химическое ингибирование дефосфорилирования преобразует обычно плавное движение хромосомы к полюсу с небольшими изменениями направления в гораздо более колебательное движение с частыми изменениями в обратном направлении [208]. Другим следствием деактивации CDK1 является высвобождение киназы Aurora B из центромер (вместе с ее со-членами в хромосомном пассажирском комплексе). Освобождение Aurora B гарантирует, что внезапная потеря напряжения кинетохор в начале анафазы не активирует механизм коррекции прометафазных ошибок, который в противном случае дестабилизировал бы прикрепление кинетохор к микротрубочкам.(Коррекция ошибок подробно обсуждается в главе Грищука и Лэмпсона [17].) Это освобождение кинетохоров от влияния Авроры B должно усилить их прикрепление к микротрубочкам веретена, и, действительно, Никлас отметил в своих ранних экспериментах по микроманипуляции, что хромосомы стали труднее отделять, когда клетки переходят из прометафазы в анафазу [209]. Освобождение кинетохоров от влияния Aurora B может также влиять на динамику положительных концов микротрубочек, прикрепленных к кинетохорам: ингибиторы Aurora стабилизируют прикрепленные к кинетохорам микротрубочки в клетках [210] и, наоборот, фосфомиметические мутации в сайтах-мишенях Aurora B на Ndc80c и Dam1c дестабилизируют кинетохоры -прикрепленные плюсовые концы in vitro [171, 211].Оба наблюдения указывают на то, что Aurora B дестабилизирует присоединенные к кинетохорам плюс-концы. Таким образом, удаление Aurora B в начале анафазы должно вызывать стабилизацию прикрепленных к кинетохорам концов, что было бы антагонистично по отношению к движению анафазы A от хромосомы к полюсу. Возможно, эффекты стабилизации микротрубочек, вызванные потерей Aurora B, в достаточной мере нейтрализуются дестабилизацией из-за потери напряжения или другими еще не идентифицированными регуляторными событиями. Очевидно, что необходимы дополнительные исследования, чтобы понять, как фосфорегуляторные изменения в начале анафазы регулируют движение хромосомы к полюсу.

24. Заключение

Анафаза — это драматический финал митоза, когда после завершения тщательной подготовки фактическая работа по разделению дублированных хромосом происходит в прекрасно организованной манере. Кинетохоры — это основные места, где силы воздействуют на хромосомы. Интерфейсы между кинетохорами и плюс-концами микротрубочек являются первичными сайтами, где возникают силы, управляющие движением анафазы А от хромосомы к полюсу. Сами микротрубочки, вероятно, будут действовать как нетрадиционные двигатели, преобразовывая химическую энергию гидролиза GTP в механическую деформацию, временно сохраняя эту энергию деформации в своих решетках, а затем высвобождая ее во время разборки.Высвобождаемая энергия частично используется немоторными, связывающими микротрубочки кинетохорными элементами, возможно, посредством серфинга на волнах скручивающихся протофиламентов. Между тем, во многих типах клеток микротрубочки, прикрепленные к кинетохорам, также стабильно транспортируются в направлении полюсов с помощью механизмов, которые еще не совсем понятны. Этот направленный к полюсу поток дополняет сёрфинг на кинетохоре. Движение от хромосомы к полюсу, вероятно, запускается при переходе от метафазы к анафазе отчасти из-за простой потери напряжения, которое происходит, когда сцепление между сестринскими хроматидами внезапно теряется, но также важны дополнительные фосфорегулирующие влияния.

Митоз животных клеток

Эта анимация демонстрирует стадии митоза в животной клетке. Используйте кнопки управления внизу, чтобы запустить полную анимацию. Щелкните любой промежуточный этап (например, Anaphase) и увидите типичный неподвижный кадр.

События во время митоза

Interphase : Клетки могут казаться неактивными на этой стадии, но все наоборот.Это самый продолжительный период полного клеточного цикла, в течение которого ДНК реплицируется, центриоли делятся и белки активно продуцируются. Для полного описания событий во время интерфазы прочтите о клеточном цикле.

