Регуляция состава очаговых комплексов и их разборка кальций-зависимой протеазой кальпаином

. 2002 г., 1 сентября; 115 (часть 17): 3415-25.

doi: 10.1242/jcs.115.17.3415.

Амит Бхатт ¹ , Ирина Каверина, Кэрол Оти, Анна Хаттенлохер

принадлежность

• ¹ Кафедра педиатрии и фармакологии, Университет Висконсина, 1300 University Avenue, Медицинская школа Университета Висконсина, Мэдисон, Висконсин 53706, США.

• PMID: 12154072
• DOI: 10.1242/JCS.115.17.3415

Амит Бхатт и др. Дж. Клеточные науки.

2002 .

. 2002 г., 1 сентября; 115 (часть 17): 3415-25.

doi: 10.1242/jcs.115.17.3415.

Авторы

Амит Бхатт ¹ , Ирина Каверина, Кэрол Отей, Анна Хаттенлохер

принадлежность

• ¹ Кафедра педиатрии и фармакологии, Университет Висконсина, 1300 University Avenue, Медицинская школа Университета Висконсина, Мэдисон, Висконсин 53706, США.

• PMID: 12154072
• DOI: 10.
  1242/JCS.115.17.3415

Абстрактный

Миграция клеток требует регулируемого и динамичного оборота адгезивных комплексов. Ранее мы показали, что кальций-зависимая протеаза, кальпаин, регулирует организацию адгезивных комплексов и отделение клеток во время миграции клеток. В настоящее время предоставлены доказательства того, что ингибирование кальпаина за счет сверхэкспрессии эндогенного ингибитора кальпаина, кальпастатина и фармакологических ингибиторов приводит к ингибированию разборки адгезивного комплекса со стабилизацией GFP-винкулина и GFP/RFP-зиксина на периферии клетки. Кальпаин также был необходим для опосредованного микротрубочками оборота участков адгезивных комплексов после вымывания нокодазола, что указывает на то, что кальпаин может опосредовать фокальную разборку комплекса ниже по течению от микротрубочек. Используя двойную визуализацию RFP-зиксин и GFP-альфа-актинин, мы наблюдали временную и пространственную связь между локализацией альфа-актинина в фокальных контактах и ​​последующей разборкой или транслокацией комплексов, содержащих RFP-зиксин, в области ретракции клеток.

Ингибирование кальпаина нарушало локализацию альфа-актинина в фокальных контактах, содержащих зиксин, и разборку фокального комплекса или транслокацию в центр клетки. Кроме того, нарушение локализации альфа-актинина в фокальных комплексах посредством экспрессии палочковидного домена альфа-актинина, но не головного домена, приводило к ингибированию разборки фокальной адгезии, аналогичному ингибированию кальпаином. Наши исследования предполагают новый механизм действия, посредством которого кальпаин может модулировать локализацию альфа-актинина в фокальных комплексах и их последующую разборку или транслокацию.

Похожие статьи

• Кальпаин-опосредованный протеолиз талина регулирует динамику адгезии.

  Франко С.Дж., Роджерс М.А., Перрин Б.Дж., Хан Дж., Беннин Д.А., Кричли Д.Р., Хаттенлохер А. Франко С.Дж. и др. Nat Cell Biol. 2004 г., 6 октября (10): 977-83. дои: 10.1038/ncb1175. Epub 2004, 19 сентября. Nat Cell Biol. 2004. PMID: 15448700

• Динамика альфа-актинина в фокальных спайках и стрессовых волокнах визуализируется с помощью альфа-актинин-зеленого флуоресцентного белка.

  Эдлунд М., Лотано М.А., Отей К.А. Эдлунд М. и др. Клеточный подвижный цитоскелет. 2001 март; 48 (3): 190-200. doi: 10.1002/1097-0169(200103)48:33.0.CO;2-C. Клеточный подвижный цитоскелет. 2001. PMID: 11223950

• Конформационное состояние Tes регулирует его зиксин-зависимое привлечение к фокальным адгезиям.