Профаза : Во время этой первой митотической стадии ядрышко тускнеет, а хроматин (реплицированная ДНК и ассоциированные белки) конденсируется в хромосомы. Каждая реплицированная хромосома состоит из двух хроматид с одинаковой генетической информацией.Микротрубочки цитоскелета, отвечающие за форму клеток, подвижность и прикрепление к другим клеткам во время интерфазы, разбираются. Строительные блоки этих микротрубочек используются для роста митотического веретена из области центросом.

Прометафаза : На этой стадии ядерная оболочка разрушается, так что больше нет узнаваемого ядра. Некоторые волокна митотического веретена отходят от центросом и прикрепляются к кинетохорам, белковым пучкам в области центромеры на хромосомах, где соединяются сестринские хроматиды.Другие волокна веретена удлиняются, но вместо того, чтобы прикрепляться к хромосомам, перекрывают друг друга в центре клетки.

Метафаза : Натяжение волокон веретена выравнивает все хромосомы в одной плоскости в центре клетки.

Анафаза : волокна веретена укорачиваются, кинетохоры разделяются, а хроматиды (дочерние хромосомы) разделяются и начинают двигаться к полюсам клетки.

Телофаза : Дочерние хромосомы достигают полюсов, и волокна веретена, которые их разлучили, исчезают.

Цитокинез : волокна веретена, не прикрепленные к хромосомам, начинают разрушаться, пока не останется только часть перекрытия. Именно в этой области сократительное кольцо расщепляет клетку на две дочерние клетки. Затем микротрубочки реорганизуются в новый цитоскелет для возврата в интерфазу.

Раковые клетки относительно быстро размножаются в культуре. В CAM раковых клеток сравните продолжительность времени, в течение которого эти клетки проводят в интерфазе, с временем, в течение которого происходит митоз.

Отладка

— gdb — как разобрать всю функцию, включая циклы

Пояснение: Я использую GDB для разборки моих самописных исполняемых файлов ELF64, которые собраны с использованием NASM. Когда я пытаюсь разобрать с помощью disassemble main , я получаю только следующий результат:

  Дамп ассемблерного кода для функции main:
0x0000000000401110 <+0>: mov rbp, rsp
0x0000000000401113 <+3>: mov ebx, 0x400
Конец дампа ассемблера. 

GDB, очевидно, дает мне только первые две строки, те, которые находятся перед циклом, начало которого обозначено цифрой .loop_clear начинается. Когда я пытаюсь указать такие строки, как disassemble 0x0000000000401116, 0x0000000000401119 , я получаю следующий результат:

  0x0000000000401116 
: добавить BYTE PTR [rax], al
0x0000000000401118 : cmp rbx, 0x0
  

Как видно, есть строки, которые не показаны в первом дампе.В следующей попытке я пытаюсь явно дизассемблировать main.loop_clear , вызывая disassemble main.loop_clear , но у меня остается Попытка извлечь компонент значения, не являющийся структурой.

Очевидно, что команды, которые я использую, или синтаксис неверны, но я не смог найти полезную информацию во время моего исследования, чтобы исправить эту проблему.

Вопрос: Отсюда мой вопрос: как можно создать полный и согласованный дамп дизассемблированного исполняемого файла, если дизассемблируемая функция содержит метки / циклы? Кроме того, можно ли сам шлейф разобрать?

Источник:

  глобальный основной

раздел .текст
основной:

    ; инициализировать базовый указатель (rbp)
    mov rbp, rsp

    ; установить размер кадра стека и очистить
    mov rbx, 0x400
    .loop_clear:
    cmp rbx, 0x0
    je .exit_clear
    mov байт [rsp], 0x0
    dec rsp
    dec rbx
    jmp .loop_clear
    .exit_clear:

    ; подготовить указатель индекса массива
    mov rcx, rsp

    ; перенесенный исходный код мозгового хрена
    mov bl, [rcx]
    доп. бл, 65
    mov [rcx], bl
    mov rsi, rcx
    mov rdx, 0x1
    mov rdi, 0x1
    mov rax, 0x1
    системный вызов; запись (fd = 1, buf, size = 1 байт)

    ; выйти изящно
    mov rax, 0x3
    mov rdi, 0x0
    системный вызов; закрыть (0)
    Ret
  

Разборка: DEAR Support Team

Разборка может использоваться для разделения предметов инвентаря на компоненты.Функцию разборки можно использовать только с элементами, составные части которых указаны в ведомости материалов. Сборка / разборка предназначена для использования для простых операций, таких как разборка пакетов, состоящих из нескольких элементов, на их составные части.

ПРИМЕЧАНИЕ: В этой статье описывается функциональность спецификации для элементов сборки. DEAR теперь поддерживает более сложные производственные операции. Эти продукты используют более сложную производственную спецификацию. См. «Приступая к работе с модулем производства» для получения подробной информации.

Для товаров, которые продаются по отдельности и в ящиках (например, одинарная бутылка вина, упаковка из 6, 12 штук), а также в единицах преобразования, мы рекомендуем использовать функцию дополнительных единиц измерения. Это лучше покажет доступность различных конфигураций в отчете о доступности. Функционально это идентично ручной разборке ящика предметов на несколько отдельных предметов.

Разборка недоступна для инвентарных предметов с типом = Non-inventory .

По умолчанию затраты на разборку распределяются поровну между строками компонентов Спецификации материалов.См. Раздел Затраты на разборку ниже, чтобы узнать, как по-другому разделить затраты — сначала проверьте здесь, если у вас возникли проблемы со стоимостью разборки.

Предварительные требования

Содержание

[наверх]

Функцию разборки можно использовать только с элементами, составные части которых указаны в Спецификации материалов. Если у вас уже есть продукты со спецификацией материалов, переходите к следующему шагу.

ПРИМЕЧАНИЕ: Для создания продукта со спецификацией материалов компоненты продуктов и услуг должны быть уже созданы в DEAR.

ПРИМЕЧАНИЕ: Если продукт A указан как компонент продукта B, продукт B не может быть указан как компонент продукта A. Это приведет к тому, что система не сможет авторизовать заказы на сборку / разборку.

Чтобы добавить спецификацию материалов к позиции:

1. При создании нового продукта или редактировании существующего продукта отметьте поле Bill of Materials в заголовке документа.
   
2. Активирует вкладку Спецификация ниже.Используйте + или Добавьте дополнительные элементы , чтобы выбрать продукты-компоненты из вашего инвентаря.
3. Введите Количество каждого компонента продукта, произведенного при разборке.
4. Введите Стоимость разборки процентов, если требуется. См. Дополнительную информацию в разделе «Стоимость разборки» ниже. Стоимость разборки% следует установить перед выполнением любых разборок.
   
5. Сервисные элементы, связанные с разборкой, можно включить, нажав + или Добавить дополнительные элементы в раздел «Трудозатраты и накладные расходы».Требуется включить расходный счет .
   
6. Сохраните товар.

ПРИМЕЧАНИЕ: Спецификация готового продукта оценивает стоимость с использованием средней стоимости, последней стоимости покупки или фиксированной стоимости покупки. Это только для справки. Фактическая стоимость разобранных продуктов будет рассчитана с использованием фактической стоимости сборки, выбранной в соответствии с ее методом калькуляции (FIFO, FEFO и т. Д.), И% затрат на разборку, указанных в спецификации — см. Ниже.Фактические затраты могут отличаться от оценочной «Итоговой» стоимости, отображаемой в спецификации.

Вы можете использовать отчет анализа разборки (см. Подробности ниже), чтобы проверить фактические затраты на каждую разборку.

Стоимость разборки

[вверх]

По умолчанию (когда% стоимости разборки оставлено пустым в Спецификации материалов) DEAR делит стоимость разобранного элемента поровну между строками компонентов, как показано ниже.