  Гарвалов Б.К., Хиггинс Т.Е., Сазерленд Д.Д., Зеттл М., Скэплхорн Н., Кохер Т., Пиддини Э., Гриффитс Г., Уэй М. Гарвалов Б.К. и соавт. Джей Селл Биол. 2003 14 апреля; 161 (1): 33-9. doi: 10.1083/jcb.200211015. Джей Селл Биол. 2003. PMID: 12695497 Бесплатная статья ЧВК.

• Зиксин не локализуется совместно с сосудорасширяющим фосфопротеином (VASP) на кончиках ламеллоподий и проявляет другую динамику по сравнению с винкулином, паксиллином и VASP в фокальных спайках.

  Роттнер К., Краузе М., Джимона М., Смолл СП, Вехланд Дж. Роттнер К. и др. Мол Биол Селл. 2001 г., 12 октября (10): 3103-13. doi: 10.1091/mbc.12.10.3103. Мол Биол Селл. 2001. PMID: 11598195 Бесплатная статья ЧВК.

• Дифференциальная динамика альфа-5-интегрина, паксилина и альфа-актинина при формировании и разборке спаек в мигрирующих клетках.

  Лаукайтис К.М., Уэбб Д.Дж., Донаис К., Хорвиц А.Ф. Лаукайтис С.М. и соавт. Джей Селл Биол. 2001 25 июня; 153 (7): 1427-40. doi: 10.1083/jcb.153.7.1427. Джей Селл Биол. 2001. PMID: 11425873 Бесплатная статья ЧВК.

Посмотреть все похожие статьи

Цитируется

• Эволюционная и физиологическая перспектива механизма адгезии клеток к субстрату для миграции клеток.

  Фьерро Моралес Дж. К., Сюэ К., Рох-Джонсон М. Fierro Morales JC и др. Front Cell Dev Biol. 2022 25 августа; 10:943606. doi: 10.3389/fcell.2022.943606. Электронная коллекция 2022. Front Cell Dev Biol. 2022. PMID: 36092727 Бесплатная статья ЧВК. Обзор.

• Дифференциальная экспрессия интегриновых адгезивов определяет резидентность человеческих NK-клеток и стадию развития.

  Хегевиш-Соллоа Э.

  , Сео С., Манди-Боссе Б.Л., Мишра А., Вальдман Э.Х., Моррас С., Грунштейн Э., Коннорс Т.Дж., Фрейд А.Г., Мейс Э.М. Хегевиш-Соллоа Э. и соавт. Дж Иммунол. 2021 1 августа; 207 (3): 950-965. doi: 10.4049/jimmunol.2100162. Epub 2021 19 июля. Дж Иммунол. 2021. PMID: 34282002 Бесплатная статья ЧВК.

• Роль эффектора TarP Chlamydia типа III после инвазии в модулировании динамики и организации фокальных спаек клеток-хозяев.

  Педроса А.Т., Мерфи К.Н., Ногейра А.Т., Бринкворт А.Дж., Туэйтес Т.Р., Аарон Дж., Чу Т.Л., Карабео Р.А. Педроса А.Т. и соавт. Дж. Биол. Хим. 2020 23 октября; 295(43):14763-14779. doi: 10.1074/jbc.RA120.015219. Epub 2020 25 августа. Дж. Биол. Хим. 2020. PMID: 32843479Бесплатная статья ЧВК.

• Стимулируемая кальцием разборка фокальных спаек, опосредованная комплексом ORP3/IQSec1.

  D’Souza RS, Lim JY, Turgut A, Servage K, Zhang J, Orth K, Sosale NG, Lazzara MJ, Allegood J, Casanova JE. Д’Суза Р.С. и др. Элиф. 2020 1 апреля; 9: e54113. doi: 10.7554/eLife.54113. Элиф. 2020. PMID: 32234213 Бесплатная статья ЧВК.

• Биоэнергетика адгезии на основе интегринов, от динамики одиночных молекул до устойчивости макромолекулярных комплексов.

  Маккей Л., Хадра А. Маккей Л. и др. Comput Struct Biotechnol J. 2020 Feb 13;18:393-416. doi: 10.1016/j.csbj.2020.02.003. Электронная коллекция 2020. Comput Struct Biotechnol J. 2020. PMID: 32128069 Бесплатная статья ЧВК. Обзор.

Просмотреть все статьи «Цитируется по»

Типы публикаций

термины MeSH

вещества

Грантовая поддержка

• 5K08 CA 76631/CA/NCI NIH HHS/США
• R01 CA85862-01/CA/NCI NIH HHS/США

Как очистить видео и аудио от шумов за 30 секунд

Обложка через

Ищете советы по очистке звука для Premiere Pro или After Effects? Вот как быстро исправить шумный звук и видео.

Верхнее изображение взято с Shutterstock.

Независимо от того, занимаетесь ли вы монтажом или съемкой, шумные кадры являются одним из самых неприятных препятствий, с которыми вы можете столкнуться в своем рабочем процессе. Хотя вы не можете сделать отснятый материал идеальным, вы можете улучшить качество видео и звука настолько, что зрители этого не заметят. Магия кинопроизводства всегда скрывается за кулисами постпродакшна. Вот несколько простых шагов, которые необходимо выполнить для исправления шумного звука и видео в Premiere Pro.

Очистка видео с шумами

Итак, для этого быстрого исправления мы будем работать в After Effects. Итак, выберите клип, над которым хотите работать, щелкните правой кнопкой мыши и нажмите «Заменить композицией After Effects». Это откроет After Effects. Затем перейдите в «Эффекты» и выберите «Удалить зерно». Перетащите это в свою композицию, а затем перейдите в «Элементы управления эффектами» для эффекта «Удалить зернистость». Здесь вы сможете увеличить «дешумирование» клипа, увеличив «Pass». Я предлагаю поиграть здесь, чтобы увидеть, что лучше всего подходит для вашего клипа.

После этого композиция автоматически синхронизируется в Premiere Pro, чтобы вы могли продолжить редактирование. Этот эффект требует большого объема рендеринга, поэтому вы можете захотеть выполнить рендеринг после того, как сделали это (в зависимости от того, как долго длится ваше редактирование). Если у вас по-прежнему возникают проблемы с воспроизведением клипа в Premiere Pro, экспортируйте клип из After Effects, а затем верните его в Premiere. Это должно сработать.

Очистите звук от шумов в Premiere Pro

Итак, вместо того, чтобы работать в After Effects, на этот раз мы переместим предполагаемый клип в Audition. После того, как вы открыли Audition, возьмите «Инструмент выбора времени» и выберите часть трека, которая представляет собой просто звук комнаты (без диалога). Для этого вы можете просто щелкнуть и перетащить нужную часть клипа. Теперь перейдите в Эффекты > Шумоподавление/Восстановление > Захват шумовой печати. Что это делает, так это берет фрагмент, который вы выбрали, и идентифицирует фоновый шум. Таким образом, он может удалить звук из остальной части клипа, но не из диалога.

Теперь щелкните в любом месте на временной шкале, затем вернитесь к Эффекты > Шумоподавление/Восстановление и нажмите Шумоподавление (процесс). Здесь вы начнете играть с уменьшением шума. Вы можете увеличить или уменьшить уровень шумоподавления или поиграть с уровнями децибел. Это полностью ваш выбор. Просто поиграйте с ним достаточно, чтобы ваш клип звучал так, как вы хотите. После того, как вы успешно удалили шум, отправьте клип обратно в Premiere, нажав «Command + S». Это вернет измененный клип обратно на вашу временную шкалу, как это было раньше.