ПРИМЕЧАНИЕ: Стоимость разборки распределяется между ЛИНИЯМИ компонентов и игнорирует КОЛИЧЕСТВО НА ЛИНИЮ.

Вы можете изменить это, отредактировав Стоимость разборки% в Спецификации материалов для собранного продукта, как показано ниже. Стоимость на единицу и Общая стоимость (на строку) оценивается с использованием средней стоимости, последней стоимости покупки или фиксированной стоимости покупки и не может быть изменена вручную. Вы можете использовать Общую стоимость на строку / Общая стоимость, чтобы установить соответствующий процент затрат на разборку для компонентов.

% стоимости разборки следует установить перед выполнением любых операций по разборке.Любые затраты на обслуживание разборки будут разделены в соответствии со стоимостью разборки% (или, если оставить поле пустым, поровну между строками) и назначены на стоимость компонентов.

При включенной автоматической разборке одинаковый% стоимости разборки будет использоваться для всех авто-разборок и не может быть изменен. Для ручной разборки вы можете отредактировать% стоимости разборки во время операции, если это необходимо.

ПРИМЕЧАНИЕ: Спецификация предназначена только для справки. Фактическая стоимость разобранных изделий будет рассчитана на основе фактической стоимости сборки, подобранной в соответствии с ее методом калькуляции (FIFO, FEFO и т. Д.).) и% затрат на разборку, указанных в спецификации. Фактические затраты могут отличаться от оценочной «Итоговой» стоимости, отображаемой в спецификации.

Вы можете использовать отчет анализа разборки, чтобы проверить фактические затраты на каждую разборку.

Стоимость разборки и сборки может варьироваться. DEAR использует FIFO или FEFO на основе метода калькуляции стоимости продукта при обработке сборки, чтобы получить необходимую инвентарную карту, которая содержит стоимость. Если стоимость разная на разных картах, то в разных сборках будет применяться разная стоимость.Когда сборка будет завершена, DEAR выберет следующую доступную неиспользованную инвентарную карточку, и это может быть частично другой исходный запас, а не тот, который был произведен как разборка (поскольку для этого продукта есть другой оставшийся запас для этого продукта, и он будет использован первым. ). Это источник разницы в стоимости сборки и разборки.

В простом случае, когда нет другого запаса продуктов, участвующих в сборке, кроме запаса, полученного путем разборки, затраты будут точно соответствовать.Но в случае, если перед разборкой есть еще один запас для тех же продуктов в сборке, он будет использовать их, поскольку они были созданы ранее в соответствии с FIFO. Вы можете отслеживать, какие запасы использовались для каждого продукта, открыв вкладку «Движение» соответствующего продукта и переключившись на опцию «Показать движение количества и затрат».

[вверх]

Разборка может выполняться вручную или автоматически. Если вы продаете как продукты в сборе, так и комплектующие (например, ящики с пивом и бутылки с пивом), мы рекомендуем использовать функцию дополнительных единиц измерения.

Чтобы разобрать элемент вручную:

1. Перейдите к Производство → Новый → Разборка .
2. Выберите Место , где будет происходить разборка.
3. Выберите продукт в раскрывающемся меню. Будут показаны только продукты со спецификацией материалов.
4. Выберите счет Незавершенное производство .
5. Введите Количество для разборки.Используйте Максимальное количество , чтобы рассчитать максимальное количество разборок, которое может быть выполнено с вашим доступным инвентарем.
6. Вы также можете ввести необязательную дату завершения и Примечания .
   
7. Затем на вкладке Pick нажмите Auto-Pick , чтобы автоматически выбрать предметы для разборки из вашего инвентаря.
8. Нажмите Авторизовать .
   
9. На вкладке Результат щелкните Загрузить спецификацию , чтобы просмотреть компоненты, произведенные в результате разборки, и их стоимость.Счет «Количество», «Незавершенное производство», «Затраты» и «Трудозатраты и накладные расходы» можно настроить вручную, если окончательное значение отличается от значения спецификации.
   • ПРИМЕЧАНИЕ: Иногда разделение компонентов может вызвать небольшую ошибку округления, что означает, что общая стоимость разобранного продукта не совсем соответствует стоимости продуктов, созданных путем разборки. Это вызовет ошибку и не позволит завершить разборку. Поле «Общая стоимость» доступно для редактирования для компонентов на вкладке «Результат»; его следует изменить так, чтобы итоговая сумма соответствовала общей стоимости от Pick.
10. Нажмите Завершить для завершения.
    

Автоматическая разборка

[наверх]

Автоматическая разборка запускается после авторизации Полученного запаса для простого заказа на поставку.

• Для расширенных закупок (действия с несколькими счетами-фактурами и полученными запасами) как полученный запас, так и счет-фактура должны быть авторизованы.
• Автоматически собранные продукты, для которых был произведен возврат средств / выдана кредитная нота, автоматически разбираются при пополнении запасов.
• Автоматическая разборка НЕ запускается во время заказов на продажу. Возможно, вам придется вручную разобрать продукт, чтобы его компоненты были доступны для заказа на продажу.

ПРИМЕЧАНИЕ. Только методы калькуляции FIFO, FIFO-Batch, FIFO-Special и Special-Batch поддерживают автоматическую разборку.

Чтобы разобрать элемент автоматически:

1. Перейдите к Инвентарь → Продукты .
2. Выберите продукт, который вы хотите разобрать автоматически.
3. Проверьте коробку Auto-disassembly .
4. Сохраните товар.

Невозможно вручную изменить результаты разборки, когда выбрана автоматическая разборка. Когда продукт разбирается автоматически, компоненты будут храниться в месте получения заказа на поставку.

Разборка и дополнительные единицы измерения

[наверх]

Использование функции дополнительных единиц измерения функционально идентично автоматической разборке ящика элементов на несколько отдельных элементов (или автоматической сборке отдельных элементов в один футляр или упаковка).Это рекомендуемый вариант для предметов, которые продаются в одиночных разрядах и коробках (например, одна бутылка вина, упаковка из 6, 12 штук), а также при конвертации единиц. Автоматическая сборка будет автоматически включена для отдельного элемента, а автоматическая разборка будет автоматически включена для собранного продукта.

Если вы хотите отключить автоматическую разборку для дополнительных единиц измерения, вы можете создать спецификации для собранных продуктов и сохранить ручную разборку. Обратите внимание, что доступность продукта не будет автоматически рассчитывать количество доступных ящиков / групповых упаковок для отдельных компонентов.

Частичная разборка

[вверх]

DEAR не поддерживает частичную разборку. Полное количество всегда должно быть разобрано для выполнения задачи.

Итак, если у вас есть сборка объемом 10 000 литров, и вы хотите разобрать только 4000 литров, чтобы использовать их для чего-то еще, вам все равно нужно будет разобрать все 10 000 литров. В качестве обходного пути вы можете создать Локацию, куда вы можете временно перенести оставшиеся 6000 л, чтобы использовать их позже. Таким образом, вы можете отслеживать и знать, что это остаток от частичной разборки.

[наверх]

Вы можете просмотреть все исторические разборки, перейдя к Production → Disassemblies .

Просматривайте подробности предыдущих разборок, щелкая по каждой строке.

[наверх]

В этом отчете показаны завершенные разборки за выбранный период времени. Используйте этот отчет для анализа разобранного количества, стоимости разобранного элемента и любых затрат на услуги во время эксплуатации.Элементы могут быть отфильтрованы по категории компонентов и разборки, марке, тегам продукта и т. Д.

По умолчанию в отчете отображаются все разборки, которые были завершены, авторизованы или в настоящее время выполняются за последний месяц.

Пользователям необходимо разрешение на создание отчетов по инвентаризации для доступа к этому отчету.